6种特殊生物检材的DNA提取

在许多案件中会遇到一些特殊生物检材，如鼻涕、经联苯胺染色的血痕、甲醇固定后经伊红美蓝染色的涂片、牙刷、汗斑及软骨等，如何充分挖掘这些特殊生物检材的证据作用，将对侦破工作和定罪量刑有重要意义。但是实际上，许多特殊生物检材在提取DNA时有一定困难，导致实验结果差。作者在实际检案中遇到了上述６种特殊生物检材时，用文献犤１犦建立的DNA提取方法，成功地提取了DNA并分型，报道如下。１案例简介案例１２００１年１月，河北省张某被头罩面罩的歹徒持刀入室抢劫杀害。送检检材为被害人张某血样、犯罪嫌疑人田某血样及罪犯弃…     

盗窃案件现场检材提取与DNA检测结果的统计分析

目的统计分析1574例盗窃案件中提取的2496个现场生物检材,为提高DNA在盗窃案件侦破中的应用成效提供参考。方法根据2496个生物检材的类型、现场提取方法、重点提取部位、DNA检测结果等进行统计和分析比较,总结常见类型盗窃案件现场生物检材的主要发现提取部位以及不同方法提取的现场生物检材DNA检出率。结果接触类检材已成为盗窃案件最多见的生物检材类型,但检出率仍然较低,对混合分型应进一步分析筛选以提高DNA的认定率;不同方法提取的现场生物检材在DNA检出率方面存在统计学差异,接触类生物检材以植绒拭子和原物提取的方式为首选;现场生物检材的主要发现提取部位根据盗窃案件的类型不同有所侧重。结论现场勘查人员在盗窃案件中发现和提取到有价值的生物检材是提高DNA检出认定能力的关键因素,应着力培养现场勘查人员的微量生物物证意识,提高现场勘查人员提取和处理微量生物检材的能力。     

陈旧骸骨DNA身份鉴定的法医学进展

骨骼和牙齿是重要的生物样本,由于结构特殊,抗降解能力强,是自然条件下保留DNA理想的生物检材。在历史人物鉴定案例中,陈旧的骨骼和牙齿样本常常是唯一的生物检材,但其DNA呈微量、毁损和不同程度降解状态,需要经过特殊的实验处理以实现身份鉴定。本文综合近年来相关研究报道,从采集检材、DNA提取、DNA富集、检测分析方案等方面进行综述,以期促进陈旧骨骼和牙齿检测体系的进一步发展和完善。     

磁珠直接吸附法对体态检材游离DNA的提取

目的采用磁珠直接吸附法对人体尿液、唾液、血液3种体态生物检材中的游离DNA进行提取检验,为法医物证中游离DNA的研究及检验工作提供参考。方法对3种生物检材采取离心吸取上清液的方法分离游离DNA,然后采用磁珠直接吸附法进行提取纯化,Identifiler-Plus试剂盒进行复合扩增后常规STR检测。结果在3种检材中均检出了游离DNA,其中血液中游离DNA检出率为100%,唾液为90%,尿液为70%。结论人体体态生物检材中存在游离DNA,同时磁珠直接吸附法可高效、快捷的提取生物检材中的游离DNA。     

改良EVO150-8方法在DNA自动化检案中的应用

目的探讨改良EVO150-8方法在批量生物检材DNA检验中的应用价值,建立一种自动化、简单、快速的DNA提取方法。方法采用改良EVO150-8自动化核酸提取纯化仪器与DNA IQ磁珠法纯化试剂盒,对各现场提取的880份血迹、烟蒂、口香糖、精斑（混合斑）、组织、骨骼、脱落细胞等常见生物检材进行DNA提取与纯化,采用Identifiler试剂盒进行扩增检验,用3130XL电泳,GeneMapper ID V3.2分析软件进行分析比对。结果在880份生物检材中,有836份检材成功获得STR分型;检验92份检材仅需时128min。结论改良EVO150-8适合批量生物检材的自动化提取。     

脱落上皮细胞类生物检材的自动化提取

目的建立一种自动化提取脱落上皮细胞类生物检材DNA的方法。方法附着于不同载体上的脱落上皮细胞类生物检材共278份,应用Eppendorf epMotion 5075LH工作站结合DNA IQTM系统提取模板DNA,并用Identifiler试剂盒进行STR检验。结果在278份被检的生物检材,其中126份检材获得13个基因座以上的STR分型,不同类型的检材其检出率不相同,最高达73.44%,最低为10.89%。结论脱落上皮细胞类检材应用自动化工作站提取DNA模板可在法医日常检案中广泛应用。     

骨骼脱钙后DNA含量损失问题初探

骨骼是一类特殊的生物检材,是一种致密的结缔组织,相对于人体其他的组织脏器腐败降解得更慢。对高度腐败及白骨化的尸体,骨骼是进行DNA检验的唯一检材,但由于骨骼的特殊组织结构及环境因素的影响,使骨骼DNA的提取较困难。因此,为使骨组织中DNA易于释放,在提取中往往采用单独EDTA脱钙的步骤,以去除羟基磷灰石中的钙元素[1-2]。     

应用自动化工作站批量提取生物检材DNA

在刑事侦查的法医学实践中,生物检材种类繁多,并以较快的速度增长,以往手工操作分别提取各种检材DNA的方法已不能适应当前工作的需要。建立自动化工作站高通量提取各种生物检材DNA是可能的解决途径之一。     

微量检材DNA提取方法

法医DNA鉴定中常见的微量检材,是指含有微量核DNA的降解检材(例如陈旧骨骼等)和附着载体上生物组织量少的检材。为了获得“大量”的检材DNA就必须增加检材用量,扩大反应体系。应用大反应体系提取微量检材DNA时,常出现提取溶液DNA含量过低,而不能获得DNA沉淀。如果不采用有效的方法,就会由于提取操作不当而引起DNA损失,导致PCR反应失败,直接影响案件的侦破和法庭证据的科学性。本文应用正丁醇浓缩法成功地解决了微量检材DNA的提取问题,在实际的案件鉴定中取得了满意的结果。1材料与方法1.1微量检材所用微量检材均来自案件鉴定所用…     

用于DNA提取的磁性纳米技术

众所周知,DNA提取技术是法医DNA检验的第一个步骤,也是最关键的步骤.可以说,能否成功进行DNA检验的前提就是能否从生物检材中获得高质量DNA.尤其对于腐败、变质、污染等各种条件下的现场生物检材,DNA的提取质量将直接关系到DNA检验的成败.就我国DNA提取技术发展现状来讲,主要存在以下两个问题:一是技术发展滞后.现在采用的DNA提取技术仍然停留在Chelex100法、有机提取法、硅珠法等常规方法,存在着提取DNA不纯,效率低、耗时,不能自动化,不能定量,扩增成功率较低等诸多缺点,因此直接影响DNA检验的整体流程和效能的发挥.     

检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的 研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法 使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果 生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论 生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。     

国产磁珠结合自动化工作站批量提取生物检材DNA的应用

目的建立国产磁珠结合自动化工作站批量提取案件中生物检材DNA的方法。方法采用国产磁珠结合Bio-Robert Universal System自动化工作站对案件中常见的生物样本进行DNA提取,检测Identifiler系统16个STR基因座,在ABI3130XL遗传分析仪上进行STR分型。其中210份样品同时在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量。结果9100份10类生物检材应用国产磁珠结合自动化工作站,大部分可提取到足够的DNA进行STR检验。STR检验成功率最高的为口腔拭子、肌肉,达100%,接触细胞检材的成功率较低,为50.0%。结论国产磁珠结合自动化工作站可用于案件中常见的大部分生物样本的DNA提取。     

现场大量生物检材的自动化提取应用

正随着司法诉讼进程对证据质量要求的不断提高,重特大案件的现场重建直接导致生物检材的送检量大幅度提升,时效要求也越来越高。而现场送检的生物检材种类繁多,以往应用Chelex-100法手工操作耗时长、易污染,手工磁珠法无法批量进行,传统方式已无法适应形势的要求~([1]),寻求高通量的生物检材DNA自动化提取应用已迫在眉睫。本研究通过采用Auto Lys STAR自动化工作站结合微量检材DNA提取试剂盒建立生物检材DNA自动化检验体系,以实     

接触性DNA及其现场发现

接触性DNA类检材在案件侦破和法庭证据中的作用越来越重要.本文指出对现场的接触性DNA的发现.提取策略,附着于不同载体上DNA的提取方法以及生物物证污染防控体系建立的探索将有助于此类检材的利用.     

衣物类生物检材DNA检验的研究

目的建立对衣物类生物检材STR检验的有效自动提取纯化方法。方法对100例衣物类生物检材用EZ1DNA Investigator试剂盒、EZ1Advanced XL工作站的Large-Volume程序(大体积法)进行提取纯化,AmpFLSTR~Identifiler~Plus荧光STR复合扩增,3500x L型遗传分析仪分析结果。结果 69份检材中检出了单一DNA分型结果,9份检出了混合基因型,22份未检出基因型。结论该方法对衣物类生物检材DNA提取纯化后进行荧光STR检测,可应用于法庭科学实践。     

微量生物检材提取2例

微量生物检材的提取是DNA检验技术中经常碰到而又较难处理的问题。作者通过对在实际检案中遇到的两种特殊生物检材上微量DNA的提取,成功进行DNA分型,报道如下。1案例案例1:某日,我市一女子被杀,现场提取到有价值的物证仅为6个果冻壳。通过擦拭果冻壳“撕口处”脱落细胞,采用推柱去载体,离心浓缩细胞,Chelex-100法提取,均成功检见包括Amel在内的10个位点。结果显示有4个与死者血的DNA分型一致,另两个为同一男性的DNA,经过调查确认为犯罪嫌疑人所留。案例2:某日,某盗窃案现场提取到犯罪嫌疑人喝过的“娃哈哈鲜橙汁”饮料瓶1只。通过擦…     

联合应用Y-STR和ABO基因分型检验技术侦破命案2例

1 案例 案例1 某日,李某(女,53岁)被杀死在家中,下身赤裸,头部有钝器伤.提取死者阴道擦拭物等生物检材送检. 案例2 某日晚,邢某(女,48岁)被杀死在家中.技术人员勘查现场后提取现场血迹等生物检材送检DNA.     

批量提取微量DNA在案件检验鉴定中的应用3例

随着DNA检验灵敏度的提高,越来越多的案件需进行微量生物检材DNA的检验,本实验室应用96孔板批量提取微量生物检材DNA,大大提高了检案效率,在案件中发挥了重要作用。现介绍如下：1方法1.1 DNA提取取细轴棉棒用TES浸湿棉棒上棉签后擦拭送检物品（如绳索、胶带、打火机、螺丝刀等）上可能有脱落上皮细胞的部位,     

法医物证DNA自动化检验技术体系的研究

目的建立自动化工作站同步提取不同种类涉案法医生物检材DNA的新方法。方法选用TECAN Freedom EVO100．4、75—2型自动化提取、加样工作站,采用磁珠法及Chelex-100法对各类涉案生物检材进行DNA提取、PCR扩增、毛细管电泳检测其STR分型,进行比较测试。在“全国公安机关DNA数据库应用系统”中建立并应用实验室信息管理系统（LIMS）模拟实施规范化DNA检案。结果1552份各类检材,采用工作站-磁珠法提取DNA效果最佳,STR检测成功率为95％,工作站-Chelex法为88％;二者分别与其手工提取法比较,成功率无明显差异。92个样本同期检测,自动化工作站较手工操作DNA检案时间可缩减1．25倍。结论工作站域珠法提取涉案检材DNA,可获得满意的STR分型结果。应用LIMS管控,可有效防控污染,明显提高检案效率及鉴定质量。     

硅珠法提取生物检材DNA的影响因素

正在酚-氯仿有机法、Chelex-100法、磁珠法及硅珠法几种DNA提取方法中,硅珠法在脱落细胞等微量生物检材以及骨骼、牙齿等疑难生物检材中的成功应用得到了很多学者的认可[1-3]。随着硅珠法的不断推广应用,有学者对传统的硅珠法进行了改良以提高其提取模板DNA的灵敏度[4],也有人通过实验证实加大检材量能够提高硅珠法在脱落细胞DNA中的提取浓度[5]。本研究系统地比较了硅珠量、硅珠悬浮时间以及