利用震荡冲洗法富集脱落细胞3例

在法医DNA检验中,通常采取EZ-tape脱落细胞粘取法、负压吸附法[1]、直接剪取法、两步擦拭法[2]等方法富集脱落细胞,笔者结合日常工作,介绍“震荡冲洗法”在法医DNA检验中的应用.     

两种方法相结合获取衣物脱落上皮细胞DNA 1例

在DNA检验中,提取衣物上脱落细胞的方法很多,如剪取法、生物脱落细胞提取仪吸取法等。有时衣物这类载体上遗留的脱落细胞可能来源于两个或更多的个体,检测结果表现为混合样本,在没有供者样本的情况下,很难辨识其中的个体。本文结合了上述两种方法收集某案件中现场衣服上的脱落细胞,     

指纹脱落细胞的STR检验

正现场遗留的帽子、口罩、衣服、手套等生物学检材,一般含有较多脱落细胞,DNA检验比较容易,然而对于指、掌纹短时间接触部位,由于所含脱落细胞少,且部分细胞核DNA容易降解,STR分型成功率较低。本研究对指纹脱落细胞分别应用Chelex-100、QIAamp DNA Investigator Kit、Mag Attract M48 DNA Manual Kit磁珠及直接扩增法进行STR检验,并比较分析。     

自动化高通量提取脱落细胞检材DNA

正脱落细胞是目前法医DNA检验中的重要检材之一,此类物证具有体积小、较为隐蔽、不易察觉、不易毁灭等特点。通过提取脱落细胞中的DNA,可以直接获取犯罪现场人员信息,为案件侦破提供重要技术支持。但在现场检材中通常仅能采集到微量的脱落细胞,且常常带有扩增抑制物,手工进行DNA提取操作复杂,提取效果因人而异,给DNA检验带来了诸多困难。为有效提高脱落细胞的获取量,必然要增加现场采样的数量,这又大大增加了后续DNA提取的工作     

衣物载体上人体脱落细胞的负压吸附采集法

目的建立脱落细胞负压吸附方法,用于DNA检验中衣物等载体上人体脱落细胞的采集。方法检材包括由志愿者佩带1、5、10、20m in纱线手套,穿着5、10、20m in的内衣以及外套、鞋、帽子、头套、袜子、水杯、矿泉水瓶等。在吸尘器的进风口处连接特制的吸筒,一端覆盖具有拦截和静电吸附细胞能力的特制吸附膜,选择适当负压对各检材相应部位进行吸扫。收集吸附膜上的脱落细胞,采用Chelex-100法提取DNA,AmpFLSTR Identifiler复合扩增试剂盒扩增检测。结果上述检材用本文负压吸附法采集人体脱落细胞,经检验均获得清晰、完整的STR分型图谱,并与检材提供者的基因型一致。结论本文建立的脱落细胞负压吸附技术可有效吸附载体上的脱落细胞,适用于DNA检案实践。     

车辆上脱落细胞STR检验

目的对汽车方向盘及变速杆把手上的皮肤脱落细胞进行STR检验研究。方法用EZ-tape采集车辆方向盘及变速杆上的脱落细胞,Chelex-100法与磁珠法结合提取DNA,延长保温时间。定量后调整PCR反应体系,适当增加PCR循环数,增加PCR产物量及延长进样时间进行电泳检测,使用GeneMapperIDV3.2软件进行STR分型。同时,对比使用多重置换扩增技术对提取的DNA进行全基因组扩增。结果对33份车辆方向盘和变速杆上脱落细胞的检测,其中19份检出全部基因座的基因分型结果,9份检出部分基因型,5份未检出DNA分型结果。而利用多重置换扩增技术未获得满意图谱。结论本研究建立的脱落细胞收集、DNA提取、PCR扩增及检测方法适合于车辆上脱落细胞的检验,其结果优于使用多重置换扩增技术获得的分型。     

车辆上脱落细胞STR检验

目的对汽车方向盘及变速杆把手上的皮肤脱落细胞进行STR检验研究。方法用EZ-tape采集车辆方向盘及变速杆上的脱落细胞,Chelex-100法与磁珠法结合提取DNA,延长保温时间。定量后调整PCR反应体系,适当增加PCR循环数,增加PCR产物量及延长进样时间进行电泳检测,使用GeneMapperIDV3.2软件进行STR分型。同时,对比使用多重置换扩增技术对提取的DNA进行全基因组扩增。结果对33份车辆方向盘和变速杆上脱落细胞的检测,其中19份检出全部基因座的基因分型结果,9份检出部分基因型,5份未检出DNA分型结果。而利用多重置换扩增技术未获得满意图谱。结论本研究建立的脱落细胞收集、DNA提取、PCR扩增及检测方法适合于车辆上脱落细胞的检验,其结果优于使用多重置换扩增技术获得的分型。     

触摸检材DNA的STR检验

触摸检材是指附有人体手部脱落细胞的生物检材。刑事案件中此类检材由于与人体接触时间短,所含脱落细胞量少,STR检验的难度相对较大。笔者在实际检案中利用硅珠法处理这类检材取得了较好的效果。     

Chelex-100法提取脱落细胞检材DNA的实时定量研究

目的研究脱落细胞检材DNA检验的简便有效的提取方法。方法对76份包括帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水在内的7种脱落细胞检材采用Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从帽子（头套）中获得的脱落细胞DNA平均含量为8.31ng,眼镜擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.20ng,牙刷上获得的脱落细胞DNA平均含量为49.40ng,剃须刀擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.92ng、梳子擦拭物上获得的的脱落细胞DNA平均含量为10.68ng,口香糖的脱落细胞DNA平均含量为16.30ng,羊水的脱落细胞DNA平均含量为320ng。以上76份检材性别及10个以上STR位点分型成功率为75.8%。结论从帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水等检材提取的脱落细胞可用Chelex-100法提取DNA作STR分型。     

杯口边缘附着微量口唇脱落细胞的检验

目的　探讨对遗留在杯口边缘的微量口唇黏膜脱落细胞进行DNA分型的可行性及影响因素 ,为案件的侦查提供指导作用。方法　分类提取饮水后容器边缘口唇黏膜脱落细胞中的DNA ,应用荧光标记PCR STR分型技术进行DNA分析。根据每个样本DNA基因座的检出个数 ,分别计算出基因座检出率。结果　不同容器、不同饮料对口唇黏膜脱落细胞DNA检验的影响不同。结论　杯口遗留的口唇黏膜脱落细胞 ,可作为一种法庭生物检材进行DNA分析 ,在实际办案中占有一席之地     

FOB试剂条排除血迹污染在DNA检验中的应用

正法医DNA日常检验中需要对物证表面无血迹区域进行脱落细胞DNA检验。但该类物证血迹区域周边常常附着微量血点会掩盖脱落细胞DNA,影响检测结果。金标抗人血红蛋白(FOB)试剂条是通过把胶体金的显色作用和免疫层析原理相结合而研制的血液检测工具,灵敏度较高~([1]),法医领域常用于血液种属检验。本文通过验证Identifiler Plus试剂盒能否检出FOB试剂条检测结果为阴性的血样     

三种磁珠法提取脱落细胞DNA的比较

正法医DNA鉴定中的脱落细胞检材是指含有人体皮肤黏膜脱落上皮细胞的检材,是当前刑事案件现场最有可能提取到的生物物证。目前关于脱落细胞提取纯化方法对比的报道~([1-3])较多,但相同提取方法效果横向比较的研究较少。本研究对IQ磁珠、M48磁珠、Prep Filer磁珠三种常见的磁珠法提取脱落细胞DNA的检验效果进行比较,为法庭科学实践提供参考依据,现报道如下。     

一种收集衣服上脱落细胞的新方法

目的建立一种生物脱落细胞的微量提取新方法。方法利用一套自制的“生物细胞提取仪”无损提取衣物等载体上的人体脱落细胞,采用Chelex-100法提取DNA,用不同的试剂盒进行STR复合扩增检验。结果10例检材都得到16个基因座成功分型。结论用该方法提取微量细胞DNA,可获得满意的DNA分型。     

擦拭直扩法和粘取磁珠法检测衣物脱落细胞DNA的比较

<正>法医检案中经常遇到对衣物接触DNA检验的要求,目前多为先用真空吸附或胶带粘取的方法富集衣物上的脱落细胞,然后用Chelex-100法、磁珠法或硅珠法提取DNA进行STR分型检测[1-5]。上述方法操作均较繁琐,且容易污染。本研究用生物检材采集与保存套管的尖头棉签擦拭穿过的衣物上的脱落细胞,然后剪取少量棉签头部,采用直接扩增法及用脱落细胞粘取器粘取后磁珠提取法获得脱落细胞DNA,并     

两种纯化试剂盒对人体脱落细胞检材STR检出率比较

正随着DNA检验技术的普及和发展,办案人员应用DNA技术的意识不断增强,采集人体脱落细胞进行DNA分析应用逐渐广泛。采用常规提取方法难以获得高质量的DNA模板,影响后续的STR分型。本研究分别采用QIA DNA Investigator试剂盒(德国QIAGEN公司)、PrepFiler~?Express BTA Forensic DNA Extraction试剂盒(美国AB公司,下文简称为PrepFiler~?Express BTA试剂盒)对129份不同载体上人体脱落细胞检材进行检验,评估两种方法的     

生物脱落细胞提取仪联合EZ-tape胶带侦破命案1例

1 案例 某日下午,李某被人用铁锨打击倒地.勘验人员发现,李某系颅脑损伤而死亡,现场遗留的铁锨头背侧有血迹,遂采用一次性医用布将铁锨把和铁锨头分别包装,送至DNA实验室进行检验 2检验过程与结果 根据常人拿持工具的习惯,先用生物脱落细胞提取仪(公安部物证鉴定中心)吸附铁锨把上着力部位处的脱落细胞,然后用EZ-tape胶带(公安部物证鉴定中心研制)粘取铁锨把该部位.     

EZ-tape在皮肤接触性检材DNA检验中的应用

正接触性检材在法医DNA检验中所占比例日益增大,其中皮肤接触性检材的检验更是其中的热点与难点之一。本研究使用EZ-tape脱落细胞粘取器转移皮肤接触性检材脱落细胞,获得了良好的效果,现总结如下。1材料与方法本实验室日常检案中受理的皮肤接触性检材共164份,其中工具手柄类15份,手印痕迹类72份,绳索类9份,面罩帽子类9份,衣物类18份,手套19份,     

67例皮肤接触样本的采集及DNA提取方法的比较分析

<正>DNA分型检验已广泛应用于法医学实践检案,尤其皮肤脱落细胞DNA分型检验,对侦查破案有重要意义[1]。而对于此类检材,选择检材预处理及DNA提取方法至关重要。本文针对常见的皮肤接     

用拭子提取脱落细胞进行DNA检验

<正>随着DNA数据库的建立，法医DNA检验在刑侦破案中正发挥着越来越重要的作用。采用口腔拭子提取口腔脱落细胞进行DNA检验，取材简便又无创伤，成本低。国外不少实验室用该法提取有犯罪前科     

“502”胶熏显指印后5种脱落细胞转移方法对STR分型影响观察

目的黑色塑料袋上潜在指印经"502"胶熏显后,观察比较5种脱落细胞转移方法对STR分型影响。方法在黑色塑料袋上捺印手印230枚,经"502"胶熏显后分别采用实物剪取、去离子水、无水乙醇、丙酮、解胶剂等5种方法转移脱落细胞,硅珠法抽提DNA,Amp FlSTR~ Identifiler~ Plus试剂盒进行STR复合扩增,3500XL遗传分析仪电泳检测扩增产物,等位基因分型用GeneMapper~ ID-X软件判读分析。记录每个样本检出等位基因的个数。各组间差异利用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果 5种方法转移后的检材STR检出率差异明显。以STR检出≥13个基因座为标准,去离子水组最高(检出率82.6%),解胶剂组次之(检出率78.3%),实物剪取组最低(检出率34.8%),以每例样品RFU值≥5000为检验满意标准,解胶剂组的检验满意度最高(26.1%)。结论使用解胶剂类溶剂可以有效转移"502"胶中的脱落细胞,为"502"胶熏显客体中的脱落细胞的STR检验提供新思路。