HLA 及其在法医学上的应用

HLA 是迄今人类最复杂的遗传多态性系统,其在法医学上的应用,包括亲子鉴定和个人识别的重要性日益被认识。作者等对血痕、血清和唾液的 HLA 测定的研究结果证明:(1)血痕中存在较强的抗补体作用。应用淋巴细胞毒抑制试验测定血痕的 HLA 时,增加补体用量可使测定的正确率达100%,经90天的血痕仍能完全正确检出 HLA 型。(2)血清的 HLA 测定是可行的,这对远道送检血清及尸体血清测定 HLA 有一定价值。(3)唾液中有可溶性 HLA 抗原存在。     

HLA—A基因座分步PCR—SSP分型研究

目的使HLA基因分型能应用于法医常见检材的个人识别。方法 建立检测HLA—A基因座的分步PCR—SSP方法。先用一对HLA—A基因座特异的引物作第一次扩增,以所得产物为模板,分别用对HLA—A30、A31、A33特异的3对引物作第二次扩增,二次扩增的产物经电泳判型。结果 1130例血清分型为HLA—A30、A31、A33的血痕,其PCR—SSP分型和血清分型的不符合率为29％;室温保存2年的精斑、唾液斑,保存18年的血痕第一次扩增均获得满意的结果。结论法医亲子鉴定和个人识别宜用基因分型替代血清分型。HLA—A基因座分步PCR—SSP基因分型适用于法医检材。     

测定血痕MN型的血清制备

用免疫吸收方法制备的抗-M与抗-N血清,检测10天内的不相应的MN血型血痕和大约2年的相应MN型血痕,凡能获得特异性结果的抗血清才能用于血痕的MN血痕测定。否则,只能用于测定血液的MN血型。     

中国人血清GM2、3、5、21因子分布及血痕GM型检验

<正> 本文介绍了血痕Gm型检验和测定了中国人400名Gm3、5、因子;204名Gm2因子;180名Gm21因子。应用血凝抑制试验方法。     

荧光免疫标记抗体法测定血痕ABO血型

目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结果采用该方法测定血痕的血型结果准确、灵敏度高、操作简单、检验时间短。结论该方法可以作为一种测定血痕血型的检验方法使用。     

扩增Amelogenin基因用于生物检材种属鉴定

目的扩增Amelogenin基因测定血痕或组织的种属,以确定在法医学检验中的应用价值。方法收集猪、羊、马等10几种常见动物的血痕或肌肉组织,应用PCR扩增Amelogenin基因,PAGE电泳,银染后观察结果。结果哺乳动物猪、牛、狗、羊、马、驴动物血痕扩增产物为1条带,片段长度102bp。猕猴检见106bp和112bp两条带,与人血痕没有区别。兔、猫、鼠血痕未检出特异性片段。其它常见物种鳝鱼、青蛙、鸭、鹅、鸽、鹌鹑、麻雀等均未见扩增产物。结论扩增Amelogenin基因进行种属鉴定,方法简单,灵敏度高,可应用于法医检案。     

放射免疫分析法测定性激素判断血痕的性别

本文对测定血痕中睾酮量(T)和全血蛋白量(P),及T/P的比值来判断血痕性别的可能性进行了探讨.通过测定102名健康成年人血痕(男性57名,女性45名),得出本法对男性血痕的肯定率为80.7%,对女性血痕的肯定率为88.9%.实验中还观察到时间因素及某些环境因素(霉变)能使两性血痕T/P值降低.     

应用高压液相色谱(HPLC)鉴定胎儿血痕

<正> 本文介绍了一种应用反相高压液相色谱法鉴定胎儿血红蛋白(Hb-F)的新方法。胎儿血痕与成人的区别在于存在由标志着Hb-F的γ链新产生的峰。色谱中成人血痕几乎测不到γ链。而且这种方法可以通过测定珠蛋白链在色谱中的组成来铡定Hb-F的含量,它以全部Hb     

应用ELISA检测人IgG进行血痕种属鉴别的研究——酶联免疫在物证检验中的应用研究之一

本文应用 ELISA-双抗体夹心法,通过检出血中的人 IgG 鉴定人血痕。双抗体夹心法是常用来检测抗原的一种方法,但在法医学上用于测定血痕种属尚少报道。我们建立的这种方法,新鲜人血痕的阳性结果可测到64万倍。保存三年的陈旧血痕仍可测出。马、牛、羊、狗、猪、鸡、鸭、鸽、兔、驴、骡和鹌鹑均为阴性。由于本法灵敏度高、特异性好、试剂易得,勿须贵重仪器,在物证检验中便于推广。     

尼龙植绒拭子与棉拭子血痕DNA分型效果比较

目的探讨尼龙植绒拭子与棉拭子血痕DNA分型检验的效果。方法取抗凝全血用去离子水倍量稀释2、4、8、16、32、64、128倍,各取1μL分别滴加于尼龙植绒拭子与棉拭子头部,干燥制成血痕,应用Chelex-100提取每个浓度两种材质拭子的血痕样本DNA,采用Identifiler Plus试剂盒进行复合扩增,3500XL型遗传分析仪进行检测,对比各组DNA分型检验成功率。结果 1检验成功率:稀释16~64倍尼龙植绒拭子血痕均明显高于相同稀释倍数的棉拭子血痕(P0.001);其余浓度血痕两种材质拭子的检验成功率无明显差异;2分型图谱峰高和均衡性:不同浓度尼龙植绒拭子血痕峰高多为棉拭子血痕的2倍以上,16~64倍稀释血痕尼龙植绒拭子均衡性更好。结论尼龙植绒血痕拭子的检验效果优于棉拭子血痕,在微量血痕检验时优势更明显。     

对420例血痕性别测定的研究

<正> 本文收集420例干血痕,男性364例,女性56例,经制片、国产盐酸阿的平染色,用奥林巴斯研究显微镜,对血痕Y荧光小体进行了观测,结果364例男性血痕的Y小体检出率平均为29.69％,其变动范围在9～63％;56例女性血痕的类Y小体平均检出率为0.75％,其变动范围0～4％;实验的同时,对150例男性血痕和25例女性血痕涂片,运用透     

微量生物物证提取套装在现场微量血痕DNA检验中的应用

目的探讨微量生物物证提取套装应用于提取现场微量血痕DNA的检验效果。方法将静脉血制成地面血痕。分别应用微量生物物证提取套装法和普通法提取血痕。分别于恒温摇床放置2、24、48、72、96h(每组50份)进行血痕DNA检验,对比各组检验结果。结果恒温摇床上分别放置24、48、72、96h后,微量生物物证提取套装法的DNA检出率(分别为100.00%、100.00%、100.00%、96.00%)均高于普通法(分别为62.00%、26.00%、10.00%、0),差异均具有统计学意义(P<0.05)。恒温摇床上放置2h,两种方法的DNA检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论微量生物物证提取套装可有效提升放置时间较久的现场微量血痕的检出率和检出时限。     

PCR扩增ZFY/ZFX基因鉴定人类干血痕性别

应用 PCR 技术同时扩增人 ZFY 和 ZFX 基因特异的 DNA 序列,在男性血痕中可检测到两种扩增产物,即340bp 长的 ZFY 基因及488bp 长的 ZFX 基因特异 DNA 片段;在女性血痕中仅可检测到488bp 长的 ZFX 基因特异 DNA 片段,据此判定干血痕性别。干血痕的最小检出需要量为0.125μl 血液量的血痕。室温保存10年的血痕可以准确判定性别。ZFY 基因位于 Y 染色体短臂。本方法同时检测两条性染色体,可以避免由于扩增失败或 Y 染色体长臂变异出现的假阴性或假阳性。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳即可区分。     

5种免提取试剂盒检验滤纸血痕结果的比较

目的探讨5种免提取试剂盒对滤纸血痕样本检验的效果。方法陈旧滤纸血痕(存放时间12～14个月)及新鲜滤纸血痕(存放时间小于1个月)各920份,分别随机分为5组。应用AGCU 17+1、Goldeneye 20A、Powerplex16HS、Identifiler Plus、Identifiler Direct 5种免提取试剂盒进行检验,对比各组检验结果。结果陈旧滤纸血痕5种试剂盒的检验成功率为98.91%～100%,各组间无差异(P>0.05);新鲜滤纸血痕,Identifiler Plus和Identifiler Direct试剂盒检验成功率高于AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒(P<0.01);将样本做陈旧化处理后再用成功率较低的3种试剂盒进行检验,成功率分别升至100%、99.46%、99.46%;Identifiler Plus试剂盒扩增循环27次效果优于28次。结论本文5种试剂盒均可用于滤纸血痕的直接扩增检验,但使用AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒需将新鲜血痕做陈旧化处理;Identifiler Plus试剂盒需将循环次数降为27次。     

利用人体外周血痕sjTREC含量推断个体年龄

目的验证人外周血中信号结合T细胞受体删除DNA环(signal joint T-cell receptor excision DNAcircle,sjTREC)水平与年龄的相关性公式,探讨其在鉴定实践中的应用价值。方法收集已知年龄的健康无关个体外周血痕样品30例,室温放置4周后,分别提取血痕DNA。通过实时荧光定量PCR技术,定量测定外周血痕DNA中sjTREC含量,并选择人TATA盒结合蛋白(TATA box binding protein,TBP)序列作为内参基因。采用年龄推断公式Age=-7.1815Y-42.458±9.42(Y=dCtTBP-sjTREC)推算血痕的供体年龄,并与供体实际年龄作比较,验证方法准确性。结果在收集的30例血痕样品中均能检测到目的基因sjTREC和内参基因TBP。外周血痕sjTREC含量随供体年龄的增长而降低(P0.01)。采用本方法推断血痕个体年龄的准确率为76.67%。结论利用sjTREC含量推断血痕个体年龄的方法简单、快速、灵敏、种属特异性好,具有重要的应用前景。     

血型在司法实践上的应用

审理案件,要重证据。物证是很重要的证据之一。在法医物证检验中,对血液及血痕的检验、进行血型测定占有最重要的位置,约占全部物证检验的百分之八十左右。凡暴力致死的现场、凶器、死者及嫌疑对象衣物上的可疑血液及血痕都要进行检验,测定其血     

用Y染色体特异性探针作斑点印迹法检测人血痕的性别

血痕的性别检查是法医学检案中一个重要内容。过去常用的方法是检查血痕里残存有核细胞中的 x 和 y 小体,也有试图测定血痕中性激素(主要是睾丸酮)含量的办法来达到鉴定性别的目的。但都因方法比较繁琐且结果不大可靠,或男女性别判断的界线不够清楚,或受影响的因素太多而不能令人满意。     

血痕GLOI、EsD、EAP、PGM1、Gc的测定及可测期限的研究

近数十年来,经法生物学家的努力,血痕中可测定的血型日益增多.不少学者研究了血痕中各种红细胞酶及血清蛋白的可测期限,但对同一批血痕同时进行多种酶及血清蛋白可测期限的研究,尚未见有报道.为了了解GLOI、EsD、EAP、PGM_1及Gc在各种环境下的可测期限,本研究采用同一批     

应用单细胞凝胶电泳测定人血痕淋巴细胞降解的实验研究

目的探讨血痕形成时间与其DNA降解的淋巴细胞出现率的关系。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定离体72h内不同时间段的血痕中彗星样淋巴细胞出现率。结果获得人离体血液经不同放置时间间隔后,经LUC IA图像分析系统采集得到荧光图像,并获得体现DNA降解趋势的二项式回归方程y=-0.0178X2+2.4623X+8.1098,r2=0.9522,具有高度的统计学意义。结论72h内的人血DNA降解的淋巴细胞出现率与血痕形成时间之间具有高度的线性相关。     

广州人群红细胞GLOI表型的分布调查及血痕GLOI的检测

本文报道了广州地区人群的GLOI表型分布,基因频率为:GLOI~1=0.1716,GLOI~2=0.8284。室温下(25-30℃)保存的血痕20天内可全部正确分型;日晒8小时,露天过夜,4℃保存105天的血痕均可正确分型;流水冲洗2小时的血痕不能分型;室内腐败血标本9天内检测结果可靠。在实际应用时应考虑这些因素。