兔瘟巴氏杆菌波氏杆菌三联苗的研制

介绍了兔瘟（ＲＨＤ）、巴氏杆菌（Ｐｍ）、波氏杆菌（Ｂｂ）三联苗的生产工艺和免疫效果。试验兔用该苗１ｍＬ免疫后，在５，７，１２０，１９５ｄ均能抵抗致死量兔瘟强毒的攻击，保护率为１００％；对巴氏杆菌和波氏杆菌，免疫后１０ｄ能产生较强的免疫力，近期保护率分别为８３．３％和８７．９％，免疫后１９５ｄ保护率分别为７２．７％和７６．９％。该苗有效保存期在宁夏银川的室温阴凉处（６～２２℃）为１８０ｄ，在０～８℃冰箱为３６５ｄ。经野外免疫３０００多只家兔表明，该苗安全可靠，在免疫后７～１８０ｄ内能有效控制这３种传染病。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

建立了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎（ＩＢ）抗体的间接ＥＬＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１８０，酶结合物、抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母源抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１１日龄经ＩＢＶＨ１２０弱毒苗免疫雏鸡的抗体，其Ｐ／Ｎ值于免疫后第１８ｄ达峰值（３．７）。调查的５４群发病鸡，其抗体阳性率为１００％，Ｐ／Ｎ值为４．０～７．５     

牛O型口蹄疫灭活苗制苗毒种的稳定性及其免疫原性监测

用Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ法测定牛Ｏ型口蹄疫（ＦＭＤ）制苗毒种ＯＡ／５８（Ｆ４９／９１）对牛的半数最小感染量（ＭＩＤ＿（５０））为１０￣（－８．７７）／０．１ｍｌ，与ＯＡ／５８（Ｆ３０／６６）一致，表明毒种对一的毒力稳定。毒种适应制苗细胞ＢＨＫ—２１单层在７～２０代内收获的细胞毒具有稳定的蚀斑特性和感染性滴度。不同代数病毒（Ｆ１０、Ｆ１５、Ｆ２０）蚀斑克隆株的大斑、小斑株按疫苗制造与检验试行规程制成双相油佐剂疫苗免疫豚鼠，２８天后用强毒攻击，结呆Ｆ１０６／８保护，Ｆ１５６／８保护，Ｆ２０７／８保护，证明在试验代数内制苗毒种对豚鼠具有良好、稳定的免疫原性。对强毒攻击７天后的豚鼠血清中和抗体分析表明，此时血清中和效价与免疫豚鼠抗强毒感染的保护性之间无对应关系。     

不同日龄雏鸡对柔嫩艾美球虫早熟株卵囊的易感性及免疫力

对１,７和２５日龄鸡分别感染１０００个早熟柔嫩艾美球虫孢子化卵囊,感染１２０ｈ后,每２４ｈ收集粪便１次,进行卵囊计数,连续７ｄ,３种日龄鸡排卵囊总数分别为４６０．９,８０２．０和１４１７．７万个／只。感染后１４ｄ对１日龄和７日龄鸡的免疫组及相对应的２个不免疫对照组每只鸡攻击１００个柔嫩艾美球虫亲本株孢子化卵囊,攻毒１４４ｈ后,每２４ｈ收集粪便１次,进行卵囊计数,连续５ｄ,各组鸡的卵囊总量分别为４１．４,５．８和８９１．０,９７７．１万个／只。结果表明球虫卵囊对１日龄和７日龄雏鸡具有一定的感染力,分别占２５日龄雏鸡的３２．５％和５６．６％,与对照组相比,保护率分别为９５．４％和９９．４％。     

鸡减蛋综合征蜂胶佐剂灭活苗免疫期的试验研究

用三批减蛋综合征（ＥＤＳ）蜂胶佐剂灭活苗（９４０９１２、９４１０２４、９４１１２１）分别免疫成年产蛋母鸡，定期采血，连续检测ＨＩ抗体动态变化，这三批苗６个月的平均ＨＩ抗体滴度分别为７．７、８和７．７（Ｌｏｇ＿２）；用鸭胚做ＥＤＳＶ血清中和试验，其保护率均为１００％（５／５，５／５，５／５）；用ＥＤＳ２０６油苗和ＥＤＳ白油苗同时分别免疫蛋鸡，做平行对比ＨＩ抗体检测，其６个月的平均ＨＩ抗体效价分别为７．７和７（Ｌｏｇ＿２）。说明ＥＤＳ蜂胶苗的免疫期不短于ＥＤＳ油苗的。     

猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的研究--效力、最小免疫量、免疫持续期和保存期试验

对中国农业科学院兰州兽医研究所研制的 8批猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗进行了效力试验 ,并对其中的 3批疫苗进行了最小免疫量、免疫持续期和保存期试验。结果表明 ,免疫猪对APP(Actinobacilluspleuropneumoniae) 1、3、7血清型强毒攻击的近期保护率分别为 91.6%、91.6%和 95 .8% ;免疫剂量为 1mL时 ,对APP 1、3、7血清型强毒攻击的保护率分别为 3 3 .3 %、3 3 .3 %和 5 0 .0 % ;免疫剂量为 2mL时 ,保护率分别为 88.9%、88.9%和 10 0 % ;免疫剂量为 3mL或 4mL时 ,保护率均为 10 0 % ;免疫后 12 0d和 180d时 ,攻毒保护率分别为 10 0 %、88.9%、10 0 %和 88.9%、77.8%、10 0 % ;疫苗经 4～ 8℃保存 180d和 3 60d后 ,攻毒保护率分别为 88.9%、10 0 %、10 0 %和 10 0 %、77.8%、88.9%。     

牛O-A型口蹄疫双价灭活苗研究——小白鼠接种疫苗后的细胞免疫应答

用牛Ｏ型和Ａ型口蹄疫（ＦＭＤ）双价灭活苗免疫小白鼠后，通过四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法检测了其病毒特异性Ｔ细胞增殖应答，相应抗原对免疫组淋巴结细胞的刺激增生作用高于未免疫对照组；通过氨基黑－１０Ｂ比色分析法检测了其致敏淋巴细胞对靶细胞的杀伤率，免疫组为１４．３％～１５．５％，未免疫组为３．２％；通过常规毛细管法检测了白细胞移动指数（ＭＩ），免疫组为０．７５和０．７０，未免疫组为１．１３。以上３项检测结果经Ｆ检验，均达到１％的显著水平，表明小白鼠接种牛Ｏ型和Ａ型ＦＭＤ双价灭活苗后，激发了病毒特异性细胞免疫应答     

阿维菌素浇注剂对牛痒螨病的疗效试验

选择自然感染牛痒螨的杂交牛３０头，将其分成６组，每组５头，第１～４组分别用阿维菌素浇注剂（阿维必淋）按０．２，０．３，０．４和０．５ｍｇ／ｋｇ体重剂量在牛背部皮肤１次浇注给药；第５组用阿维菌素注射液（阿福丁）皮下１次注射；第６组为不治疗对照组。通过治疗后不同时间对每头试验牛皮肤固定部位的寄生虫检查和临床观察结果，评估阿维菌素浇注剂对牛痒螨病的疗效。治疗后第７ｄ显微镜检查时，仅从阿维菌素浇注剂０．２ｍｇ／ｋｇ体重剂量组的２头牛分别查到１和３个活螨（寄生虫指数为１）；之后，第１４，２１和３５ｄ显微镜检查时，各治疗组牛都未查到活螨（寄生虫指数为０）；治疗后第７ｄ观察，各治疗组牛的临床症状和皮肤病变都有程度不同的减轻，到第２１ｄ治疗组牛临床症状全部消失并康复。对照组牛被观察到１４ｄ，感染程度较试验开始时更严重。试验结果表明阿维菌素浇注剂体表浇注给药，０．３ｍｇ／ｋｇ体重剂量对牛痒螨有极强的杀灭作用，与阿维菌素注射液推荐剂量０．２ｍｇ／ｋｇ体重剂量的效果相同。     

鸡病毒性关节炎JN－1株疫苗的免疫研究

将鸡病毒性关节炎病毒（ＡＶＡＶ）Ｊ－１株经一系列培养和蚀斑克隆，筛选出一株蚀斑大小为２．７～３．１ｍｍ的克隆株（ＪＮ－１株）。该株分别以１０￣（５·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）足掌皮下注射和１０￣（４·７２５）～１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射１日龄肉鸡，以５×１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射肉用种鸡，均不产生任何临床症状和病理变化；在敏感雏鸡体内传代５次和鸡胚细胞内传代１０次，无毒力返强现象。雏鸡的最低免疫剂量为１０￣（３·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０），抗体持续时间达９个月以上。用ＪＮ－１株免疫１日龄肉用雏鸡后７、１４、２１和２８天分别用强毒于足掌皮下攻击，临床保护率分别为２／１０、９／１０、１０／１０、１０／１０，病理保护率分别０／１０、７／１０、９／１０、１０／１０。抗体应答反应和特异性淋巴细胞转化试验证明，ＪＮ－１株的免疫作用是由细胞免疫和体液免疫共同完成。体外中和病毒试验显示，ＪＮ－１株抗血清能中和Ｊ－１、Ｓ＿（１１３３）、ＦＤＯ和Ｈ＿（９３０７）株。在５个有疫情的肉用种鸡场共免疫２８０００余只仔鸡和种鸡，免疫后再无ＡＶＡ疫情发生。     

阿维菌素浇注剂对牛皮蝇第三期幼虫的驱杀效果试验

将自然感染牛皮蝇第三期幼虫的杂交牛分成５组，每组１０头，第１～４组分别用阿维菌素浇注剂（阿维必淋）０．２，０．４和０．５ｍｇ／ｋｇ体重剂量皮肤浇注给药和阿维菌素注射液０．２ｍｇ／ｋｇ体重剂量皮下注射，第５组为不治疗对照组。治疗后第７，１５，３０和４５ｄ连续检查结果，在阿维菌素浇注剂０．２ｍｇ／ｋｇ和０．４ｍｇ／ｋｇ剂量组各发现１头牛皮下有１个第三期幼虫存活，两组的驱杀率和治愈率都分别为９９．４％和９０．０％；阿维菌素浇注剂０．５ｍｇ／ｋｇ剂量组和阿维菌素注射液０．２ｍｇ／ｋｇ剂量组牛没有发现存活的第三期幼虫，驱杀率和治愈率均为１００％。     

猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究

用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Ｖｅｒｏ等传代细胞的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）Ｇ１强毒株，通过Ｖｅｒｏ、ｐＫ１５、ＳＴ细胞株的连续传代，证明第７２代毒已被致弱。用８３代毒（Ｐ８３）对吃初乳前的小猪以８～１０ｍｌ剂量口服连续传５代，每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定，并于增殖后作为次代接种材料，结果５代毒均未引起小猪发病，证实该代次毒株的安全、稳定，达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。用Ｐ８３制成弱毒疫苗，对２２头８～１０日龄小猪进行免疾效力试验，１４头口服免疫，８头颈肌注射免疫，剂量均为２ｍｌ／头。免疫后２１ｄ以最小发病量（即原毒液的１：１２稀释液）及原毒液的２倍、４倍和８倍的稀释液经口进行强毒攻击，对照组１２头也以相对剂量同时攻击。结果免疫组仅口服免疫、经大于最小强毒攻击量６倍剂量攻击组中１头（１／２）有一过性轻微腹泻，发病不到２４ｈ即恢复。对照组的１２头中有１０头典型发病，严重腹泻，并有寒颤等症状，病程长达３～６ｄ，７ｄ后腹泻症状消失，但体况明显削瘦。试验证明Ｐ８３制备的弱毒疫苗的总免疫效力达９４．６％，表明Ｐ８３已具备弱毒疫苗株的要求。     

鸡大肠埃希氏菌多价油乳剂灭活苗的研制

鸡大肠埃希氏菌多价油乳剂灭活苗，是用从天津市各区（县）主要养鸡场和养鸡户鸡群中分离到的５个优势血清型（Ｏ１１１，Ｏ８９，Ｏ７８，Ｏ８６，Ｏ３０）菌株的各自培养物，经甲醛灭活后制成的油乳剂苗，每１ｍＬ含菌量为１００亿，每只鸡颈部皮下或肌肉注射０．５ｍＬ，１５ｄ产生较强免疫力，对同型菌株的保护率为９１．６７％，免疫期可持续６个月以上，安全性和免疫原性良好。     

鸡新城疫－减蛋综合征蜂胶佐剂灭活二联苗的研究

首次用蜂胶作为佐剂，研制出鸡新城疫－减蛋综合征（ＮＤ－ＥＤＳ）二联灭活苗。在开产前１个月左右，用该苗按０．５ｍｌ／只的剂量皮下或肌肉注射免疫蛋鸡，接种后２０ｄ测ＮＤ抗体（ＨＩ法）效价为６．２５～７．０（ｌｏｇ２，下同），ＥＤＳ－７６抗体（ＨＩ法）效价为６．５～８．０。用ＮＤ－ＥＤＳ油乳剂灭活二联苗做对照，进行免疫持续期平行测定对比试验，免疫后１８０ｄ，蜂胶苗免疫组鸡的ＮＤ抗体滴度为８．５～８．７，ＥＤＳ－７６抗体滴度为８．３～８．５，与油苗免疫对照组鸡的ＮＤ抗体（８．６）和ＥＤＳ－７６抗体（８．１）效价相比，无明显差异（Ｐ＞０．０５，Ｐ＞０．０５）。用禽胚做中和试验揭示，该苗免疫半年后，其保护率仍可达９０％以上。田间试验表明该苗安全性理想；免疫４．５月ＮＤ抗体效价达９．０，ＥＤＳ－７６抗体效价为８．０     

兔瘟巴氏杆菌魏氏梭菌三联灭活苗的研制与应用

用人工感染兔瘟病兔的肝、脾、肾及从患急性巴氏杆菌病和魏氏梭菌性肠炎病兔分离的细菌制成氢氧化铝甲醛灭活苗（兔三联苗）。试验兔于免疫后７、５０、１００和１８０天时均能抵抗致死量兔瘟强毒的攻击；在免疫后２０天时全部能抵抗１０个最小致死量的兔巴氏杆菌培养物的攻击，经７５天保护率也为１００％；免疫后４５天用魏氏梭菌培养物攻击，其保护率为１００％；免疫后１２０天分别用兔巴氏杆菌与魏氏枝苗培养物攻击，其保护率均为７５％。该疾苗有效保存期为４～６℃１０个月，１０～１５℃６个月，１８～２５℃３个月。在流行兔瘟、已氏杆菌病、魏氏梭菌病的兔场试用该疫苗免疫家兔，在免疫后７天至８个月内能有效地预防这几种传染病。     

西咪替丁对鸡细胞和体液免疫功能的作用

观察了西咪替丁和左旋咪唑对鸡细胞和体液免疫功能的作用。对２８ 日龄鸡每天分别按２ ．５ 、１０ ．０ 、１００ ．０ 和４００ ．０ ｍ ｇ／ｋｇ 体重西咪替丁或２ ．５ 、１０ ．０ ｍ ｇ／ｋｇ 体重左旋咪唑饮水给药，连用３ ｄ 后再分别肌肉注射绵羊红细胞（ＳＲＢＣ） 和牛血清白蛋白（ＢＳＡ） 或布鲁氏菌（ＢＡ） 抗原。测定外周血淋巴细胞转化率和ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 淋巴细胞比值；测定血清ＳＲＢＣ、ＢＳＡ、ＢＡ 抗体效价和血清补体总活性。结果表明，西咪替丁能明显增强鸡外周血Ｔ 淋巴细胞功能，但对Ｂ 淋巴细胞无明显影响；明显升高血清ＳＲＢＣ、ＢＳＡ、ＢＡ 抗体效价；１０ ．０ ～４００ ．０ ｍ ｇ／ｋｇ 体重西咪替丁能明显升高ＣＤ＋４ ／ＣＤ＋８ 淋巴细胞比值和血清总补体活性。西咪替丁与左旋咪唑相比具有非常类似的作用。     

狂犬病 犬肠炎 犬瘟热 犬腺病毒病 犬副流感五联弱毒冻干疫苗的研究

从国外引进的犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＰＶ）、犬腺病毒－２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒（ＣＰＩＶ）四联弱毒样品中，分离筛选出增殖性良好的ＣＰＶ－ＸＮ１，ＣＡＶ２－ＸＮ３和ＣＰＩＶ－ＸＮ４株。另外还通过离体异种细胞交叉传代，获得的ＣＤＶ－ＸＮ１１２弱毒株；从狂犬病毒（ＲＶ－ＥＲＡ）株疫苗样品中筛选出ＥＲＡ８３６株。经试验证明这５株病毒在５代以内可作为制苗用种毒。采用静置和旋转培养法高滴度扩增这５株弱毒，必要时还采用低温培养和物理浓缩法进一步提高病毒滴度。５株弱毒细胞培养物与保护剂按适当比例混匀，制成犬五联弱毒疫苗，给８周龄以上的血清抗体阴性犬每只注射２ｍｌ，在１５ｄ内产生针对犬六大疫病的坚强免疫力，免疫期不低于９个月；—２０℃保存期不低于２４个月，２～８℃保存不低于９个月，室温（１８～２２℃）保存不低于６０ｄ，各种弱毒的滴度无明显降低，保护率达１００％。给５０００多只幼犬分别于２月和３月龄时各注射１个剂量（２ｍｌ）五联苗，９个月内进行追踪观测未发现不良反应。５００余只免疫犬的血清学监测证明本联苗免疫力确实。     

兔源抗IBDV独特型抗体疫苗的制备

用纯化的抗鸡传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体免疫家兔，将所获效价较高（１∶１６）的兔源抗ＩＢＤＶ独特型抗体分别与福氏完全和福氏不完全佐剂按１∶１比例乳化制备成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗。用该疫苗免疫迪卡公雏鸡和ＳＰＦ鸡，经用ＩＢＤＶ强毒株以点眼和滴鼻方式攻击，试验组的保护率分别为９８／９８，１００／１００，４９／４９，大群免疫接种的应答率为１００％。     

香菇多糖对vAMV感染雏鸡SOD活性的影响

３日龄肉用ＡＡ雏鸡人工感染禽成髓细胞性白血病强毒（ｖＡＭＶ）后，禽成髓细胞性白血病（ＡＭＢ）的发病率达８６．７％，病死率为７０．０％，与健康雏鸡相比，脾脏、胸腺、法氏囊、心脏、肝脏、肾脏及性腺的总超氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）和锰超氧化物歧化酶（Ｍｎ－ＳＯＤ）的活性于９日龄时明显升高（Ｐ＜０．０１），于１６日龄后则显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）而铜超氧化物歧化酶（Ｃｕ－ＳＯＤ）和锌超氧化物歧化酶（Ｚｎ－ＳＯＤ）的活性无显著变化（Ｐ＞０．０５）。ｖＡＭＶ感染雏鸡注射香菇多糖，ＡＭＢ发病率为６７．５％，病死率为５５．０％。同对照组相比，感染后注射香菇多糖组的Ｔ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ及Ｃｕ－ＳＯＤ的活性初期均显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），中、后期变化不显著（Ｐ＞０．０５）。     

禽霍乱双型原生质体融合株的筛选及其免疫原性研究

以抗链霉素、对卡那霉素敏感的禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９株（血清型为８Ａ）和抗卡那霉素、对链霉素敏感的Ｃ４８－１株（血清型为５Ａ）为亲本，在脱氧核糖核酸酶Ⅰ（ＤＮａｓｅⅠ）始终存在的条件下，以聚乙二醇（ＰＥＧ，分子量６０００）为助融剂，进行原生质体融合，然后在高渗琼脂平板上再生细胞壁，再转种于含卡那霉素和链霉素的双抗培养基上检出融合株。对筛选获得的２个融合株（简称为Ｆ２和Ｆ６）进一步研究表明，其在形态、染色特性、生化反应和毒力等方面均符合禽源多杀性巴氏杆菌的特性。通过血清型鉴定和双抗药性试验证明两亲本株菌细胞确已发生了原生质体融合和染色体重组，经反复继代培养证明融合株表型稳定。用Ｆ２制备的灭能苗免疫小白鼠，１４ｄ后攻毒，对两型标准强毒菌混合培养物１个ＭＬＤ保护率为１００％，１０个ＭＬＤ保护率为８０％。     

鸡新城疫Ⅰ系疫苗拌料口服免疫效果试验

设立鸡新城疫Ⅰ系疫苗不同剂量拌料口服和1 .0 头份/ 只肌肉注射组,于免疫后180 d 时2 .5 头份/ 只和3 .0头份/ 只口服免疫组的HI 抗体效价均在免疫保护临界域24.0 以上。免疫后210 d 从各组随机抽样,用新城疫病毒F48E8 强毒攻击,结果这两个组的保护率分别为40 % 和100 % 。