HRP标记α—珠蛋白—3‘HVR探针进行DNA指纹分析的法医学应用研究

用ＨＲＰ标记α－珠蛋白－３ＨＶＲ ＤＮＡ探针，化学光增强法检测，获得清晰易读的ＤＮＡ指纹图，分析２１名广东地区无关个体的ＤＮＡ指纹图，平均每个个体有１９．７条谱带，灵敏度接近同位素＾３２Ｐ标记探针的水平，两个我关个体间出现同一谱带的相关 率为０．２１９。将此方法用于亲子鉴定，取得了令人满意的结果。     

33.15及33.6探针对中国人DNA指纹图的研究

目的 统计用３３．１５及３３．６探针对中国人进行ＤＮＡ指纹图检验的群体调查资料，为实际案件的检验提供理论依据。方法 应用３３．１５及３３．６探针为中国北京地区无关群体的血液进行ＤＮＡ指纹图分析。结果 应用３３．１５探针检验１５人的ＤＮＡ指纹图，无关个体间相关机率为１．０３×１０＾－１５，两无关个体间出现同一谱带的平均概率０．１７６；应用３３．６探针检验１９人的ＤＮＡ指纹图，无关个体间相关机率为１．     

用非放射性标记MYO探针进行DNA指纹分析

用非放射性标记ＭＹＯ探针进行人的ＤＮＡ指纹分析，获得了清晰易读的ＤＮＡ指纹图，并用该方法调查了云南省的７８名无关个体，经统计学分析，计算出无关个体的相关几率是３．４×１０－１０，高于３２Ｐ标记的Ｍｙｏ探针。研究结果表明该方法是一种简便、快速、灵敏、可靠、经济的ＤＮＡ指纹图检测技术，可在法医鉴定及其它领域里得到更广泛的应用。     

JL-02多位点探针DNA指纹的法医学应用研究

以自制的JL－02探针进行了DNA指纹分析，对北京地区无关个体进行了调查，计算出任意两无关个体的偶合机率为6．6×10－15；家系分析表明，谱带在亲代与子代间的传递符合孟德尔遗传规律；同一个体不同组织的DNA指纹图相同；混合斑精子DNA指纹图与相应男性血液DNA指纹图完全相同；该探针对0．5μg的基因组DNA杂交，可获得清晰可辩的DNA指纹图。证明了新探针适用于法医物证检验中的个人同一认定及亲子鉴定。     

DNA指纹技术在亲子鉴定中的应用

用非放射性标记α－珠蛋白－３＇ＨＶＲ探针在低强度洗涤条件下，对人的ＤＮＡ指纹进行了分析，获得了清晰易读的ＤＮＡ指纹图。并用该方法调查了云南省的７８名无关个体，经统计学分析，计算出无关个体的相关机率是２．４×１０－４。用该方法进行亲子鉴定，获得了满意的结果，用ＨｉｎｆⅠ和ＨｅａⅢ两种内切酶酶切，解决了子代陌生带问题，用该方法对二十余起亲权纠纷案进行了鉴定，证明该方法稳定、结果可靠，父权肯定机率均在９９．９％以上。     

33.15及33.6探针对中国人DNA指纹图的研究

目的统计用33．15及33．6探针对中国人进行DNA指纹图检验的群体调查资料，为实际案件的检验提供理论依据。方法应用33．15及33．6探针为中国北京地区无关群体的血液进行DNA指纹图分析。结果应用33．15探针检验15人的DNA指纹图，无关个体间相关机率为1．03×10-15，两无关个体间出现同一谱带的平均概率0．176；应用33．6探针检验19人的DNA指纹图，无关个体间相关机率为1．53×11-11，两无关个体间出现同一港带的平均概率为0．187；两探针均符合孟德尔遗传规律，均具有组织同一性。结论本研究结果可应用于法医物证检验的亲子鉴定及个体识别。     

HinfⅠ和HaeⅢ酶解条件对DNA指纹图的影响

用辣根过氧化物酶标记α-珠蛋白-3’－HVR探针检测同一个体的DNA，其所产生的DNA指纹图谱带随着酶解条件的变化而发生改变。由于谱带的改变，给亲子关系的同一认定带来了困难，尤其是多位点探针的检测。为了了解Hinfl和Hae皿两种酶在不同酶解时间和不同酶量的条件下对DNA指纹图谱带的影响，本文作者利用多位点探针a一珠蛋白一3’－HVR和单位点探针MSS进行检测VNTR图谱的实验。材料与方法一、材料1．无关个体血液样品取自平时破案中所剩检材；2．琼服糖（美国signla公司产）；3．Hinfl和HaeI（美国premagem公司）4．非同位素标记…     

DNA指纹技术在强奸案和亲子鉴定中的应用

在同一张膜上测定了18例无关个体血样,并计算出α-珠蛋白-3'HVR探针DNA指纹图的相关机率为4.0×10~(-12),平均每条谱带的相关机率为0.21。用此探针检验的14起强奸案和6起亲子鉴定案均获得肯定的结论。     

数字编码小卫星可变重复序列法对中国汉人分型

介绍用辣根过氧化物酶标记的寡核苷酸探针检测的数字编码小卫星MS32可变重复序列方法。经用此法研究发现，中国汉人可得到50个编码以上，无关个体前50个编码中至少有20个编码不同，未发现两个无关个体的编码相同，50个编码全部相同的概率为4．09×10-16。三种重单位，即a-型、t-型和o-型出现比例分别为61．5％、32％和6．5％。MVR－PCR得到的数字编码具有高度的变异性，识别率高，为法医物证检验提供一个新的个人识别方法。     

DNA指纹的个体特异性和细胞稳定性研究

人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的"核心"顺序构成.采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带主体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性,而且安全具有个体特异性.本文用小卫星探针33.15,调查了北京地区的60名无关个体,     

DNA技术在法医学上的应用(续)

<正> 四、DNA指纹用于个体识别因DNA具有高度多态性,因此不同个体DNA指纹图各不相同,可以进行个体识别。下面以Jeffreys的33.15DNA探针做DNA指纹图为例,说明DNA指纹图的个体识别作用。取20名随机个体DNA,以HinfI消化,Southern印迹后与33.15探针杂交,得每个人DNA指纹图。然后做相邻两个体指纹图比较,将20个个体图中区带数全部算出,取平均值、并计算标准差。然后根据相邻个体共存区带数,求出等位基     

中国北方汉族人群HLA-DQα基因型及其等位基因频率的分布

应用PCR和等位基因特异性寡该苷酸（ASO）探针杂交技术对中国北方汉族人群的HLA－DQα基因进行分型。在246例无关个体中观察到4种等位基因组成的10种基因型。等位基因频率分布在10．0～31．9％之间。基因型的分布符合Hardy－Weinberg定律。DP值为0．8669。对6个家系49个个体的调查表明，HLA－DQα基因按孟德尔方式遗传。不同人群HLA－DQα的DP值比较，中国人群高于其它人群。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

HLA-A位点DNA分型及其法医学应用

应用聚合酶链反应0寡核苷酸探针（PCR－SSO）斑点杂交技术，对222名辽宁地区汉族人群无关个体进行HLA－A基因检测，研究中国辽宁地区汉族群体的HLA－A座位基因分布状况。共检出HLA－A等位基因24个，其中以等位基因HLA－A0201最为常见，频率为0．2635；依次是2402101和1101，等位基因频率分别为0．1847和0．1262.理论杂合度为87％，个人鉴别机率为92％，非父排除率为73．3％。在中国辽宁汉族中检出73种基因型，对观察值和期望值进行X2检验，符合Hardy－Weinberg平衡定律（x2＝6．28，df＝9，0．5＜P＜0．75）。家系分析结果表明按照孟德尔方式遗传。提出的中国辽宁汉族HLA－A等位基因的遗传基因情况，可用于法医学个人识别和亲子鉴定。人类学，HLA相关疾病，及器官移植研究。     

新的人类遗传标记-脱氧核糖核酸酶Ⅰ

新的人类遗传标记－脱氧核糖核酸酶Ⅰ柳燕（司法部司法鉴定科学技术研究所；上海２０００６３）脱氧核糖核酸酶１（ＤＮａｓｅｌ）（ＥＣ．３，ｌ，４，５）是一种对ＤＮＡ具特异性的核酸内切酶，它能将单链或双链ＤＮＡ水解，生成３＇一端具游离羟基和在５＇一端具磷酸基...     

第三讲 法医DNA分型技术与方法

法医ＤＮＡ分型利用分子生物学技术检测、分析人类遗传标记 ,进行个体识别和亲子鉴定。 80年代以来 ,法医ＤＮＡ分型技术跨越了两大步 ,第一代分型是以ＤＮＡ分子杂交为核心的限制性片段长度多态性分析技术 ;第二代是以聚合酶链反应 (ＰＣＲ)为基础衍生出的各种ＤＮＡ标记分析技术。1　限制性片段长度多态性分析技术早年Ｊｅｆｆｒｅｙｓ建立的ＤＮＡ指纹技术本质是ＤＮＡ限制性片段长度多态性 (ＲＦＬＰ)分析 ,技术核心是ＤＮＡ分子杂交。ＤＮＡ指纹图谱的特异性取决于 2个因素 :一是限制性核酸内切酶特异性 ;二是探针特异性。ＲＦＬＰ分析…     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。     

用α-珠旦白-3’HVR探针研究DNA指纹

用α-珠蛋白-3’HVR探针,经Southern印迹法,对100名不相关个体及4个家系的32名相关个体的DNA指纹进行了检测,所产生的DNA图谱具有高度的个体特异性,在被测的所有个体中无一相同。经统计学计算表明,任意两个个体DNA指纹图重合率为10~(-11)。家系分析毒明,DNA片段严格按照孟德尔方式遗传。该探针的应用,将在法医学亲子鉴定和个人同一认定中发挥重要的作用。     

同卵双生子外周血DNA甲基化谱的差异

目的通过比较不同个体外周血DNA甲基化谱的差异,评估DNA甲基化在同卵双生子个体甄别中的应用价值。方法在知情同意基础上获得22对同卵双生子外周血样。抽提基因组DNA后进行重亚硫酸盐转化．采用Illuraina公司的人27k甲基化微珠芯片检测基因组27578个CpG位点的甲基化程度（启值）。依据常染色体CpG位点的序值,采用欧氏距离计算方法计算同卵双生子间以及同性男ll的无关个体间的表观遗传距离。比较同卵双生子对与无关个体对两组不同人群间的表观遗传距离差异。结果同卵双生子对人群以及无关个体对人群中的男性个体对与女性个体对的表观遗传距离差异均无统计学意义（P值分别为0．0695和0．4825）。同卵双生子对的表观遗传距离显著低于无关个体对人群（中位数：6．02νs7．20,P=0．0002）．但两组人群的表观遗传距离均显著大于4．00（P〈0．0001）。结论同卵双生子间的外周血DNA甲基化谱差异显著．DNA甲基化是进行同卵双生子个体甄别的有效生物学标记。     

中国黎族人群13个STR基因座的多态性调查

应用四色荧光标记引物复合扩增技术 ,对 2 13名黎族无关个体的 13个ＳＴＲ基因座进行分型研究 ,计算中国黎族 13个ＳＴＲ基因座的基因频率 ,统计分析各基因座的杂合度 (Ｈ)、多态信息总量 (ＰＩＣ)、个体识别机率 (Ｄｐ)及累积个体识别率、累积非父排除率。1　材料和方法1 1　材料黎族无关个体血样 2 13份 ,取自海南省琼中黎族自治县、陵水黎族自治县等黎族居住地。抽取静脉血液涂布于滤纸上 ,阴干保存。1 2　方法1 2 1　ＤＮＡ提取　所有检材均应用Ｃｈｅｌｅｘ 10 0法提取ＤＮＡ。1 2 2　ＰＣＲ试剂　用ＡＢＩ公司Ｐｒｏｆｉｌｅｒ Ｐｌ…