擦拭直扩法和粘取磁珠法检测衣物脱落细胞DNA的比较

<正>法医检案中经常遇到对衣物接触DNA检验的要求,目前多为先用真空吸附或胶带粘取的方法富集衣物上的脱落细胞,然后用Chelex-100法、磁珠法或硅珠法提取DNA进行STR分型检测[1-5]。上述方法操作均较繁琐,且容易污染。本研究用生物检材采集与保存套管的尖头棉签擦拭穿过的衣物上的脱落细胞,然后剪取少量棉签头部,采用直接扩增法及用脱落细胞粘取器粘取后磁珠提取法获得脱落细胞DNA,并     

腐败尸体阴道擦拭物中精子DNA检验1例

1案例资料2003年2月20日14时许,湖北省通城县龙王嘴沙场挖出一具女裸尸,经法医检验系机械性窒息死亡、属他杀。怀疑为2003年元月25日在沙坪镇下车后失踪的刘某。2DNA检验取死者肋软骨,死者阴道擦拭物,死者可疑父母的血样。先后4批共75名嫌疑人血样。血样和肋软骨采用5%chelex-100提取DNA。阴道擦拭物经PK消化去除女性细胞、PK结合DTT消化精子后采用酚-氯仿提取DNA。用荧光标记STR复合扩增技术,检验9个STR基因座,310型遗传分析仪检测,得到Amp-Flp图谱和分型结果。死者肋软骨的分型结果与死者可疑父母血样的分型结果比对,认定具有亲…     

男性Y染色体Amelogenin Y、DYS570及DYS576缺失1例

正1案例1.1简要案情某水域发现1具高度腐败未知名尸体,法医初步判断死者为男性,提取死者肋软骨进行DNA检测。1.2检验方法使用AutoMate Express~(TM)核酸提取系统(美国Thermo Fisher Scientific公司)及配套试剂进行DNA提取,使用Power Plex~? 21系统(美国Promega公司)和GlobalFiler~(TM) PCR扩增试剂盒(美国Thermo FisherScientific公司)进行常染色体STR复合扩增。     

棉织物上血斑洗涤后无损取材方式及DNA提取方法研究

目的 探究不同无损取材方式及DNA提取方法对棉织物上洗涤血斑DNA分析成功率的影响。方法 采用棉签擦拭法、植绒拭子擦拭法、脱落细胞粘取器粘取法富集洗涤棉织物上的血痕。分别采用Chelex 100法、过柱法和磁珠法提取DNA。采用常规PCR和复合PCR技术扩增目标片段并分别运用琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳技术检测目标产物。结果 植绒拭子擦拭法取材的效果最差,通过脱落细胞粘取器粘取法获得的DNA浓度、STR分型成功率均高于棉签擦拭法,且粘取法操作较简单,实践中优先推荐选择粘取法作为该类检材的取材方式。此外,DNA浓度和STR分型结果均表明过柱法提取DNA的效果优于Chelex法,而磁珠法在3种DNA提取方法中效果最差,建议实践中选择过柱法作为此类检材DNA提取的首选方法。结论 针对棉织物检材上洗涤血痕无损取材及DNA分析,优先推荐选择脱落细胞粘取器粘取法和过柱法分别进行样本取材以及DNA提取。     

亲缘关系鉴定1例

1 案件简介 某年3月，某市发现一具未知名男尸．被张某（男）和王某夫妇二人前来认尸，怀疑死者为其儿子张某某。为此提取死者肋骨（1号）．张某（2号）和王某（3号）血样．对死者、张某、王某进行DNA检验，采用ID plus试剂盒（AB公司）扩增检测，三者STR分型见表1。     

线粒体SNP分型用于法医DNA检验1例

<正>1案例1.1简要案情某地发生一起命案,为了核实死者身份,需要对一块高度降解的人体骨头和疑似死者母亲的血样进行DNA检验,判断他们是否存在血缘关系。1.2鉴定过程接受委托后,本鉴定中心采用Chelex-100法提取血样基因组DNA,采用硅珠法提取骨头基因组DNA,采用Goldeneye TM DNA身份鉴定系统20A试剂盒[基点认知技术(北京)有限公司]对常染色体上     

提取痕量检材DNA破获凶杀案1例

1案例2006年7月北京市某区发生一起入室杀人案,死者为女性(21岁),经法医尸体检验,鉴定为外力致机械性窒息死亡。提取以下五种生物检材并进行检验,现场插线板所连接电线上潜在的人体脱落细胞、死者指甲末端、死者阴道棉球拭子、死者心血和犯罪嫌疑人静脉血。用去离子水湿润的无菌脱脂棉,反复擦拭插线板所连接电线,小体系Chelex法[1]提取电线擦拭物和指甲甲缘附着物的DNA,用两步分离法去除阴道棉球拭子女性成分后,显微镜检,仅检见一个精子,用酚-氯仿法[2]提取精子DNA。PCR扩增采用PowerPlex!16System试剂盒(Promega公司美国),并用ABI-3…     

指甲擦拭物Y-STR检验在女性被杀案件中的应用

1案例 本市发生一起女性被害案件。现场遭到很大程度的破坏．通过混合斑等常规生物检材检测．均未得到有效证据。技术人员遂提取了死者指甲进行DNA检验。用双蒸水浸润的纱线擦拭被害人指甲内侧尖部．放入1．5mL离心管中．采用Chelex法提取检材基因组DNA，ldentifilerTM试剂盒（美国AB公司）复合扩增检测，结果在被害人的指甲擦拭物中检出含有微量     

D3S1358基因座重复序列分析1例

1案例资料1.1简要案情作者在对1例非正常死亡案件死者的血样进行DNA检验中,发现D3S1358基因座呈三带型。1.2检验方法STR分型按照硅珠法[1]提取血样模板DNA,用Identifiler Plus荧光检测试剂盒进行PCR扩增,产物在ABI 3130XL遗传分析仪进行分型检测,使用GeneMapper ID-X软件进行数据分析。筛选阳性克隆设计的引物序列见表1。     

3种提取胶带粘面汗潜指印中DNA的方法比较

目的比较胶带粘面汗潜指印中DNA提取的方法。方法分别采用硅珠法、QIAMicrokit法、硅珠-QIAMicrokit法提取胶带粘面的汗潜指印中DNA,STR复合扩增,荧光电泳检测。结果用QIAMicrokit法、硅珠-QIAMicrokit法提取胶带粘面汗潜指印中DNA,检测成功率分别为21%和36%。硅珠法检测未获成功。结论硅珠-QIAMicrokit法提取胶带粘面汗潜指印中的DNA比QIAMicrokit法,检验时间更短,检测成功率更高。     

陈旧骨骼的核DNA检验

在发达国家，对无名尸骨进行个人识别时，通常的方法是比较骨骼与死者生前的身体特征或医疗记录[1]，但在发展中国家，由于。医疗记录往往不甚完备，这种方法较难以实施。此外，如果对已埋葬数十年的尸骨进行鉴定，则更需要依靠其他技术方法。运用PCR技术进行DNA检验是解决这种难题的途径之一。陈旧骨骼的DNA降解严重，从中提取的核DNA一般小于1000bp[2]，为此，进行PCR分析时宜选择扩增片段较短的基因位点。在本文中，作者报道了一种可靠的用于陈旧骨胳DNA提取、扩增和基因分型的方法。材料和方法一、样本取长骨、椎骨作为实验检材…     

分析DNA亲缘关系侦破强奸杀人焚尸案1例

1案情2005年某日,某地发现一具无名女尸,头面部被焚烧,容貌被毁,全身赤裸。尸检发现死者生前有性行为,并提取了阴道及肛门拭子。对提取的阴道及肛门拭子进行精斑及STR检验,肛门拭子检出精斑及STR分型,阴道拭子未检出精斑。为查找尸源,取可疑父亲王某血样与尸体血样进行常染色体STR检验,结果显示死者血样DNA基因型与王某血样DNA基因型符合生物学单亲遗传关系。为排除重点嫌疑人,将尸体肛门拭子DNA基因型与多名重点嫌疑人     

人体脱落细胞DNA检验1例

1案例资料1.1简要案情2013年7月15日,犯罪嫌疑人撬锁进入某住户家中,盗取金佛、名贵字画及现金10余万元等物品。因现场已被严重破坏,无法提取指纹等痕迹,仅提取到1把螺丝刀,怀疑曾被嫌疑人使用,要求进行人体脱落细胞DNA检验。1.2 DNA提取及检验DNA提取取细轴棉签用TES缓冲液浸湿（半干）,     

口腔拭子DNA检验的实时定量研究

目的寻求提高口腔拭子的DNA检验效率的方法。方法对来源于不同个体或同一个体不同擦拭次数的口腔拭子用Chelex-100或磁珠法提取的DNA用实时定量PCR技术进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统在ABI3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果在建立的Identifiler系统8μl扩增体系中,3个月内的口腔拭子用Chelex-100法提取的DNA模板1μl量较3μl量扩增效果好,磁珠法提取的DNA模板用量大小对复合扩增检测影响较小。结论用棉签擦拭颊粘膜5次制备口腔拭子,取其头部的约1/4用200μlChelex-100法提取DNA,然后用1μl模板进行复合扩增,是提高口腔拭子的DNA检验效率的简便可行的方法,但陈旧口腔拭子用磁珠法提取更能保证复合扩增分型成功。     

酸性磷酸酶及P30试验阴性检出精子基因型1例

1案例某年3月14日,某县一女青年被害,现场在距公路数十米的田地里,死者头部被打出血,衣着不整,初步分析系拦路抢劫强奸杀人。现场提取的大量血痕、毛发经检验均与死者本人一致。提取死者阴道拭子,经酸性磷酸酶预试验呈阴性,经P30试验呈阴性,经PK消化后,离心,取沉淀物涂片,经亚甲基蓝酸性品红溶液染色,镜下检见个别精子,硅珠法[1]提取DNA,经荧光标记STR复合扩增技术,检出样品为混合DNA,其中有男性物质。分型结果见表1。表1分型结果D3S1358VWAFGAAmelD8S1179死者15/1614/1825/26X/X12/15阴拭15/1614/16/18/2121/23/25/26X/Y10/12/1…     

STR系统HUMCSF1PO-HUMTPOX-HUMTH01三位点复合扩增在法医学上的应用

STR系统是人类基因组中具有高度多态性的遗传标志系统，其DNA片段通常小于500hp，很容易通过PCR扩增并进行检测＼笔者参照美国Promega公司的HUMCSFIPO－HUMTPOOHUMTHVCTT）三位点复合扩增的方法，在对中国上海地区117例个体作了人群频率调查以后，逐步将该方法运用于血液。血痕、精斑的检验，在凶杀、强奸等刑案及亲子鉴定中起到了证据的作用。材料与方法样品取自刑案中涉及的活体血液150例、死者血液及血痕140例、精斑20例。一、DNA提取1．血液及血痕中的DNA提取取lml无菌水于1．5ml离心管，加入10pl血液或3mmZ血痕，小心…     

微量金属附着物检验确定作案工具1例

1案件资料 某日,刘某与前夫王某因经济纠纷产生矛盾,后王某在刘某经营的家电店内将其杀死,并将另外两名工作人员刺伤后逃窜。接到报案后不久办案人员就将王某抓获,并在王某家中提取到一把梅花螺丝刀,目击者称其即为作案凶器。据王某交待是用螺丝刀猛刺死者胸部致其死亡,但是经法医DNA检验却未能在螺丝刀上检出死者的DNA。     

用Chelex100法及有机溶剂提取法联合提取DNA扩增STR基因座的比较研究

为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率 ,本文用Chelex10 0法及Chelex10 0法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件 6份血斑及 6份混合斑中精子DNA ,并用PE公司ProfilerPlus系统复合扩增 ,ABI 310型基因分型仪检测。结果表明 ,常规采用Chelex10 0法提取血斑及精斑等生物检材DNA作STR基因座检验失败或所检测的位点较少时 ,应对Chelex10 0法提取的DNA上清液再用有机溶剂提取法提取 ,可极大提高DNA检验成功率。采用本文建立的Chelex10 0法联合有机溶剂提取法 ,提高了PCR扩增阳性率 ,对实际检案很有帮助 ;在PCR扩增前应常规进行DNA定量检验 ,否则对于重要检材应进行梯度扩增。     

法医 STR 的快速检验方法

以 STR 复合扩增检测为代表的法医 DNA 分型技术以其灵敏度高、核心序列小、可复合扩增、方法易于标准化等优势,已经成为当前法庭科学 DNA 检验的主要手段,在各国刑事案件侦破和民事案件解决中发挥了重要的作用。本研究在国内外实验室法医 STR快速检验方法[1]的基础上,从生物物证 DNA 免提取扩增检验、生物物证 DNA 快速提取检验、生物物证 DNA快速扩增、利用新型检测设备快速检测及使用 Gen-eMapper ID－X 软件快速分析5个方面进行归纳。     

砖块上脱落细胞DNA分型检验

<正>1案例检验1.1简要案情郑某,男,2013年11月被发现死于家中床上。经现场勘查及法医检验,郑某系被人用砖块打击头面部致颅脑损伤死亡。提取现场两块沾有血迹的砖块要求进行DNA检验,以提供犯罪嫌疑人分型信息。1.2 DNA检验DNA提取根据嫌疑人可能的持砖方式,用棉签擦拭砖块1、砖块2后剪取棉纤维,加入裂解液500μL,56℃1h,95℃30min;采用硅珠法提取DNA,提