用α-珠蛋白-3′HVR探针研究DNA纹印

<正> 用α-珠蛋白-3′HVR探针,经Southern印迹法,对100名不相关个体及4个家系的32名相关个体的DNA进行了检测,所产生的DNA纹印具有高度的多态性,在132名个体中无一相同。家系分析表明,DNA片断严格按照孟德尔方式遗传。该探针的应用,将在法医亲子     

DNA纹印的初步研究——用pYNH24探针作个体识别和家系分析

<正> 应用pYNH24特异性DNA探针,分析了人体基因组DNA MspI酶的RFLPs,获得清晰易读的图谱。190名不相关个体中,多态性为95％;8个家系45名相关个体中,等位基因的遗传     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

JL-02多位点探针DNA指纹的法医学应用研究

以自制的JL－02探针进行了DNA指纹分析，对北京地区无关个体进行了调查，计算出任意两无关个体的偶合机率为6．6×10－15；家系分析表明，谱带在亲代与子代间的传递符合孟德尔遗传规律；同一个体不同组织的DNA指纹图相同；混合斑精子DNA指纹图与相应男性血液DNA指纹图完全相同；该探针对0．5μg的基因组DNA杂交，可获得清晰可辩的DNA指纹图。证明了新探针适用于法医物证检验中的个人同一认定及亲子鉴定。     

DNA技术在法医学上的应用(续)

<正> 四、DNA指纹用于个体识别因DNA具有高度多态性,因此不同个体DNA指纹图各不相同,可以进行个体识别。下面以Jeffreys的33.15DNA探针做DNA指纹图为例,说明DNA指纹图的个体识别作用。取20名随机个体DNA,以HinfI消化,Southern印迹后与33.15探针杂交,得每个人DNA指纹图。然后做相邻两个体指纹图比较,将20个个体图中区带数全部算出,取平均值、并计算标准差。然后根据相邻个体共存区带数,求出等位基     

33.15及33.6探针对中国人DNA指纹图的研究

目的统计用33．15及33．6探针对中国人进行DNA指纹图检验的群体调查资料，为实际案件的检验提供理论依据。方法应用33．15及33．6探针为中国北京地区无关群体的血液进行DNA指纹图分析。结果应用33．15探针检验15人的DNA指纹图，无关个体间相关机率为1．03×10-15，两无关个体间出现同一谱带的平均概率0．176；应用33．6探针检验19人的DNA指纹图，无关个体间相关机率为1．53×11-11，两无关个体间出现同一港带的平均概率为0．187；两探针均符合孟德尔遗传规律，均具有组织同一性。结论本研究结果可应用于法医物证检验的亲子鉴定及个体识别。     

应用Ion Torrent PGM^TM平台进行人mtDNA全基因组测序

目的应用Ion Torrent PGM^TM平台对人线粒体基因组全序列进行分析检测。方法采集39名辽宁汉族无关个体以及4个母系家系的14名相关个体样本,应用SequalPrep^TM Long PCR试剂盒进行扩增,应用Ion Shear^TM Plus Reagents试剂盒和Ion Plus Fragment Library试剂盒等构建文库,并在Ion Torrent PGM平台上进行线粒体基因组全序列测序。结果在39名无关个体共观察到39种单倍型,在396个位置观察到了397种碱基变异。无关个体中出现的变异位点数目为25~53个,平均每个个体出现36.2个碱基变异。4个母系家系中每个家系成员间具有完全相同的mtDNA单倍型,严格遵守母系遗传。结论采用本研究建立的人线粒体基因组全序列的测序检验法,可显著提高mtDNA的个体识别能力,在法庭科学领域中有较好的应用价值。     

应用Ion Torrent PGM?平台进行人mtDNA全基因组测序

目的应用Ion Torrent PGM?平台对人线粒体基因组全序列进行分析检测。方法采集39名辽宁汉族无关个体以及4个母系家系的14名相关个体样本,应用SequalPrepTMLong PCR试剂盒进行扩增,应用Ion ShearTMPlus Reagents试剂盒和Ion Plus Fragment Library试剂盒等构建文库,并在Ion Torrent PGM?平台上进行线粒体基因组全序列测序。结果在39名无关个体共观察到39种单倍型,在396个位置观察到了397种碱基变异。无关个体中出现的变异位点数目为25~53个,平均每个个体出现36.2个碱基变异。4个母系家系中每个家系成员间具有完全相同的mtDNA单倍型,严格遵守母系遗传。结论采用本研究建立的人线粒体基因组全序列的测序检验法,可显著提高mtDNA的个体识别能力,在法庭科学领域中有较好的应用价值。     

DNA指纹技术在强奸案和亲子鉴定中的应用

在同一张膜上测定了18例无关个体血样,并计算出α-珠蛋白-3'HVR探针DNA指纹图的相关机率为4.0×10~(-12),平均每条谱带的相关机率为0.21。用此探针检验的14起强奸案和6起亲子鉴定案均获得肯定的结论。     

HRP标记α-珠蛋白-3′HVR探针进行DNA指纹分析的法医学应用研究

用ＩＩＲＰ标记α－珠蛋白－３′ＨＶＲＤＮＡ探针，化学光增强法检测，获得清晰易读的ＤＮＡ指纹图、分析引名广东地区无关个体的ＤＮＡ指纹图、平均每个个体有１９７条谱带，灵敏度接近同位素３２Ｐ标记探针的水平．两个无关个体间出现同一谱带的相关率为０．２１９。将此方法用于亲子鉴定，取得了令人满意的结果。     

广东汉族DXS10011和DXS8377单体型

目的调查DX10011和DXS8377两个X染色体STR在广东汉族男性群体中的遗传多态性。方法DNA样本来自广东汉族男性无关个体,PCR后用聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法进行DNA分型。结果在113名个体中,DXS10011和DXS8377分别检出20和12个等位基因。DXS10011-DXS8377共有72种不同的单体型,最多见的单体型只出现了3次。在没有母亲时,DXS10011-DXS8377的女孩的非父排除率为0.9588。在83个孩子为女孩的三联体家系和29个有两个孩子的家系中,DXS10011和DXS8377均表现为共显性连锁遗传,且没有发现突变。结论本数据表明DXS10011和DXS8377在复杂的亲权鉴定中可提供高的遗传多态性信息。     

PCR法对HLA-DQ_α基因的分型及其在性犯罪鉴定中的应用

本文应用 PCR 法及 ASO 探针斑点杂交技术,对100例无关个体血液 DNA 及10例性犯罪案件混合斑中精子 DNA 进行了 HLA-DQα基因的扩增及其 DNA 分型。结果正常人0.1～0.3μgDNA 就能满足 DQα基因扩增的需要。在100例个体中可以观察到由4种等位基因组成的10种 DQα基因型。10例不同条件的混合斑中精子 DNA 经30～60次扩增后与 ASO 探针杂交均能准确地判定 DQα基因型。HLA-DQα是个体识别能力较强的遗传标志。本文为性犯罪中精子来源的个体识别提供了一个新方法,具有一定的实用价值。     

河北秦皇岛地区汉族人群16个Y-STR基因座遗传多态性

本文对中国秦皇岛地区汉族216名健康无关男性个体进行16个Y-STR基因座复核扩增荧光检测。采用Chelex-100法提取样本DNA,用Life公司Y-filer反应试剂盒进行扩增及检测,结果在16个Y-STR基因座共检出216个单倍型,累计GD值达0.998 968,适合于单亲鉴定、混合样本的个体识别和Y-STR家系排查。     

DNA指纹的个体特异性和细胞稳定性研究

人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的"核心"顺序构成.采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带主体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性,而且安全具有个体特异性.本文用小卫星探针33.15,调查了北京地区的60名无关个体,     

DNA纹印技术的初步研究——用PYNH24探针分析MspI的RFLP

应用 Southern 印迹杂交技术,分析了人体基因组 DNA MspI 酶解物与特异探针 PYNH24杂交的限制酶切片段长度多态性,获得清晰易读的杂交图谱。50个不相关个体血样中未发现相同图谱,显示了个体特异性,为法医生物物证检验工作提供了新的分析手段。     

31个SNP位点多重PCR扩增和芯片分型技术的建立及其法医学应用

目的对SNP基因分型芯片在个体识别中的应用价值进行研究。方法根据SNP不同等位基因的序列设计探针,制成分型芯片。采用4个复合PCR体系,用末端标记了Cy5的引物进行复合PCR扩增,产物与寡核苷酸探针进行杂交,根据杂交产生的荧光信号值确定样品在各SNP位点的基因型。将这一方法应用于109份样本的分型,根据基因型分布统计分析31个SNP位点的法医学应用价值。同时,进行家系调查和方法灵敏度分析。结果方法的灵敏度为1ng;所检测的31个SNP位点的累积个体识别率为0.9999999999979(偶合率为2.13×10-12),二联体亲子鉴定中累积非父排除率为0.9609,三联体亲子鉴定中累积非父排除率为0.9970。家系调查的结果表明,这些位点等位基因由亲代向子代的传递符合孟德尔遗传定律。结论上述31个SNP位点为中高信息量位点,适用于法医学个体识别,可作为当前STR系统的补充。     

HinfⅠ和HaeⅢ酶解条件对DNA指纹图的影响

用辣根过氧化物酶标记α-珠蛋白-3’－HVR探针检测同一个体的DNA，其所产生的DNA指纹图谱带随着酶解条件的变化而发生改变。由于谱带的改变，给亲子关系的同一认定带来了困难，尤其是多位点探针的检测。为了了解Hinfl和Hae皿两种酶在不同酶解时间和不同酶量的条件下对DNA指纹图谱带的影响，本文作者利用多位点探针a一珠蛋白一3’－HVR和单位点探针MSS进行检测VNTR图谱的实验。材料与方法一、材料1．无关个体血液样品取自平时破案中所剩检材；2．琼服糖（美国signla公司产）；3．Hinfl和HaeI（美国premagem公司）4．非同位素标记…     

非同位素标记DNA探针初步研究

本文报导了将辣根过氧化物酶直接标记在单链 DNA 探针上,制备出非同位素的 DNA 探针,采用化学光增强法检测杂交结果,所得图谱清晰,容易判读。所制备出的 DNA 探针可用于人类性别鉴定和个体识别,为 DNA 检验技术推广应用开辟了新的领域。     

温州汉族群体15个STR基因座遗传多态性

本文对347名温州汉族无关个体的15个STR基因座多态性进行了调查,在群体水平丰富我国STR遗传资料数据库。1材料与方法 347名祖孙三代居住在温州地区的汉族无关个体的血样来自本实验室日常检案积累。按行业标准GA/T383-2002《法庭科学DNA实验室检验规范》中Chelex法提取所有检材DNA。     

Y染色体STR检验技术在侦查破案中的应用

Y染色体STR具有父系遗传特点,同一家族中男性个体的Y染色体STR分型检验结果完全一样。当在现场上发现了男性犯罪嫌疑人的生物检材,如精斑、血迹、烟头等,对相关范围内家系中男性个体进行调查,可以缩小侦查范围并节省大量经费。Y染色体作为常规DNA检验方法,在侦查破案中的作用越来越大,本文介绍本实验室两年来Y染色体STR检验技术的应用情况,供大家参考,以求共进。1用Y染色体STR父系遗传特点进行个体排查1.1明确方向缩小侦查范围在DNA检验人员少,资金不足的情况下,应有效利用资金及人力,不能盲目用DNA检验技术广泛排查。如果案件具…