咬痕DNA分析1例

对咬痕进行DNA分析 ,国外学者推荐使用两根棉签法[1] 提取 ,即先用湿棉签擦拭咬痕 ,再用干棉签擦拭 ,将两根棉签分别进行DNA提取和扩增 ,以增加检出单一个体基因型的机会。本文作者提取 1例咬痕样本进行DNA分析 ,取得满意结果 ,现报道如下。1　案例资料2 0 0 2年 11月 ,在某地女厕内发现一女尸。尸体衣物被撕毁 ,其乳房、前胸、面颊部位有咬痕 ,女尸内裤有少量血迹。用棉签蘸取少量生理盐水 ,在尸体咬痕上轻轻擦取咬痕斑迹 ,Chelex法提取棉签上的咬痕斑迹和死者心血、内裤上血迹DNA ,用ABIPro filerPlusTM 、Y PLEXTM5试剂 (REL…     

检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的 研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法 使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果 生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论 生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。     

人体脱落细胞DNA检验1例

1案例资料1.1简要案情2013年7月15日,犯罪嫌疑人撬锁进入某住户家中,盗取金佛、名贵字画及现金10余万元等物品。因现场已被严重破坏,无法提取指纹等痕迹,仅提取到1把螺丝刀,怀疑曾被嫌疑人使用,要求进行人体脱落细胞DNA检验。1.2 DNA提取及检验DNA提取取细轴棉签用TES缓冲液浸湿（半干）,     

棉织物上血斑洗涤后无损取材方式及DNA提取方法研究

目的 探究不同无损取材方式及DNA提取方法对棉织物上洗涤血斑DNA分析成功率的影响。方法 采用棉签擦拭法、植绒拭子擦拭法、脱落细胞粘取器粘取法富集洗涤棉织物上的血痕。分别采用Chelex 100法、过柱法和磁珠法提取DNA。采用常规PCR和复合PCR技术扩增目标片段并分别运用琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳技术检测目标产物。结果 植绒拭子擦拭法取材的效果最差,通过脱落细胞粘取器粘取法获得的DNA浓度、STR分型成功率均高于棉签擦拭法,且粘取法操作较简单,实践中优先推荐选择粘取法作为该类检材的取材方式。此外,DNA浓度和STR分型结果均表明过柱法提取DNA的效果优于Chelex法,而磁珠法在3种DNA提取方法中效果最差,建议实践中选择过柱法作为此类检材DNA提取的首选方法。结论 针对棉织物检材上洗涤血痕无损取材及DNA分析,优先推荐选择脱落细胞粘取器粘取法和过柱法分别进行样本取材以及DNA提取。     

利用PrepFiler Express~(TM)提取粪便DNA1例

<正>1案例资料1.1简要案情2015年12月,某地山区发生一起盗窃古墓案。现场勘验人员在现场发现成型大便两处,分别用多根棉签擦拭其表面后,送DNA实验室检验。1.2 DNA检验分别采用Chelex-100法、手工磁珠法(CON SUMMATE,武汉凯斯美特)、Prep Filer Express~(TM) BTA法(Prep Filer Express~(TM) BTA~(TM)法医DNA提取     

碎尸案中混合生物物证的DNA检验1例

<正>1案例资料1.1简要案情李某,女,2012年4月8日被杀死,碎尸后抛入江中。抓获嫌疑人孔某及其女朋友黄某,交待合伙将李某杀死后,用电锯分尸。侦查人员在嫌疑人住处提取可疑分尸工具"贝诺尔"牌角磨,以及李某、孔某、黄某3人血样要求进行DNA检验。1.2 DNA检验DNA提取用棉签擦拭上述角磨的手柄部     

砖块上脱落细胞DNA分型检验

<正>1案例检验1.1简要案情郑某,男,2013年11月被发现死于家中床上。经现场勘查及法医检验,郑某系被人用砖块打击头面部致颅脑损伤死亡。提取现场两块沾有血迹的砖块要求进行DNA检验,以提供犯罪嫌疑人分型信息。1.2 DNA检验DNA提取根据嫌疑人可能的持砖方式,用棉签擦拭砖块1、砖块2后剪取棉纤维,加入裂解液500μL,56℃1h,95℃30min;采用硅珠法提取DNA,提     

擦拭直扩法和粘取磁珠法检测衣物脱落细胞DNA的比较

<正>法医检案中经常遇到对衣物接触DNA检验的要求,目前多为先用真空吸附或胶带粘取的方法富集衣物上的脱落细胞,然后用Chelex-100法、磁珠法或硅珠法提取DNA进行STR分型检测[1-5]。上述方法操作均较繁琐,且容易污染。本研究用生物检材采集与保存套管的尖头棉签擦拭穿过的衣物上的脱落细胞,然后剪取少量棉签头部,采用直接扩增法及用脱落细胞粘取器粘取后磁珠提取法获得脱落细胞DNA,并     

通过枣核上唾液斑的DNA检验侦破盗窃案1例

1案情简介 2011年11月25日,某区某局三楼办公室发生盗窃案,侦查人员在现场发现吃剩的枣核数枚,分别包装、送检。 2检验过程及结果使用＂双棉签技术＂[1]提取枣核表面的唾液斑,放入1.5 mL Eppendorf管,用QIAamp DNA Investigator试剂盒（德国Qiagen公司）抽提DNA：加入ATL缓冲液180μL、PK 20μL,振荡混匀,56℃保温2h以上;加入AL缓冲液200μL、载体RNA（Carrier-RNA）2μL,70℃保温10min，     

植绒棉签在案件检验中的应用3例

<正>1案例1.1案例1简要案情:某日,某地发生一起柴油盗窃案件,现场提取到数个矿泉水瓶,疑为嫌疑人所留。DNA提取与检验:勘查人员用30μL超纯水浸湿弯头4N6 FLOQSwabs誖植绒棉签(意大利COPAN公司)对瓶口进行擦拭。饮料瓶口呈弧形且有螺纹,弯头棉签可以与瓶口吻合,使瓶口的脱落细胞尽可能多地被转移。擦拭完的棉签直接插回独立包装的套管     

刑事现场188份接触DNA检材法医学检验分析

目的分析188份接触DNA检材的提取、送检和检验结果,探讨接触DNA检出率及可能影响接触DNA检验的因素。方法收集本辖区2016年1月至2016年10月提取并送检的188份接触DNA检材,按照检材载体性质、提取方法、送检时间、检出率等进行分类,采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析和χ2检验。结果188份接触DNA检材成功进行STR分型的有38份,检出率为20.21%;其中表面质软、粗糙的载体接触DNA检出率58.82%,高于其它载体接触DNA检出率组的差异具有统计学意义;直接原物提取的接触DNA检材检出率42.11%,高于脱落细胞粘取器提取、棉签拭子转移提取的检出率组的差异具有统计学意义;送检时间早的检材检出率高于送检时间晚的检材组且具有统计学意义。结论接触DNA检材的检出率受载体性质、提取方法、送检时间等因素影响,日常现场勘查时要注重发现检出率高的载体上的接触DNA选择适当的方法提取,并及时送检。     

木柄铁锤水中浸泡两天后DNA检验1例

正1案例资料1.1简要案情2015年3月3日17时许,本市发生一起因感情纠纷杀死两人、打伤一人的案件。两日后嫌疑人被抓获,经指认在案发地附近小河中提取作案凶器一把木柄铁锤送检。1.2 DNA检验生物样本采集采用多根棉签干湿二步擦拭法,对送检铁锤的凹陷处污泥覆盖部分进行重点擦拭,力度偏重,将采集后的棉签上的棉絮剥离入离心套     

咀嚼后槟榔表面唾液斑DNA检验1例

1案例资料1.1简要案情某日,3名男子在公共场所寻衅滋事逃逸,警察在现场提取到遗留的3枚嫌疑人咀嚼过的槟榔,要求进行DNA分型。1.2 DNA检验样本处理3枚槟榔中2枚较干燥,表面纤维稀疏蓬松,直接剪取槟榔纤维;1枚表面相对潮湿,用无菌脱脂棉在表面进行擦拭。DNA提取及纯化将上述槟榔纤维和擦拭脱脂棉分别置于1.5mL EP管中,加1 000μL纯水清洗,离心,弃上清,保留约100μL液体和沉淀物;     

口腔拭子DNA检验的实时定量研究

目的寻求提高口腔拭子的DNA检验效率的方法。方法对来源于不同个体或同一个体不同擦拭次数的口腔拭子用Chelex-100或磁珠法提取的DNA用实时定量PCR技术进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统在ABI3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果在建立的Identifiler系统8μl扩增体系中,3个月内的口腔拭子用Chelex-100法提取的DNA模板1μl量较3μl量扩增效果好,磁珠法提取的DNA模板用量大小对复合扩增检测影响较小。结论用棉签擦拭颊粘膜5次制备口腔拭子,取其头部的约1/4用200μlChelex-100法提取DNA,然后用1μl模板进行复合扩增,是提高口腔拭子的DNA检验效率的简便可行的方法,但陈旧口腔拭子用磁珠法提取更能保证复合扩增分型成功。     

法医学DNA提取试剂盒优化及适用性评价

目的用磁性纳米磁珠和自主设计的试剂体系及提取流程,来建立一种基因组DNA的快速提取优化方案。方法利用自主研制的法医DNA提取纯化试剂盒设计实验方案对陈旧棉签血样进行DNA提取,用紫外分光光度计分析定量,通过对实验结果进行分析比较进一步优化自主研发的法医学DNA提取试剂盒。用优化之后的试剂盒提取各种不同的疑难捡材,探索本试剂盒的适用性。结果通过优化试验条件,同样获得了各种检材理想的DNA提取效果,却大大降低了DNA样本的提取成本。结论经优化过的国产磁珠DNA提取试剂盒完全可以应用与法医DNA检测中。     

刀具水浸4天DNA检验1例

1案例资料 1.1简要案情 2011年10月21日晚,本市发生一起抢劫杀人案,受害人邵某被单刃锐器刺穿心脏和右侧肺脏致失血死亡。10月25日抓获嫌疑人,经现场指认在案发地附近池塘中提取作案刀具遂送检（图1）。1.2 DNA检验1.2.1 DNA提取用棉签分别从刀刃、刀柄和刀柄刃结合部（将刀柄刃结合处剪断）三个部位进行擦拭。     

QIAcube小型工作站在生物接触类检材提取中的应用研究

目的 探讨QIAcube工作站在生物接触类检材中的提取效果。方法 将90份以脱落细胞粘取膜、实物样本(纱线转移)或棉签擦拭物为载体的生物接触类检材,分别采用QIAcube工作站、EZ1工作站和手工硅珠法进行基因组DNA提取、定量并检测15个常染色体基因座的STR分型。结果 利用QIAcube工作站提取的生物接触类检材平均检出率达到44.4%,其中脱落细胞粘取膜组检出率为56.7%,实物纱线转移组检出率为46.7%,棉签擦拭物组检出率为30.0%。脱落细胞粘取膜组和实物样本(纱线转移)组均获得较好的STR分型结果,所得DNA浓度均优于棉签擦拭物组样本。QIAcube工作站组平均检出率为44.4%,手工硅珠法组平均检出率为43.2%,而EZ1工作站组平均检出率为26.9%,前两者平均检出率明显高于EZ1工作站组。QIAcube工作站组与硅珠法组所得DNA浓度无显著差异,但均明显高于EZ1工作站组。QIAcube工作站组与硅珠法组检测得到的STR分型RFU值及峰值均衡性均优于EZ1工作站组,尤其是大片段基因在前两组中均能够被完整检测到。结论 采用QIAcube工作站提取生物接触类检材检出率高,STR分型结果良好,可应用于法医物证实际案件检验。     

生物检材采集与保存套管的应用

目的探讨生物检材采集与保存套管在法医学中的应用价值。方法在不同温、湿度环境下，观察悬空放置在生物检材采集与保存套管、有孔与外界相通的套管及密闭管内的湿润棉签的干燥时间30次；分别用生物检材采集与保存套管和医用棉签采集纸袋保存口腔细胞、血液、皮肤脱落细胞样本各20例，磁珠法提取DNA并进行DNA定量；用生物检材采集与保存套管采集口腔脱落细胞和血样进行DNA直接扩增。结果在温度4～30℃、相对湿度21％～90％的环境下，湿润棉签在套管内的平均干燥时间为7．89h，有孔管内的为23．30h，密闭管内观察15天仍不干燥，出现霉斑。生物检材用套管采集保存比医用棉签采集纸袋保存方式获得的DNA量显著提高，平均高达0．968倍；用套管采集口腔细胞和血样进行直接扩增，操作简单方便，成功率高。结论生物检材采集与保存套管具有快速干燥、对检材无损耗和浓缩等优点，可提高检材DNA的提取效率，且适合直接扩增。     

直接扩增法在血痕、肋软骨和唾液检材中的应用

目的采用Identifiler Direct PCR试剂盒直接扩增法进行棉签擦拭血痕、肋软骨和烟蒂唾液斑DNA分型检验,并评价其应用价值。方法收集棉签擦拭血痕、烟蒂各20份,肋软骨10份,采用Identifiler Direct PCR试剂盒进行直接扩增及分型检验,以相同检材采用磁珠法/Chelex-100法提取模板DNA后扩增检验结果作为对照,对两组所得结果进行比较分析。结果棉签擦拭血痕和肋软骨一次检测完整分型率均为100%,分型结果与对照组一致;烟蒂上唾液斑有2份检材第一次未能完整分型,调整方法再次检验后获分型成功。结论实际检案中的棉签血痕、肋软骨和烟上唾液斑,采用直接扩增法检测,方法简单、快速、稳定、检材用量小,可在实际检案中选择使用。     

利用震荡冲洗法提取指甲末端异体细胞

1案例资料 1.1简要案情2013年某日晚9时许,一女子在某施工路段,被一男子从后方捂住口鼻部,拖至路边实施抢劫。案发后,剪取受害人的指甲末端,并及时送至DNA实验室检验。1.2 DNA检验及结果1.2.1初检DNA用半干的棉签按照两步擦拭法[1]擦拭10枚指甲末端,剪下棉签球头,分别放入1.5m L离心管中并加入500μL试剂混合液（400μL TES、80μL SLS和20μL蛋白酶K），37％消化12h。