大熊猫输血的前瞻性研究

我们继对大熊猫红细胞表面抗原的研究(廉维等,1987)之后,用小黑熊作为大熊猫输血的前瞻性研究实验模型,进行了接受绵羊血的输血试验。 (一)试验动物 受血动物:小黑熊,2岁,雄,体重25kg。自捕进动物园3个月以来一直有全身震颤、食欲不佳、精神萎靡等表现,但未确诊。供血动物;绵羊2只。 (二)试验项目和结果 1.小黑熊及绵羊的红细胞抗原测定:将小黑熊红细胞、1号绵羊红细胞和2号绵羊红细胞经温盐水洗涤后配成5％悬液,与人类ABO系统、Rh系统、MN系统反应。结果小黑熊及绵羊红细胞均与ABO系统抗血清强凝集;当与Rh系统抗D血清反应时,小黑熊红细胞凝集而绵羊红细胞不凝集;     

牛的血型

牛血型的分类研究在动物中是最详细的。用免疫学方法,可将血液的有形成分分为红细胞抗原型、白细胞抗原型、血小板抗原型和同种异型。所谓同种异型是血清成分抗原变异型的总称。用电泳方法,可将血液蛋白质(包括酶)和乳蛋白质分为血液蛋白型(红细胞蛋白型和血清蛋白型)和乳蛋白型。此外,还可以按照牛血球对家兔抗牛红血球血清的凝集性分为高低两型。这里我们主要介绍作为遗传标记因子意义较大的红细胞抗原型和血液蛋白型。     

马的血型

人类血型的研究开始于1901年,当时正在维也那从事研究工作的Karl、Lansteiner为了诊断肺炎病人,把血液分成红血球和血清,观察其反应,发现有被某一血清凝集的红血球和不被其凝集的红血球,而且有个体间的差异。从此开始了对人血型的研究。第二年开始研究马的血型。以后陆续发表了对其它家畜血型的研究报告。因此,家畜血型的研究已有很长的历史。但是,在1954年以前国际上还没有一个统一的家畜血型学术组织。1954年欧洲一些     

猪传染性胃肠炎病毒的血凝作用

将猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）Ａ株在ＩＢＲＳ２细胞上增殖，培养物经差速离心浓缩后与鸡红细胞出现了高凝集价（２８），这种凝集作用能被兔抗ＴＧＥＶ高免血清所抑制。试验的最适反应条件为体积分数０．５０％红细胞４℃作用１ｈ。通过反复试验，建立了一种简单实用的血凝抗原制备方法，病毒培养液不需浓缩可直接应用。     

以间接血凝试验诊断旋毛虫病

作者从1980年起,对旋毛虫病免疫诊断方法进行了研究,用纯化抗原制备抗原致敏绵羊醛化红细胞,进行间接血凝试验,诊断旋毛虫病,阳性检出率可达97.47％以上,凝集滴度最高可达1:512或1:1024,交叉反应极少,反应快,1小时内即可得出结果。     

贵州省鸡减蛋综合征病毒分离株的生物学特性鉴定

从贵州省出现产蛋下降等症状的鸡群中分离出１株病毒，命名为ＨＳ１。该病毒对鸭胚致死率达５５６％～６６７％；在尿囊液中产生高效价的红细胞凝集素，第７代鸭胚尿囊液的血凝效价达到２１５～１８；在ＤＥＦ单层细胞上生长良好，并引起明显的细胞病变，感染细胞的核内观察到嗜碱性包涵体；将分离毒株回归蛋用鸡复制出与自然病例相类似的临床症状，全部感染鸡都产生ＥＤＳ血清抗体；病毒呈球形粒子，直径７０～８０ｎｍ，无囊膜，对氯仿、乙醚不敏感；能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，不凝集哺乳动物的红细胞；病毒核酸类型是ＤＮＡ，不分节段，分子含有３３６ｋｂ。在交叉血细胞凝集抑制试验中，分离毒株对红细胞的凝集特性能够被ＡＶ１２７超免疫血清所抑制，而不与新城疫阳性血清、正常健康鸡血清发生交叉反应；在病毒中和试验中，ＨＳ１与ＡＶ１２７毒株能够发生交叉中和反应，显示它们具有相同的抗原关系。根据对病毒分离株的致病性、血凝谱、理化特性和血清学关系的鉴定，证明从贵州分离的ＨＳ１与国际标准毒ＡＶ１２７属于同一血清型，是１株ＥＤＳ病毒。     

溶菌酶释放蛋白介导猪链球菌2型的血凝活性

比较了猪链球菌 2型 (SS2 )MRP+ 菌株HA980 1和MRP-菌株 0 0 64 44的血凝特性及溶菌酶释放蛋白 (MRP)在血凝过程中的作用。 2株菌均能凝集人A、B、O型及猪、兔、BALB/c小鼠、豚鼠、绵羊、山羊、水牛的红细胞 ,不凝集鸡、鲫鱼、鲤鱼、金鱼的红细胞 ,且对人、猪、兔、BALB/c小鼠、豚鼠红细胞的凝集价极显著高于绵羊、山羊和水牛 (P <0 .0 1) ;MRP+ 菌株对人、猪、兔、BALB/c小鼠和豚鼠红细胞的凝集价均极显著高于MRP-株 (P <0 .0 1)。MRP+ 株的血凝活性对热处理极其敏感 ,且凝集速度和反应温度呈负相关。半乳糖、胰酶预处理MRP+ 株菌体能完全阻断其血凝 ,葡萄糖、甘露糖、乳糖、蔗糖、过氧化氢、巯基乙醇对其则无明显影响。用纯化的MRP处理红细胞、抗MRP兔血清和MRP的单克隆抗体处理菌体 ,均能显著降低MRP+ 菌株的凝集价 (P <0 .0 5 ) ,但不能完全抑制 ;用抗MRP-菌株兔血清处理菌体 ,也能显著降低MRP+ 株凝集价。试验证明 :MRP是SS2的黏附素 ,具有半乳糖特异性受体 ,且和其他毒力因子之间存在协同作用     

口蹄疫病毒抗原与红细胞化学联结的方法及其应用

病毒或病毒蛋白抗原以及免疫球蛋白抗体与红细胞通过化学联结剂结合形成复合物,作为免疫反应的指示系统,在免疫测定中已经得到广泛应用。病毒抗原-红细胞复合物已经用于凝胶溶血试验(Charan等,1981;Jochim和Jones,1981)、被动血凝(Ikram和Prince,1981)及被动血凝抑制试验(Tokuda和Warrington,1970)检测病毒抗体,Johnson(1974)、Kim(1975)和Mclaren(1978)等用溶血斑试验(Hemolytic plaque assay)检测了淋巴细胞产生的抗体。将免疫球蛋白抗体与红细胞偶联可用于检测相应的抗原。H.A.等(1972,1973)用反向被动血凝反应鉴定了口蹄疫病毒型和亚型。M.M.Rweyemanu等(1980)用单辐射溶血技术(Single Radial Hemolysis Technique)检测了口蹄疫病毒的抗体和抗原。     

抗弓形虫单克隆抗体试剂的研究——分泌抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本研究选用了弓形虫QHO株活虫抗原免疫BALB/C小鼠,摘取脾细胞与SP_2/O骨髓瘤细胞融合,获得了分泌抗弓形虫McAb杂交瘤细胞株(2A_(11),3C_2)。其细胞分泌抗体效价为1:64(IHA),诱生腹水效价为1:1024和1:16384,经3个月连续培养和2次液氮冻存复苏培养,细胞生长良好,持续稳定分泌抗体效价不变,用诱生腹水经(NH_4)_2SO_4盐析、DEAE-Sephadex-A50层析和PEG浓缩,所得McAb致敏5％鞣酸化绵羊红细胞,与弓形虫可溶性抗原显示良好凝集效果,证明McAb与弓形虫可溶性抗原反应特异、敏感,并在血凝诊断试剂上具有应用价值。     

仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗制苗株的生物学特性

对仔猪大肠杆菌病K88 ( 为黏附素阳性)、K99 、987P 、F41 制苗株的血凝性、传代稳定性等生物学特性进行了研究。结果表明,K88 株不能凝集绵羊红细胞,但能凝集鸡、猪、豚鼠、兔红细胞,以鸡红细胞凝集价最高;K99 株不能凝集兔红细胞,但能凝集鸡、猪、豚鼠、绵羊红细胞,以绵羊红细胞凝集价最高;F41 株对这5种红细胞均能凝集,以绵羊红细胞凝集价最高;而987P 株对这5种红细胞均不能凝集。传代结果表明,K88 株使用限定代次可达22代,K99 、987P 、F41 至少可达42代。     

大熊猫轮状病毒CH-1株VP1基因的克隆和生物信息学分析

为研究大熊猫源轮状病毒(RV)CH-1株外衣壳蛋白VP1基因的结构及功能,采用MA-104细胞增殖大熊猫源RV,提取总RNA,运用RT-PCR扩增VP1基因,将阳性克隆进行测序,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示,成功获得了长3 287bp的GPRV VP1蛋白基因(GenBank登录号:HQ641297);经生物信息学分析,此序列包含有一个3 267bp的完整开放阅读框,编码1 089个氨基酸;无信号肽;无跨膜区,其整个蛋白都位于病毒膜外区;抗原表位预测显示VP1蛋白有41个抗原表位;系统进化树分析显示大熊猫轮状病毒CH-1株VP1基因与猪A组轮状病毒VP1基因的进化距离最近。本研究成功获得了大熊猫源RV VP1基因,为今后研究此基因的生物学功能奠定了基础。     

大熊猫的血型及输血

大熊猫是产于我国的珍贵动物,因数量极少,为大熊猫输血极为罕见。本文报告了2只大熊猫的血型检查结果,两者之间的配血结果及大熊猫与人、狗、(鹿占)鹿、梅花鹿的配血结果,为以后大熊猫的输血提供参考。 (一)病例报告 大熊猫安安,2岁,雌性,体重30kg。2年前从四川阿坝地区拣来,人工喂养长大,一向体弱多病。几日前腹泻,食欲明显减退。近2日病情加重,大便呈血水样,卷卧少动,心率加快,135次/分,心音弱。用多种止血药及抗生素并输注人白蛋白2瓶,新鲜冰冻人血浆1瓶,便血仍不止,病情继续恶化,血色素降至3g,紧急要求输血抢救。立即采集另一只大熊猫东东的血样,与安安配血,基本相合,当日输     

鸡新城疫快递诊断抗原制备方法

(一)原理 鸡新城疫快速诊断抗原是根据Zergar(1949)等的方法加以改进而研制成功的,其原理是加大抗原中病毒含量,使血球凝集加快。当抗原病毒含量固定,血清抗体可延缓血球凝集时间,随着抗体含量增加而延长;当抗体含量固定,则血球凝集时间与病毒含量之间成反比。因此,把抗原病毒含量固定到一定的数量上,就可用来测定血清中抗体含量。 二)种毒选择 快速诊断抗原要求病毒含量达到6～8秒可使血球发生凝集的强度,即2个平板凝集单位,相当试管法1280倍。因此,目前只能用Ⅱ系和Ⅳ系鸡新城疫病毒来制备抗原。     

大熊猫细胞免疫功能的测定

为了探讨大熊猫免疫功能与疾病变化的关系,我们根据免疫学原理,经过探索,初步建立了大熊猫细胞免疫测定方法。(一)材料与方法1.标本来源:大熊猫8例,均系成都市动物园喂养。其中体检正常6例,病危抢救2例(肠梗阻、肿瘤各1例),体重50～65kg;最大8岁,最小3岁。2.试剂:1640培养液(日本产),小牛血清,青霉素,链霉素,谷氨酰胺,植物血凝素(PHA),淋巴细胞分离液及绵羊红细胞等。3.测定指标及方法:     

大熊猫红细胞酶型的测定

红细胞酶型的检测对生物的组织、器官移植,遗传学研究等有重要作用。检测大熊猫的红细胞酶型,可从遗传学上了解熊猫群体的类型及不同个体之间可遗传的差异。我院根据作为遗传标记同工酶的选择标准,分析了4头健康大熊猫的红细胞酶型,现报告如下。     

用等量生理盐水替代抗原测定补体效价

用等量生理盐水替代抗原测定补体效价刘厚渊，孙建华（新疆巴音郭楞州畜牧中心库尔勒８４１０００）补体通常只能和抗原一抗体复合物结合，而不能与抗原或抗体单独结合，微生物抗原与抗体结合后激活补体并与之吸附是一种不可见的反应。绵羊红细胞和它的相应抗体（溶血素）...     

大熊猫轮状病毒CH-1株NSP4基因的克隆与生物信息学分析

用MA-104细胞增殖大熊猫轮状病毒(RV),并提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得NSP4基因,将其克隆到载体进行测序,应用生物信息学方法初步分析NSP4基因的结构及功能,并与不同动物的RV构建系统进化树。结果显示,获得了长750bp的大熊猫RVNSP4基因,此序列包含1个528bp的完整开放阅读框,编码175个氨基酸;预测大熊猫RVNSP4基因的理论分子质量为20223.7u,等电点为6.84,半衰期为30h,不稳定系数为30.40,总平均亲水性为-0.240,疏水性为-2.400～2.622;无信号肽序列;跨膜结构分析表明,NSP4有1个跨膜区,其N端位于病毒膜外区,C端位于病毒膜内区;抗原表位预测显示,NSP4有6个抗原决定簇;结构预测显示,其可能包含2个N-糖基化作用位点、6个蛋白激酶C磷酸化作用位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点和1个酪氨酸激酶磷酸化作用位点;系统进化树分析显示,大熊猫RV NSP4基因与猪RV NSP4基因的进化距离最近。     

鸡血型系统对红细胞免疫功能的影响

采用狼山鸡、海兰W-36鸡、AA肉用种鸡、南京当地鸡研究了各血型系统因子对鸡红细胞免疫功能的影响.结果表明,狼山鸡、南京当地鸡的CR1花环率显著高于海兰W-36、AA肉用种鸡,但红细胞免疫物花环率在各品种与血型因子相关性无显著差异(P＞0.05);带有B2、B21、B365、B614因子的鸡,其红细胞CR1花环率高于带D15、A653、B13因子的鸡,但在各品种鸡中有很大差异;本文还分析了红细胞免疫功能与遗传抗性的关系,提示鸡的红细胞免疫功能CR1花环率与鸡的抗马立克氏病(MD)特性呈一定的正相关.     

不同家禽红细胞悬液对禽流感血清抗体检测的影响

为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,但因处理复杂,费用高,不宜推广应用;经鸡红细胞吸附处理,可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用,但处理费时;而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体,可以有效去除血清非特异性凝集的影响,且更能准确地反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而,应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。     

免疫酶斑点法快速检测小鹅瘟病毒

至今,有关小鹅瘟病毒(GPV)的快速诊断尚未找到一种较为理想的方法,Malkinson(1974)和Peleg(1974)发现牛精子能被GPV所凝集,但为非特异反应,难以说明问题;Dosz-kow,K.I.等(1982)用酶组化法技术测定细胞培养和小鹅组织中的抗原;Bondarerke(1982)用免疫扩散技术测定鹅胚绒毛尿囊液中的抗原,然而,前者所用的抗体是常规血清,非特异性反应较强,后者需高效价血清及多倍浓缩的尿囊液,且灵敏度不高,这些方法在实际应用上均有一定的困难。1981年徐为燕等和1989年孙怀昌等用反向间接血凝技术检测鹅胚尿囊液及组织中的GPV,效果虽