腐败尸体阴道擦拭物中精子DNA检验1例

1案例资料2003年2月20日14时许,湖北省通城县龙王嘴沙场挖出一具女裸尸,经法医检验系机械性窒息死亡、属他杀。怀疑为2003年元月25日在沙坪镇下车后失踪的刘某。2DNA检验取死者肋软骨,死者阴道擦拭物,死者可疑父母的血样。先后4批共75名嫌疑人血样。血样和肋软骨采用5%chelex-100提取DNA。阴道擦拭物经PK消化去除女性细胞、PK结合DTT消化精子后采用酚-氯仿提取DNA。用荧光标记STR复合扩增技术,检验9个STR基因座,310型遗传分析仪检测,得到Amp-Flp图谱和分型结果。死者肋软骨的分型结果与死者可疑父母血样的分型结果比对,认定具有亲…     

DNA检验早期胚胎组织破获强奸案1例

在性犯罪案件中,检验3个月以上流产胎儿、绒毛、羊水的案件较多,检验早期胚胎(8周内)的案件较少,现报道检验早期胚胎破获强奸致孕案1例。1案例资料陈某,女,13岁,在某中学校舍内多次被该校男生叶某强奸,于某年5月9日经医院证实怀孕7周并实施人工流产。提取受害人陈某的血样和流产的胚胎组织及嫌疑人叶某的血样进行DNA检验。2检验与结果用Chelex法提取DNA,用identifiler荧光STR复合扩增试剂盒扩增,扩增产物用PE310测序仪进行检测分型,结果显示送检的胚胎与陈某、叶某有亲生关系(表1)。表1流产胚胎与陈某、叶某血的STR位点基因分型检材D…     

细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的对比

目的 比较细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的效果,探讨两种方法在法医学检验中的运用。方法 使用细胞裂解法和磁珠法获取不同数量的THP-1细胞的基因组DNA并使用实时定量PCR检测DNA含量。使用细胞裂解法和磁珠法对不同稀释倍数的人血进行STR分型检测。结果 当THP-1细胞数量为100、400和800个时,使用细胞裂解法提取的DNA含量分别为(1.219±0.334)、(5.081±0.335)、(9.332±0.318) ng;使用磁珠法提取的DNA含量分别为(1.020±0.281)、(3.634±0.482)、(7.896±0.759) ng,在THP-1细胞数量为400和800个时,细胞裂解法提取的DNA含量高于磁珠法(P<0.05)。使用细胞裂解法和磁珠法检测不同稀释倍数人血的STR分型时灵敏度相近,在血样稀释100、300和500倍时均能获取完整的STR分型,血样稀释700倍时,均无法检出完整STR分型。使用细胞裂解法无法检出未稀释人血的STR分型。结论 细胞裂解法操作方便,能最大程度保留模板DNA,有望适用于微量血痕检验。     

Penta D、D21S11基因座分型表现异常3例

<正>1案例资料1.1简要案情打击拐卖儿童专项行动送检150名身源不明的儿童血样,要求进行DNA检验,结果发现其中3名疑似先天愚型患儿Penta D和D21S11基因座分型异常。1.2 STR分型检验上述3名儿童血样采用常规Chelex-100法提取     

单细胞分离荧光原位杂交法用于男女混合血DNA分型

目的采用单细胞分离荧光原位杂交法精确分离混合血样中男性和女性细胞并进行分型检验。方法收集男、女性血,按照男∶女为1∶5、1∶10、1∶20制备混合血样,加入0.075mol/L KCl 600μL,轻混、放置30min后加入150μL固定液离心留沉淀涂片,利用Vysis 30-161050试剂盒进行荧光原位杂交,并用PALM激光显微捕获系统分离出男、女性细胞,使用Identifiler试剂盒复合扩增并进行检测。结果捕获8个血细胞即可得到完整的DNA分型,且随着细胞数目的增多,检出率逐渐提高而等位基因丢失率逐渐降低。10个血细胞的检出率最高,为93.75%。5μL男性血液与本实验各比例女性血混合用本文方法检验均可获得男性分型。案例混合血斑经检验获得单一男性和女性分型。结论单细胞分离荧光原位杂交法可用于男女混合血样本中DNA分型检验。     

载体法检验微量检材DNA

目的解决微量生物检材DNA检验难题。方法采用载体法对已知微量血样DNA进行检验，再与目前高灵敏度的Chelex-100提取的DNA检验的相应结果进行比较。结果载体法针对微量血样的DNA检验。不但能得到正确的STR分型结果．同时在检验灵敏度上比Chelex-100法高出2倍以上。结论载体法可提高微量生物栓材中DNA检出率，且操作简单，在法医检案工作中具有较高应用价值。     

分析DNA亲缘关系侦破强奸杀人焚尸案1例

1案情2005年某日,某地发现一具无名女尸,头面部被焚烧,容貌被毁,全身赤裸。尸检发现死者生前有性行为,并提取了阴道及肛门拭子。对提取的阴道及肛门拭子进行精斑及STR检验,肛门拭子检出精斑及STR分型,阴道拭子未检出精斑。为查找尸源,取可疑父亲王某血样与尸体血样进行常染色体STR检验,结果显示死者血样DNA基因型与王某血样DNA基因型符合生物学单亲遗传关系。为排除重点嫌疑人,将尸体肛门拭子DNA基因型与多名重点嫌疑人     

PowerPlex(R)16HS系统在建立DNA数据库中的应用

免提取型法医DNA检测试剂盒是近年出现的新产品,具有成本低、速度快、操作简便等优点[1],在DNA数据库大样本量检验分析和检验标准化方面,优势明显.本研究采用PowerPlex(R)16 HS系统对DNA建库样本(FTA卡血样或滤纸片血样)进行直接扩增,检测情况报道如下..     

利用指甲缝中残留DNA破案1例

1案例资料1.1简要案情鲁某,女(怀孕6个月)。2004年10月某日,一人在家时被他人掐捂窒息死亡。根据尸体检验及案件调查分析,鲁某在与罪犯搏斗时,手指甲抓刮到罪犯皮肤,指甲缝可能留有罪犯皮肤表皮细胞组织。笔者先对死者指甲进行DNA检验,并检出一男性DNA。案件排查中,同乡张某突然失踪,故采集张某父母的血样送检。经检验,鲁某指甲缝中残留男性DNA与张某父母的血样符合遗传关系,从而锁定张某为重大嫌疑对象,抓捕后取张某血样进行DNA鉴定,结果认定张某与指甲缝检材分型一致。在证据面前张某对犯罪事实供认不讳。1.2DNA检验鲁某、张某及其…     

DNA检验结合临床检查确定男性假两性畸形1例

1案例资料1.1简要案情2012年12月11日,林某（女,42岁）因涉嫌拐卖儿童罪被刑拘,采集血样（编号：3507021202093）作为前科人员建库样本送DNA实验室检验。1.2 DNA分型检验样本采用Identifiler Direct和PowerPlex 21试剂盒进行检验,扩增产物用ABI 3130XL型DNA序列分析仪电泳,GeneMapperID v3.2软件进行结果分析。     

FTA-DNA直接提取法的研究与应用

目的建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法。方法取直径1．2mm FTA卡血样，分别用FTA-DNA直接提取法及FTA常规提取方法提取DNA，AB-Identifiler^TM试剂盒分别进行10山和25山体系检测比较，并筛选批量grA卡血样DNA自动化提取程序。结果200份grA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板，25μl体系PCR-STR检测，分型结果均良好。10μl体系检测，FTA-DNA直接提取法优于FTA常规提取方法，图谱RFU值为1000～2000，采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳；采用FTA常规提取方法检测，图谱RFU值100～2000，小片段优先扩增现象明显，且有19％的样本出现丢峰现象，采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显。经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10山体系检测本2万余份FTA卡采集的血样，均获得16个STR基因座DNA分型结果。结论本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA卡血样自动化DNA建库。     

男性样本Amel基因座Y片段引物结合区变异1例

1案例资料 1.1 简要案情 2011年11月23日在某地发现1具无名尸体,经解剖仅具有男性生理特征,现场有1处血迹.提取无名尸血样及现场血迹进行DNA分型检验. 1.2 DNA检验 采用Chelex-100法提取尸体及现场血迹样本DNA.采用ID试剂盒进行PCR复合扩增,扩增产物经3130遗传分析仪进行毛细管电泳,用GenemapperID v3.2软件分析各基因座的基因型.2份检材的分型结果一致,提示为同一人,但牙釉质蛋白基因座(amelogenin gene,Amel)分型显示为女性(图1).     

批量陈旧血样DNA的自动化检验

目的建立批量陈旧血样DNA自动化提取检验的方法。方法采用普通磁珠法和本文建立的磁珠法经TECAN Freedom EVO150—8型自动化工作站分别提取540份陈旧血样模板DNA,采用Sinofiler^TM试剂盒进行荧光标记复合扩增。结果采用普通磁珠法和本文所建DNA提取方法,在540份样本中获得全部基因座STR分型的样本分别为217份和488份,检验成功率分别为40．2％和90．3％。结论本文所建方法可显著提高大批量陈旧血样自动化检验成功率。     

MPure-12全自动核酸纯化仪与Chelex-100法的比较CSCD

目的通过对DNA含量不同的血痕和多种类型生物学检材进行DNA提取和STR分型检测,探讨MPure-12全自动核酸纯化仪(MPure-12法)在DNA提取中的法医学应用价值。方法收集血痕、精斑、唾液等9种类型的生物学检材,应用MPure-12法和传统Chelex-100法提取DNA,经过PCR扩增和电泳,获取STR分型图谱。结果 MPure-12法对发根、口香糖、烟蒂、肌肉组织、唾液斑、血痕、精斑这些检材能够成功分型,唾液出现了个别等位基因丢失现象,接触拭子分型较差。Chelex-100法对血量为20μL、15μL、10μL、5μL、1μL制成的血痕均有完整分型结果,MPure-12法在血量为1μL时出现等位基因丢失现象。结论 MPure-12法适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法提取DNA的效果可能更优。仪器应用于DNA提取具有操作简单、快速、提取效率高,分型成功率高,减少人为污染等优势。     

葡萄胎的DNA检验

目的探讨一例强奸案中的葡萄胎样本的DNA检验及结果分析。方法用Identifiler试剂盒对葡萄胎样本和受害人血样进行荧光复合STR基因座扩增并分型。结果该例的葡萄胎在15个STR基因座上分型均为纯合子,应属于单精子受精的完全性葡萄胎。结论葡萄胎类型多种,对应着不同的DNA分型,在实际案件的检验中应引起注意。     

D21S11和Penta D基因座STR分型异常2例

1案例资料 1.1案件简介 案例1某年10月下旬,市郊花坛内发现一名男婴,经走访是王某夫妇所遗弃,采集王某夫妇和婴儿纸质血样要求DNA检验,结果发现男婴D21S11、Penta D基因座STR分型检出三等位基因。 案例2某年4月7日上午,城区文化广场附近小溪岸边发现一具女尸,其尸体东南侧50m范围内有滴落状血迹,DNA检验系一女性所留,但Penta D基因座检出三等位基因,采集嫌疑对象和其父母血样进行DNA检验。     

MPure-12全自动核酸纯化仪与Chelex-100法的比较

目的通过对DNA含量不同的血痕和多种类型生物学检材进行DNA提取和STR分型检测,探讨MPure-12全自动核酸纯化仪(MPure-12法)在DNA提取中的法医学应用价值。方法收集血痕、精斑、唾液等9种类型的生物学检材,应用MPure-12法和传统Chelex-100法提取DNA,经过PCR扩增和电泳,获取STR分型图谱。结果 MPure-12法对发根、口香糖、烟蒂、肌肉组织、唾液斑、血痕、精斑这些检材能够成功分型,唾液出现了个别等位基因丢失现象,接触拭子分型较差。Chelex-100法对血量为20μL、15μL、10μL、5μL、1μL制成的血痕均有完整分型结果,MPure-12法在血量为1μL时出现等位基因丢失现象。结论 MPure-12法适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法提取DNA的效果可能更优。仪器应用于DNA提取具有操作简单、快速、提取效率高,分型成功率高,减少人为污染等优势。     

亲子鉴定中21-三体综合征1例

正1案例1.1简要案情2014年本中心受某福利院的委托,受理了1例因认亲需要而进行的亲子鉴定,征得当事人的同意,采取母亲及孩子血样,进行STR分型。1.2检验方法1.2.1 DNA提取采用常规Chelex-100法分别提取母亲与孩子血样DNA,采用Goldeneye~(TM)20A试剂盒[基点认知技术(北京)有限公司],进行19个常染色体STR基因     

D12S391基因座检出四等位基因1例

正1案例1.1简要案情1例父子关系鉴定中采集被鉴定人的末梢血进行检测,发现被检父D12S391基因座STR分型为20,21,22,23,后单独采集被检父带毛囊的毛发样本进行验证。1.2DNA检验采用Chelex-100法提取样本基因组DNA。采用Goldeneye誖20A试剂盒[基点认知技术(北京)有限公司]对被鉴定人血样进行扩增,后用EX22试剂盒(无     

PentaD、D21S11基因座分型异常分析3例

<正>1案例资料1.1简要案情30例身源不明的儿童血样,来源于拐卖儿童的送检检材。在STR分型检验中,发现其中3例(1例男性,2例女性)Penta D及D21S11基因座分型异常。1.2检验方法DNA分型检验分别用Identifiler Plus(Life Technogies公司,美国)、Power Plex21(Promega公司,