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1 案例 案例1 某年1月23日,一卖淫女(黄某,31岁)在出租房内被杀害.现场勘验人员用一团脱脂棉擦拭现场遗留的一个一次性塑料口杯边缘,对其进行DNA检验.由于脱脂棉太大,致使DNA浓度减小,多次提取未检出DNA. 相似文献
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口腔拭子DNA检验的实时定量研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的寻求提高口腔拭子的DNA检验效率的方法。方法对来源于不同个体或同一个体不同擦拭次数的口腔拭子用Chelex-100或磁珠法提取的DNA用实时定量PCR技术进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统在ABI3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果在建立的Identifiler系统8μl扩增体系中,3个月内的口腔拭子用Chelex-100法提取的DNA模板1μl量较3μl量扩增效果好,磁珠法提取的DNA模板用量大小对复合扩增检测影响较小。结论用棉签擦拭颊粘膜5次制备口腔拭子,取其头部的约1/4用200μlChelex-100法提取DNA,然后用1μl模板进行复合扩增,是提高口腔拭子的DNA检验效率的简便可行的方法,但陈旧口腔拭子用磁珠法提取更能保证复合扩增分型成功。 相似文献
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1案情简介
2011年11月25日,某区某局三楼办公室发生盗窃案,侦查人员在现场发现吃剩的枣核数枚,分别包装、送检。
2检验过程及结果使用"双棉签技术"[1]提取枣核表面的唾液斑,放入1.5 mL Eppendorf管,用QIAamp DNA Investigator试剂盒(德国Qiagen公司)抽提DNA:加入ATL缓冲液180μL、PK 20μL,振荡混匀,56℃保温2h以上;加入AL缓冲液200μL、载体RNA(Carrier-RNA)2μL,70℃保温10min, 相似文献
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<正>1案例检验1.1简要案情郑某,男,2013年11月被发现死于家中床上。经现场勘查及法医检验,郑某系被人用砖块打击头面部致颅脑损伤死亡。提取现场两块沾有血迹的砖块要求进行DNA检验,以提供犯罪嫌疑人分型信息。1.2 DNA检验DNA提取根据嫌疑人可能的持砖方式,用棉签擦拭砖块1、砖块2后剪取棉纤维,加入裂解液500μL,56℃1h,95℃30min;采用硅珠法提取DNA,提 相似文献
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1案例2006年7月北京市某区发生一起入室杀人案,死者为女性(21岁),经法医尸体检验,鉴定为外力致机械性窒息死亡。提取以下五种生物检材并进行检验,现场插线板所连接电线上潜在的人体脱落细胞、死者指甲末端、死者阴道棉球拭子、死者心血和犯罪嫌疑人静脉血。用去离子水湿润的无菌脱脂棉,反复擦拭插线板所连接电线,小体系Chelex法[1]提取电线擦拭物和指甲甲缘附着物的DNA,用两步分离法去除阴道棉球拭子女性成分后,显微镜检,仅检见一个精子,用酚-氯仿法[2]提取精子DNA。PCR扩增采用PowerPlex!16System试剂盒(Promega公司美国),并用ABI-3… 相似文献
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目的对3种方法提取骨骼DNA的效果进行比较,为实际应用中选择方法提供参考。方法应用骨骼孵化液法、DNA Investigator试剂盒法和CTAB法对同一骨骼样本进行脱钙、消化、提取DNA,用紫外分光光度计检测DNA的浓度值;使用Identifilerplus试剂盒进行PCR扩增,3130xl型遗传分析仪检测分型,并用SPSS 19.0软件对各项实验结果进行统计分析。结果 1g骨粉样本经上述3种方法提取,得到的DNA浓度分别为26.53ng/μL±5.47ng/μL、23.63ng/μL±4.56ng/μL、14.93ng/μL±3.88ng/μL;单因素方差分析表明3组数据之间差异性具有统计学意义。PCR扩增后电泳检测结果显示,骨骼孵化液法和DNA Investigator试剂盒法基因座检出率和峰值大致相同,均优于CTAB法。结论本文比较的3种方法均可用于骨骼样本的实际检案,检出率较高的两种方法可作为优选方案。 相似文献
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目的 研究泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响。方法 泥浆悬液和稀释血混合,制成混有灰尘、泥土的生物样本以模拟现场生物物证,分别用加热裂解和胍盐化学裂解的方式进行细胞裂解,硅珠法提取DNA后用Identifiler Plus试剂盒进行PCR扩增及毛细管电泳检测,并对电泳结果进行比较;用泥浆悬液代替硅珠提取稀释血DNA,反向验证泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响。结果 混有泥浆悬液的4μL、20μL稀释血加热裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 969.7±376.9 RFU、9 706.7±349.8 RFU;混有泥浆悬液的4μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后无法获得完整STR分型;混有泥浆悬液的20μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 899.8±801.3 RFU;泥浆悬液代替硅珠提取20μL稀释血得到完整STR分型。结论 泥土中的二氧化硅在胍盐存在条件下会与DNA结合,导致硅珠法提取现场生物物证DNA的回收效率降低。 相似文献
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1材料与方法1·1案例某地发生的系列抢劫案中,提取到现场遗留的摩托车头盔1顶,其上未见明显斑迹。1·2方法(1)采用棉签二步法[1]擦拭头盔上与口鼻相对应的内侧部位。(2)剪取擦拭后棉签放入0·5ml Eppendorf管中,加400μl纯水清洗,离心,去上清,保留约20μl液体和沉淀物。(3)加5%Chelex-100 200μl、PK(5mg/ml)10μl,56℃温育1hr。(4)振荡,100℃8min,振荡,13000r/min离心3min。(5)取上清液150μl,采用DNA IQTM系统(Promega Cat.#DC6700)浓缩纯化。(6)在Applied Biosystems公司的9700型Ge-neAmp PCR System上进行10μl体系的Identifi… 相似文献
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目的研究不同检验方法对锡纸表面接触性DNA分型结果的影响。方法1名志愿者洗手后分别触捏锡纸条10s,每次实验30份样本均为当天分两次制作完成。分别采取植绒拭子擦拭转移直扩法、植绒拭子擦拭转移M48磁珠法、锡纸实物整体浸入M48磁珠法进行实验。结果30个样本采用植绒拭子擦拭转移直扩法全部获得完整STR分型,且不受表面粘附灰尘抑制物影响;30个样本采用植绒拭子擦拭转移M48磁珠法提取纯化,5个样本存在不同程度等位基因缺失;30个样本采用实物整体浸入M48磁珠法提取纯化,均未获得STR分型。结论采取植绒拭子擦拭转移直扩法检验结果最好,且操作方便,可作为首选;植绒拭子擦拭转移M48磁珠法效果仅次于直扩法,可视情况选用;但实物整体浸入M48磁珠法提取纯化效果最差,不可采用。 相似文献
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目的通过对DNA含量不同的血痕和多种类型生物学检材进行DNA提取和STR分型检测,探讨MPure-12全自动核酸纯化仪(MPure-12法)在DNA提取中的法医学应用价值。方法收集血痕、精斑、唾液等9种类型的生物学检材,应用MPure-12法和传统Chelex-100法提取DNA,经过PCR扩增和电泳,获取STR分型图谱。结果 MPure-12法对发根、口香糖、烟蒂、肌肉组织、唾液斑、血痕、精斑这些检材能够成功分型,唾液出现了个别等位基因丢失现象,接触拭子分型较差。Chelex-100法对血量为20μL、15μL、10μL、5μL、1μL制成的血痕均有完整分型结果,MPure-12法在血量为1μL时出现等位基因丢失现象。结论 MPure-12法适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法提取DNA的效果可能更优。仪器应用于DNA提取具有操作简单、快速、提取效率高,分型成功率高,减少人为污染等优势。 相似文献
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目的对纳米磁珠法提取纯化骨骼DNA的效果进行比较评价,为方法选择提供应用参考。方法取泥土掩埋、水中浸泡1~10年不等的25根长骨,经水洗、刮净,液氮冷冻研磨器将骨骼研磨成粉末状,分别应用纳米磁珠提取法和King Fisher仪器自动化提取法提取DNA,IdentifilerPlus试剂盒进行扩增,ABI 3100遗传分析仪进行STR分型检测;对两种方法提取的DNA定量和经扩增、分型检测的结果进行比较。结果骨骼样本采用纳米磁珠法提取到的样本DNA(1.237 5ng/μL±0.319 2ng/μL),较之King Fisher法的浓度(0.506 2ng/μL±0.280 5ng/μL)更高,两种方法间差异具有统计学意义(P0.05);而纳米磁珠法的分型成功率亦更高,两种方法间差异具有统计学意义(P0.05)。结论用纳米磁珠提取纯化骨骼DNA,能得到高质量DNA模板,有利于提高分型检验的成功率,可在实际检案中选择使用。 相似文献
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《法医学杂志》2017,(2)
目的通过对DNA含量不同的血痕和多种类型生物学检材进行DNA提取和STR分型检测,探讨MPure-12全自动核酸纯化仪(MPure-12法)在DNA提取中的法医学应用价值。方法收集血痕、精斑、唾液等9种类型的生物学检材,应用MPure-12法和传统Chelex-100法提取DNA,经过PCR扩增和电泳,获取STR分型图谱。结果 MPure-12法对发根、口香糖、烟蒂、肌肉组织、唾液斑、血痕、精斑这些检材能够成功分型,唾液出现了个别等位基因丢失现象,接触拭子分型较差。Chelex-100法对血量为20μL、15μL、10μL、5μL、1μL制成的血痕均有完整分型结果,MPure-12法在血量为1μL时出现等位基因丢失现象。结论 MPure-12法适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法提取DNA的效果可能更优。仪器应用于DNA提取具有操作简单、快速、提取效率高,分型成功率高,减少人为污染等优势。 相似文献
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手指上提取女性上皮细胞的DNA分析1例 总被引:2,自引:2,他引:0
1案例资料2005年11月14日下午,李某(男,25岁)窜入山西临汾某矿区机房中,准备将刘某(女,68岁)实施强奸,由于李某当时过度紧张而导致阳痿,故强奸未遂,只是用手指抠刘的阴道后逃窜,刘某及时呼叫后,矿工将李某抓获并报案。在李拒不承认犯罪事实的情况下,侦察人员用盐水棉球擦拭李的右手食指、中指,并剪取其右手食、中、环指指甲,将上述检材连同李某、刘某的耳血一并送到DNA检验室。送检物品为一个擦拭棉球及3枚指甲。将擦拭棉球外周棉纤维剪取少许放入1.5ml离心管中,加入150μl5%Chelex-100悬浮溶液及5μl10mg/ml PK。将3枚指甲放入1.5ml离心… 相似文献