擦拭直扩法和粘取磁珠法检测衣物脱落细胞DNA的比较

<正>法医检案中经常遇到对衣物接触DNA检验的要求,目前多为先用真空吸附或胶带粘取的方法富集衣物上的脱落细胞,然后用Chelex-100法、磁珠法或硅珠法提取DNA进行STR分型检测[1-5]。上述方法操作均较繁琐,且容易污染。本研究用生物检材采集与保存套管的尖头棉签擦拭穿过的衣物上的脱落细胞,然后剪取少量棉签头部,采用直接扩增法及用脱落细胞粘取器粘取后磁珠提取法获得脱落细胞DNA,并     

用拭子提取脱落细胞进行DNA检验

<正>随着DNA数据库的建立，法医DNA检验在刑侦破案中正发挥着越来越重要的作用。采用口腔拭子提取口腔脱落细胞进行DNA检验，取材简便又无创伤，成本低。国外不少实验室用该法提取有犯罪前科     

3种方法联合运用提取人体脱落上皮细胞DNA

目的寻求提高法医物证检验中附有人体脱落细胞载体检材的DNA检出率的方法。方法根据案件检材的具体条件．选择3种提取方法即Chelex-100法、Chelex-100联合有机法和Chelex-100联合磁珠法。结果采用了分步提取DNA法,可充分、有效地提取微量DNA,提高了人体脱落上皮细胞有效DNA的检出率。结论根据第一步提取方法的检测结果,来调整下一步的提取策略,如是否加以纯化浓缩,可增加人体脱落上皮细胞有效DNA的检出率。     

自动化高通量提取脱落细胞检材DNA

正脱落细胞是目前法医DNA检验中的重要检材之一,此类物证具有体积小、较为隐蔽、不易察觉、不易毁灭等特点。通过提取脱落细胞中的DNA,可以直接获取犯罪现场人员信息,为案件侦破提供重要技术支持。但在现场检材中通常仅能采集到微量的脱落细胞,且常常带有扩增抑制物,手工进行DNA提取操作复杂,提取效果因人而异,给DNA检验带来了诸多困难。为有效提高脱落细胞的获取量,必然要增加现场采样的数量,这又大大增加了后续DNA提取的工作     

提取痕量检材DNA破获凶杀案1例

1案例2006年7月北京市某区发生一起入室杀人案,死者为女性(21岁),经法医尸体检验,鉴定为外力致机械性窒息死亡。提取以下五种生物检材并进行检验,现场插线板所连接电线上潜在的人体脱落细胞、死者指甲末端、死者阴道棉球拭子、死者心血和犯罪嫌疑人静脉血。用去离子水湿润的无菌脱脂棉,反复擦拭插线板所连接电线,小体系Chelex法[1]提取电线擦拭物和指甲甲缘附着物的DNA,用两步分离法去除阴道棉球拭子女性成分后,显微镜检,仅检见一个精子,用酚-氯仿法[2]提取精子DNA。PCR扩增采用PowerPlex!16System试剂盒(Promega公司美国),并用ABI-3…     

QIAshredderTM柱结合M48纯化试剂盒提取微量DNA

法医检材中DNA含量少、质量差是DNA检验失败的重要原因之一，在提取时．裂解液能否实现全部转移。是减少DNA损失的重要环节。法医DNA检材载体大多为纱线、脱脂棉类，吸附力强，本研究利用QIAshredderTM柱结合使用M48纯化试剂盒．提取、纯化此类检材中的DNA．在多起脱落细胞类检材DNA检验中取得了成功，发挥了较好的作用。现报道如下。     

微量DNA:容易忽略的生物物证

PCR技术的出现,大大提高了法医DNA分析技术的灵敏度,尤其是STR复合扩增技术的应用,不仅如同DNA指纹技术一样能够进行同一认定,而且使其灵敏度达到了纳克级以下的水平,大大提高了其解决微量、降解DNA的分析能力.Findlay等[1]成功地分析了低至单个细胞水平的模板DNA;Van Hoofstat等[2]利用DNA技术分析现场遗留指纹进行检验;Barbaro等[3]利用DNA技术对毛干进行检验;Schmerer等[4]和Burger等[5]分别用60和50个循环分析古代骨骼DNA;Van Oorschot和Jones[6]利用PCR检验,从电话话筒、钢笔、手提箱把手等提取的检材样品中得到DNA分型;Wickenheiser[7]从被盗汽车的方向盘上提取DNA进行STR分型,从而认定罪犯.以上研究报道的结果表明,现有的DNA技术能够对微量DNA进行检验.     

硅珠法提取生物检材DNA的影响因素

正在酚-氯仿有机法、Chelex-100法、磁珠法及硅珠法几种DNA提取方法中,硅珠法在脱落细胞等微量生物检材以及骨骼、牙齿等疑难生物检材中的成功应用得到了很多学者的认可[1-3]。随着硅珠法的不断推广应用,有学者对传统的硅珠法进行了改良以提高其提取模板DNA的灵敏度[4],也有人通过实验证实加大检材量能够提高硅珠法在脱落细胞DNA中的提取浓度[5]。本研究系统地比较了硅珠量、硅珠悬浮时间以及     

FOB试剂条排除血迹污染在DNA检验中的应用

正法医DNA日常检验中需要对物证表面无血迹区域进行脱落细胞DNA检验。但该类物证血迹区域周边常常附着微量血点会掩盖脱落细胞DNA,影响检测结果。金标抗人血红蛋白(FOB)试剂条是通过把胶体金的显色作用和免疫层析原理相结合而研制的血液检测工具,灵敏度较高~([1]),法医领域常用于血液种属检验。本文通过验证Identifiler Plus试剂盒能否检出FOB试剂条检测结果为阴性的血样     

67例皮肤接触样本的采集及DNA提取方法的比较分析

<正>DNA分型检验已广泛应用于法医学实践检案,尤其皮肤脱落细胞DNA分型检验,对侦查破案有重要意义[1]。而对于此类检材,选择检材预处理及DNA提取方法至关重要。本文针对常见的皮肤接     

磁珠法回收纯化DNA样本

DNA回收纯化技术是法医DNA检验的关键技术之一。目前,国际上采用的方法主要有基于吸附解离原理的磁珠法[1,2]、硅珠法[3~6]和基于分子量差异的柱法[7]、滤膜法[8]。相比之下,磁珠法由于将磁场作用引入生物分离过程,简化了手工操作步骤,节省了时间,对DNA样本的回收和纯化具有特殊的优势。本文采用吉林大学化学学院赠送的磁珠,在DNA回收纯化方面进行了一些探索。1材料与方法1.1样本DNA标准品9947A购自Promega公司;其他样本取自本实验室的案件检材。1.2主要仪器设备及试剂3100型基因分析仪(AB I公司);9700型PCR扩增仪(AB I公司);Pow…     

Amicon~ Ultra-0.5超滤离心管在脱落细胞DNA提取中的应用

正在法医物证检验中,提取产物的DNA浓度是决定该检材能否被检出和发挥作用的关键因素。当浓度较低达不到检测阈值时,常需要对提取产物进行浓缩,常用的浓缩设备为Microcon-100超滤管,但该设备仅被用于联合有机法[1-2]及Chelex法[3]来浓缩提取产物。目前,微量DNA的检验经常采用纯化试剂盒在自动化提取设备上进行提取,其高纯度的提取产物和极小的     

法医 STR 的快速检验方法

以 STR 复合扩增检测为代表的法医 DNA 分型技术以其灵敏度高、核心序列小、可复合扩增、方法易于标准化等优势,已经成为当前法庭科学 DNA 检验的主要手段,在各国刑事案件侦破和民事案件解决中发挥了重要的作用。本研究在国内外实验室法医 STR快速检验方法[1]的基础上,从生物物证 DNA 免提取扩增检验、生物物证 DNA 快速提取检验、生物物证 DNA快速扩增、利用新型检测设备快速检测及使用 Gen-eMapper ID－X 软件快速分析5个方面进行归纳。     

两种DNA提取方法检测微量陈旧汗斑1例

与人体接触过的衣、物常常附有体表脱落的上皮细胞成分。有试验证明,人体只要接触物体5秒钟以上,即有可能细胞遗留在物体上,也就是说,有可能留下核DNA及线粒体DNA[1]。在刑事案件中,如能成功地对有关物品上粘附的脱落上皮细胞的DNA检验,便可为案件的侦查和审判提供重要的线索和证据[2]。作者在实际检案中遇到一例微量陈旧汗斑,通过联合应用两种DNA的提取方法并进行了对比,解决了该案的难题。报道如下:1简要案情2003年初,某女被杀害。现场提取男士夹克衫一件,领后部有可疑油渍样斑迹,考虑此处有穿衣者留下的汗斑。2检验2.1检验材料犯罪…     

指纹脱落细胞的STR检验

正现场遗留的帽子、口罩、衣服、手套等生物学检材,一般含有较多脱落细胞,DNA检验比较容易,然而对于指、掌纹短时间接触部位,由于所含脱落细胞少,且部分细胞核DNA容易降解,STR分型成功率较低。本研究对指纹脱落细胞分别应用Chelex-100、QIAamp DNA Investigator Kit、Mag Attract M48 DNA Manual Kit磁珠及直接扩增法进行STR检验,并比较分析。     

腐败餐厨油污纸屑上DNA检验1例

接触类生物检材因其DNA含量少、污染严重、PCR抑制物多、DNA检验成功率低一直是法医DNA检验的难点之一[1,2]。特别是餐厨纸屑等非常规接触类生物检材,在气温较高,气候潮湿的环境极易腐败。本文通过对腐败餐厨油污纸屑的DNA检验,得到一男性常染色体和Y染色体DNA结果,经数据比对分析,锁定犯罪嫌疑人,成功助破尘封21年之久命案。     

Chelex-100法提取脱落细胞检材DNA的实时定量研究

目的研究脱落细胞检材DNA检验的简便有效的提取方法。方法对76份包括帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水在内的7种脱落细胞检材采用Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从帽子（头套）中获得的脱落细胞DNA平均含量为8.31ng,眼镜擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.20ng,牙刷上获得的脱落细胞DNA平均含量为49.40ng,剃须刀擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.92ng、梳子擦拭物上获得的的脱落细胞DNA平均含量为10.68ng,口香糖的脱落细胞DNA平均含量为16.30ng,羊水的脱落细胞DNA平均含量为320ng。以上76份检材性别及10个以上STR位点分型成功率为75.8%。结论从帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水等检材提取的脱落细胞可用Chelex-100法提取DNA作STR分型。     

脱落毛发线粒体DNA HV1区序列测定的研究

目的　对脱落毛发线粒体DNAHV1区序列测定方法进行研究。方法　嵌合扩增结合末端荧光标记DNA测序。结果　对 2 0例脱落毛发进行分析获得了明确的测序结果 ,与来自同一个体的血液所测得的DNA序列进行比较 ,完全相同。结论　嵌合扩增在对脱落毛发进行线粒体DNA多变区序列分析中是一种有效的方法 ,在法医DNA检验中具有实用价值。     

法医DNA分析技术的现状与最新进展

本世纪法医学最引人注目的成就就是将DNA分析技术应用于法医的个人识别和亲子鉴定。1985年，Jeffreys[1]将DNA指纹技术用于检验案件，标志着法医分子遗传学这一新领域的创建。它的出现使法医学中许多难题得以解决，近两年来，世界上众多的分子遗传学家和法医学家不断将最新出现的各种DNA分析技术应用于法医学，使得法医DNA分析技术不断得以改进，各种方法的优缺点得以相互补充，极大提高了DNA检验水平。目前，这一技术正朝着做足、高识别能力、简便的方向发展。本文就日前DNA分析技术的种类、方法、优缺点等作以简公、归纳，着重介…     

两种方法相结合获取衣物脱落上皮细胞DNA 1例

在DNA检验中,提取衣物上脱落细胞的方法很多,如剪取法、生物脱落细胞提取仪吸取法等。有时衣物这类载体上遗留的脱落细胞可能来源于两个或更多的个体,检测结果表现为混合样本,在没有供者样本的情况下,很难辨识其中的个体。本文结合了上述两种方法收集某案件中现场衣服上的脱落细胞,