用浓缩唾液制备抗A、抗B血清的吸收精制方法

<正> 用浓缩1/2容量的ASe和BSe人唾液,采用多用途、多部位,并逐渐增大剂量的方法免疫大耳白兔,每4次为一个免疫程,可制备出1024倍以上的抗A、抗B血清.但所得抗血清除有抗A、抗B凝集素外,还含有大量与各型红细胞发生凝集的非特异性凝集素.经反复试验,先用人血粉吸收,然后用少量唾液吸收,可以除去非特异性凝集素,制备出特异性好的抗A、抗B血清,具体方法如下.     

检验A、B、H血型物质指示红细胞的研制

采用单克隆抗Ａ、抗Ｂ、抗Ｈ抗体致敏人Ｏ型红细胞 ,所获得的检验人体液 (斑 )的Ａ、Ｂ、Ｈ指示红细胞 ,为检验人体液斑迹的ＡＢＯ血型提供了一种新的试剂。在制备过程中 ,抗体载体的选定、致敏所需抗体的浓度和致敏环境的酸碱度都直接影响指示红细胞的凝集效价。经过反复实验探索 ,选择出了理想的条件。1　材料与方法1 1　人Ｏ型红细胞的醛化取多人份混合的人Ｏ型红细胞 ,用生理盐水充分洗涤后 ,将压积红细胞用 4℃预冷 ,含 0 5%戊二醛的ＰＢＳ缓冲液稀释成 10 %的悬液 ,作用 30ｍｉｎ后 ,2 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 2 0ｍｉｎ ,弃上清液 ;将压…     

免疫抗A、抗B、抗H沉淀素血清的制备

本文介绍了用浓缩的分泌型人唾液免疫鸡,经吸收精制获得鸡抗A、抗B、抗H沉淀素血清的方法。用本法制备的抗血清,对相应血型人唾液的特异性沉淀价可达1:512倍以上,对非相应血型者的分泌液不出现非特异性沉淀反应。应用该血清进行环状沉淀试验、单向琼脂扩散试验等免疫学试验,可简便、准确地鉴定人唾液斑、精液斑等分泌液斑的ABO血型。     

单克隆抗A、抗B抗体的简易提纯和标酶

本文运用辛酸提取法,对小鼠腹水中的单克隆抗 A、抗 B 抗体进行纯化,并用辣根过氧化物酶(HRP)加以标记,获得纯度好,抗体活性强,酶标克分子比值符合要求的酶环单克隆抗 A、抗 B抗体。     

用单克隆抗体进行混合斑ABO血型的研究

本文用TNE缓冲液浸泡提取混合斑中的精子和阴道上皮细胞,用高效价单克隆抗A、抗B血清进行吸附,加入含2.5％鸡白蛋白的红细胞指示悬液进行红细胞粘连试验。结果,精子和阴道上皮细胞能与相应的红细胞粘连,可同时判定混合斑中精子和阴道上皮细胞的血型。     

单克隆抗M、抗N抗体的研制及初步应用

用人血型糖蛋白 A 和人红细胞分别免疫 BALB/C 小鼠。用被免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞融合,在37℃、5%二氧化碳培养箱中孵育10～15天,然后用 OM 和 ON 型指示红细胞分别检测培养上清液的凝集情况,筛选出能分泌高特异性和高效价抗 M 和抗 N 抗体的细胞株,并建立了 GM_4H3、GM_4H_4、N_2A_3和 N_2D_(10)细胞株。这些细胞株可持续分泌免疫球蛋白 G 类抗 M、抗 N 抗体。应用这些抗体,通过血凝法、解离法和 ELISA 斑点法,可进行血及血痕的 MN 分型。在血型检验中,优于多克隆抗 M、抗N 血清。     

人类A、B抗原单克隆抗体的研制和初步应用

作者用人类A、B型红细胞及A、B型分泌型唾液免疫8周龄的BALB/C小鼠,用经免疫的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,用血凝法筛选出分泌抗A抗体和抗B抗体的细胞株各3株。经一年多的传代,仍然能稳定地分泌抗A、抗B抗体,抗体特异性专一,培养上清液效价能达到2048倍,并初步应用于血液及体液(斑)的检验。     

抗Le~a和抗Le~b血清的研制

利用进口抗Le~a、Le~b血清筛选OLe(a+b-)和OLe(a-b+)型人,测定其唾液中Le~a和Le~b型物质含量,择其型物质含量高者唾液,用家兔和山羊免疫,合格后采全血,分离血清,用O、A、B型红细胞吸收、除去种属及α和β等凝集素。再用O型Le非相应型红细胞吸收,精制出含不完全抗体的抗Le~a和抗Le~b血清。该血清对Le相应型红细胞均产生明显凝集反应,而不发生非特异的交叉凝集反应。经过盲测鉴定,17份红细胞的Lewis型测定完全准确。制备的抗Le~a和抗Le~b血清在效价和特异性方面达到了引进的同种血清水平,填补了我国抗Le~a、抗Le~b血清制造的空白。     

单克隆抗M、抗N抗体的制备和应用

<正> 把用生理盐水洗涤5次的新鲜人ON型红细胞和纯化的血型糖蛋白A分别免疫BALB/C小鼠,用免疫的脾细胞同SPZ/O骨髓瘤细胞进行融合。37℃培养10～15天后,用ON型和OM型红细胞检测每个培养孔里培养基上清的凝集情况,建立了分泌高特异性和高效价的抗M和     

抗人N单克隆抗体的制备及其特性的研究

用ON型人红细胞免疫BALB/c小鼠脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得分泌IgM类抗人N单克隆抗体杂交瘤细胞株(ON_1D_3)。其培养上清液抗体效价为128～256,诱生小鼠腹水的抗体效价为8192;与Panel A红细胞反应呈抗N特异性;检测273名成人红细胞,只特异性凝集N(?)MN型人红细胞,不凝集M型红细胞。与猴等9种动物红细胞无交叉反应;酶修饰试验结果表明,ON_1D_3识别的抗原决定簇是唾液酸依赖性的。     

抗H单克隆抗体与抗H血清在法医检验应用中的比较

<正> 作者用抗H单克隆抗体和抗H多克隆血清与红细胞H抗原的亲合力和不同检材抗原的检出效果进行了比较,现将结果报告如下.1.亲合力的测定比较分别取HMcAb和抗HPcAb各一滴置于载玻片上与等量的10%O型红细胞生理盐水悬浮液混合,室温下肉眼观察红细胞开始凝集的时间和凝集成1mm凝集块的时间.(表1).     

抗人A型红细胞单克隆抗体的研制及初步应用

本研究在用人A型红细胞悬液免疫BaIb/C小鼠脾细胞与同系小鼠的骨髓瘤细胞融合屡次失败的情况下,改用实体瘤分离出的骨髓瘤细胞进行融合,终获成功。融合后筛选出分泌盐水凝集抗体的杂交瘤细胞株:3B_2、2H_2、8C_3细胞株。这些杂交瘤细胞可持续分泌抗A单克隆IgM类抗体。     

特异性抗人白蛋白血清制备

用乙基乙酰胺修饰的人血清白蛋白吸收免抗人白蛋白血清,可制威特异性极高的抗人白蛋白血清。用该血清和三氯化铬、人血清白蛋白包被的O型红细胞作指示细胞,做凝集抑制试验,能区别人血(斑)和包括灵长类在内的各种动物血(斑)。     

乙醚洗脱法制备高效价抗A、抗B血清

ABO 血型检验中通常采用效价在1:128～1:256的标准血清与检材中的抗原物质吸附。以此用“吸收法”、“热解离法”检验血型。但遇到抗原物质较弱的检材(如毛发、非分泌型的分泌物)时则需用高效价血清来检验。笔者采用 Rubin 乙醚洗脱法获得了高效价血清。1 材料与方法1.1 红细胞膜碎片的制备取已知 A、B 型的多份健康人全血,用生理盐水洗3次。将 A、B 型红细胞分别置于塑料试管     

动物血及腐败细菌对人血ABO型检验的干扰

在侦破凶杀、伤害、抢劫等案件的有关血痕ABO型检验中，常遇到动物血或腐败细菌污染检材的情况。由于动物血中的AB型物质或细菌中类人血型物质的干扰，影响了人血痕ABO分型检验的准确性。笔者经过大量的实验，证明了利用单克隆抗体代替多克隆抗体进行ABO血型检验，可以有效地防止上述干扰，使检验结果准确可靠。现报道如下。材料与方法1．抗体（1）人执地执B血清，效价128倍。（2）单克隆抗A、抗B血清，效价128倍。2·样品制备（1败集马、驴、骡、牛、猪、狗、山羊、兔、鸡、鸭、鹅、鼠、鳝鱼、草鱼、鲤鱼、罗非鱼等16种动物血，制成…     

单克隆抗体ABC法检测人类精子ABO血型

本文采用单克隆抗A、抗B、抗H抗体结合高灵敏度的酶免疫组化ABC法,对50例精液的精子进行了ABO血型检验,均正确做出鉴定。该方法可用于微量物证的法医学检验,具有简便、高灵敏等特点,适合推广利用,具有一定的实用价值。     

分泌抗人类血型-H抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株建立及初步应用

应用杂交瘤技术,建立了两株分泌抗 H 的单克隆抗体细胞株 H_(2-6)H_8和 B_(2-5)D_9。经体外培养半年以上,生物学性状稳定。两株细胞分泌的抗体属 IgM 类,特异性识别 H 型物质,与几种常见动物的红细胞无交叉反应。培养上清液和腹水的抗体效价最高分别达1024倍和1.28×10~5倍,可用在中和试验、免疫斑点法中,在实际办案中应用理想。     

成人肾脏ABO组织血型1-4型糖链H物质的分布

目的观察1型H、2型H及3/4型H糖链在成人肾组织中的分布及其与分泌状态的关系。方法 应用抗ABO抗体及3种糖链特异的单克隆抗H抗体的免疫组织化学方法,检查分泌型与非分泌型个体肾组织中相应抗原物质的分布。结果 在分泌型和非分泌型人的肾远曲小管均表达2型H和3/4型H物质,1型H和3/4型H物质只在分泌型人肾集合管表达,在非分泌型人中不表达。另外集合管的2型H物质的表达与分泌状态无关。结论 人肾组织有ABH物质的表达,不同肾组织细胞表达的H物质结构差异与AB0型分泌状态有关。     

人类分泌状态的研究及进展

ABO血型系统属人类的重要遗传标记之一。ABO抗原不仅存在于红细胞膜，也广泛存在于人体的体液和分泌液中。在体液及分泌液中分泌ABH血型物质的人称作分泌型（Seers－tors，See）。A型人分泌A物质，B型人分泌B物质，O型人分泌H物质。所有分泌型人都有H物质的分泌；不分泌ABH血型物质的人称作非分泌型（nonsecretors，uSe）[1]。分泌ABH血型物质，首先是在检测人精液和唾液时被证实[2]。后来的研究结果表明：在人类分泌型个体的消化道（唾液、胃粘膜、胆汁、胎粪）、泌尿生殖道（精液、阴道分泌物、卵巢囊肿液、尿）、呼吸道及乳汁…     

一例疑难精斑的检验

笔者受理了一起李控告魏将其强奸案，魏拒不承认。李将擦拭阴部的一块旧衣片送检。旧衣片上检有精子，每视野可见2～3个不完整的精子，偶见少量的扁平上皮细胞。用凝集反应确定李血型为B型；李的丈夫张的血型为O型；魏的血型为B型。用中和试验确定李的丈夫唾液为非分泌型；李与魏的唾液均为B分泌型。取该衣片精斑处与无精斑处检材浸泡，用16倍效价的抗A、抗B、抗H血清做吸收抑制凝集检验，空白检材与精斑检材均出现抗B血清抑制。由于李、魏、张三人的血型物质均可混于其中，而检材空白又出现B型，考虑旧衣片有李的B型物质干扰。李的B型…