猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻混合苗的免疫试验

猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻混合苗的免疫试验程庆华，牛小迎，叶成玉，解洪业，李志宁（青海省畜牧兽医科学院西宁８１０００３）１９９２年以来，青海省从四川等地陆续购进大批猪苗，继之猪流行性腹泻（ＰＥＤ）和猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）普遍流行。经青海省畜牧兽医...     

猪白细胞干扰素对猪流行性腹泻病毒的干扰试验

猪白细胞干扰素对猪流行性腹泻病毒的干扰试验刘万钧张道永马思奇（四川省畜牧兽医研究所成都６１００６６）（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所）江开全丁敦至李品齐王劲（四川世红生物技术有限公司）猪流行性腹泻（ＰＥＤ）是一种传播快、流行广、各种年龄的猪均可发生的...     

猪流行性腹泻微量血清中和试验的建立和应用

用分离自广东某猪场并适应于传代细胞生长的猪流行性腹泻病毒Ｐ－ＥＤＶＧ＿Ｖ毒株作猪流行性腹泻（ＰＥＤ）微量血清中和试验。检测了五个猪场共１５２份血清，其中未发生过ＰＥＤ的一个猪场３５份血清，抗体滴度≤１：２；三个发生过ＰＥＤ的猪场７７份血清，抗体滴度在１：４～１．５１２；一个接种过ＰＥＤ油佐剂灭活疫苗的猪场４０份血清，抗体滴度在１：８～１：１０２４。猪传染性胃肠炎、伪狂犬病、猪瘟和轮状病毒阳性血清均不能中和ＰＥＤＶ，表明该方法具有准确、可靠、特异性好、操作简便的优点。     

猪流行性腹泻病的免疫预防试验

猪流行性腹泻病的免疫预防试验吴国栋，潘长春，孙泽祥，许亚琴，赵丕照，罗仲振（浙江省宁波市畜牧兽医站３１５０１０）猪流行性腹泻病（ＰＥＤ）是冬春季节广为流行的具有高度接触性急性肠道传染病。县一些地方１９８９年冬春９０％以上的猪发生ＰＥＤ，死亡近千头，经...     

猪流行性腹泻的诊断与治疗

猪流行性腹泻 (Ｐｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａ ,ＰＥＤ)是由猪流行性腹泻病毒 (ＰＥＤＶ)引起猪的一种急性肠道传染病 ,以呕吐、水样腹泻和脱水为特征。 1976— 1977年比利时和英国首先报道该病 ,以后在捷克、匈牙利和原西德等国陆续发生。我国吉林、辽宁、上海、四川先后有此病报导。 2 0 0 0年 ,山东省枣庄市峄城区某猪场暴发猪流行性腹泻。1　发病情况枣庄市峄城区吴林某猪场饲养体重 2 0— 30ｋｇ断奶仔猪5 0 0头 ,5月 12日个别猪排灰白色水样粪便 ,并有呕吐 ,逐渐加重 ,严重脱水、消瘦、眼窝下陷 ,发病猪逐日增多 ,5…     

猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究

用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Ｖｅｒｏ等传代细胞的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）Ｇ１强毒株，通过Ｖｅｒｏ、ｐＫ１５、ＳＴ细胞株的连续传代，证明第７２代毒已被致弱。用８３代毒（Ｐ８３）对吃初乳前的小猪以８～１０ｍｌ剂量口服连续传５代，每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定，并于增殖后作为次代接种材料，结果５代毒均未引起小猪发病，证实该代次毒株的安全、稳定，达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。用Ｐ８３制成弱毒疫苗，对２２头８～１０日龄小猪进行免疾效力试验，１４头口服免疫，８头颈肌注射免疫，剂量均为２ｍｌ／头。免疫后２１ｄ以最小发病量（即原毒液的１：１２稀释液）及原毒液的２倍、４倍和８倍的稀释液经口进行强毒攻击，对照组１２头也以相对剂量同时攻击。结果免疫组仅口服免疫、经大于最小强毒攻击量６倍剂量攻击组中１头（１／２）有一过性轻微腹泻，发病不到２４ｈ即恢复。对照组的１２头中有１０头典型发病，严重腹泻，并有寒颤等症状，病程长达３～６ｄ，７ｄ后腹泻症状消失，但体况明显削瘦。试验证明Ｐ８３制备的弱毒疫苗的总免疫效力达９４．６％，表明Ｐ８３已具备弱毒疫苗株的要求。     

单克隆抗体阻断ELISA检测SPF猪与非SPF猪肺炎霉形体抗体的比较

单克隆抗体阻断ＥＬＩＳＡ检测ＳＰＦ猪与非ＳＰＦ猪肺炎霉形体抗体的比较严彩红刘志南（北京市ＳＰＦ猪育种管理中心１０００９５）猪霉形体肺炎是由猪肺炎霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）引起的一种慢性呼吸道传染病，带菌猪是主要传染源。...     

猪源弓形虫强毒株膜蛋白的SDS－PAGE和免疫印迹

猪源弓形虫强毒株膜蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫印迹王一成，张雪娟，黄熙照（浙江省农业科学院畜牧兽医研究所杭州３１００２１）自Ｈａｎｄｍａｎ（１９８０）首次进行弓形虫膜抗原研究以来，已有许多有关弓形虫膜抗原的鉴定和分离的报道（Ｓｈａｒｍａ１９８３）。但...     

用阻断酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎病毒抗体和猪呼吸道冠状病毒抗体

用阻断酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎病毒抗体和猪呼吸道冠状病毒抗体张净夏谦高晓燕王巧全韩国珍（上海动植物检疫局２０００３２）猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）是引起仔猪肠道疾病的冠状病毒，仔猪感染后主要表现为呕吐、水样腹泻乃至脱水，２周龄仔猪感染后死...     

应用地高辛探针诊断猪细小病毒病

利用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ）标记的ＰＵＰ重组质粒探针，分别对７株猪细小病毒（ＰＰＶ）分离毒及ＰＰＶＢＭ１株细胞培养物的ＤＮＡ抽提物进行斑点杂交，结果均为阳性，而对照的猪瘟病毒、伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）、乙型脑炎病毒及ＰＫ１５细胞为阴性；对７份ＰＰＶ自然感染病料进行处理，杂交结果为阳性反应，对照健康猪组织、猪瘟病料、猪伪狂犬病病料则为阴性。     

猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

为建立快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的血清学方法,本研究以原核表达的猪流行性腹泻病毒AH2012株N蛋白为包被抗原,通过条件优化建立了一种快速的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。利用该ELISA检测猪流行性腹泻病毒血清时为阳性,而与猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、口蹄疫病毒,猪圆环病毒2型、猪呼吸道冠状病毒的阳性血清均无交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5.55%;该方法与中和试验检测结果总符合率为88.75%。本研究建立的方法可以应用于我国猪流行性腹泻病毒的诊断、流行病监测以及疫苗研发时抗体水平的检测,为该病的防控提供一种有效的检测工具。     

北京地区猪致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定

肠道病原性大肠埃希氏菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）是仔猪腹泻的重要病原，对该菌菌体抗原的鉴定，国内亦有报道。由于Ｅ．ｃｏｌｉ血清型多，变异性大，抗原复杂，给猪大肠杆菌病的预防带来很大困难。为了摸清猪Ｅ．ｃｏｌｉ的血清型，我们选择了５个发病较严重...     

可溶性CD_2分子及其配体的功能研究

检测了绵羊、猪红细胞培养上清中可溶性ＣＤ２配体（ｓＣＤ２Ｌ）和猪血清可溶性ＣＤ２分子（ｓＣＤ２）在猪外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）增殖及对绵羊红细胞破坏中的作用。结果表明，ｓＣＤ２对绵羊红细胞的溶血作用可被ｓＣＤ２Ｌ所抑制，ｓＣＤ２Ｌ的这种抑制作用随其红细胞培养浓度在一定范围内的升高而加强；绵羊红细胞培养上清中ｓＣＤ２Ｌ能单独或辅助植物血凝素Ｐ（ＰＨＡＰ）促进猪ＰＢＭＣ增殖，其作用强弱与红细胞培养浓度密切相关，当绵羊红细胞浓度为１．４×１０９个／ｍＬ时效果最佳。ｓＣＤ２对ｓＣＤ２Ｌ诱导的猪ＰＢＭＣ增殖具有抑制作用，抑制作用随ｓＣＤ２水平上升而增强。     

快速检测鸡新城疫病毒的聚乙二醇单抗夹心ELISA试验的建立和应用

以抗鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验为基础，在酶标抗体（ＨＲＰ－Ｆ＿（２３））稀释液中加入４％（ｗ／ｖ）聚乙二醇（ＰＥＧ）６０００，建立了ＰＥＧ－ＥＬ１５Ａ法，使用此法检测临诊样品，与单抗夹心ＥＬＩＳＡ相比，时间缩短７０分钟且提高了ＯＤ＿（４９０）值，易于识别。结果表明，ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡ法具有实际应用价值。ＰＢＧ能加强抗原－抗体反应的速率和强度，这种效应在固相夹心ＥＬＩＳＡ第二步表现尤其明显。ＰＥＧ的这种非特异性效应对于检测其它抗原或抗体的ＥＬＩＳＡ试验可能具有普遍意义。     

兽医昆虫驱避剂的合成及筛选

以家蝇作为生物模型，对作者自己合成的４０个芳香化合物进行了筛选。结果表明，其中１５个化合物的百分驱避率与ＤＥＥＴ（１ｍｇ／ｃｍ￣２）相似（Ｐ＞０．０５），８个化合物的有效驱避时间较ＤＥＥＴ长（Ｐ＜０．０５）。液体化合物的沸点与活性间无明显相关性（Ｆ＝３．９８，ｄｆ＝３０，Ｐ＜０．０１）。     

诊断B组轮状病毒的三种酶联免疫方法的建立

用从当地分离鉴定的山羊Ｂ组轮状病毒ＫＢ－６３毒株，在剥夺初乳的山羊羔体内传代繁殖病毒，制备抗原，建立了酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）及生物素－亲和素系统酶联免疫吸附试验（ＢＡＢＥＬＩＳＡ）。这三种方法经阻断试验、重复性试验以及交叉试验表明，其特异性、重复性好。以双盲法将此三种方法与对流免疫电泳法（ＣＩＥ）和聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ＰＡＧＥ）作了对比研究，表明此三种方法均较ＣＩＥ和ＰＡＧＥ法敏感。用这三种方法对成人、婴儿、绵羊羔、山羊羔、仔猪的１２０份腹泻粪样（包括实验室接种材料）进行检测，三种方法的检出率分别为１６．７％、１８．３％、２５％，而ＣＩＥ和ＰＡＧＥ的检出率分别为１２．５％和８％。     

鸡传染性法氏囊病的快速诊断

应用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＦＭ＿１４）及其荧光标记物（ＦＭ＿１４－ＦＩＴＣ），对接种ＩＢＤ疫苗、强毒感染和自然病例鸡组织进行直接荧光抗体试验（ＤＦＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳ－Ａ）和琼脂扩散试验（ＡＧＰ）三种检测方法的比较。结果表明，鸡接种疫苗后１０天内ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ均呈阳性反应，而ＡＧＰ只在接种后６～８天的样品中检出抗原。２２例人工感染鸡和４０例自然发病鸡组织的检测结果表明，ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的敏感性基本一致，且高于ＡＧＰ，它们的整鸡阳性率分别为９６．８％、９５．２％和３８．７％；所有的ＡＧＰ阳性标本Ｄｏｔ－ＥＬＩ－ＳＡ和ＤＦＡ均为阳性，后两种方法的符合率为８７％。９６批次（被检鸡群达３８７００头份）野外送检病例之脾、肺、肾和法氏囊组织切片ＤＦＡ阳性率分别为４０％，１１％、１０％和８８％，而总阳性率则为９５％。     

猪水泡病病毒抗独特型抗体的研究──Ab_2的免疫原性及在诊断中的应用试验

用猪水泡病病毒（ＳＶＤＶ）抗独特型抗体（Ａｂ_２）２Ｂ_６─Ａｂ_２和４Ｈ_９─Ａｂ_２分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备ＳＶＤＶ抗─Ａｂ_２（Ａｂ_３），通过ＥＬＩＳＡ、正向间接血凝试验（ＰＨＡ）、反向被动血凝抑制试验（ＲＰＨＩ）和细胞中和试验结果表明，Ａｂ_３为特异性的抗ＳＶＤＶ中和抗体。提示ＳＶＤＶＡｂ_２能模拟ＳＶＤＶ抗原的中和表位，在实验动物中具有类似ＳＶＤＶ的免疫原性。ＳＶＤＶＡｂ_２抑制ＥＬＩＳＡ结果表明，ＳＶＤＶＡｂ_２可作为一种生物探针，检测猪血清中抗ＳＶＤＶ抗体。     

鸡传染性法氏囊病病毒的提纯和鉴定

取鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）患鸡的法氏囊病料经氟利昂作用去除杂蛋白，并经甘油一酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化；细胞适应毒在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上出现明显细胞病变后冻融、ＰＥＧ沉淀纯化。电镜观察、吸光庆测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）的结果表明，得到了完整形态的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。     

双峰驼精清蛋白图谱及分子量的测定

采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）观察了双峰驼精清及其对照组牛、羊、猪精清电泳蛋白图谱，测定了各蛋白组份的分子量。结果表明，双峰驼精清在分子量７２３９０～１２８８１Ｄ间形成１７条蛋白区带，在７２３９０～４３１７７Ｄ间，与牛、羊、猪精清蛋白图谱相似；但在较小分子量中，在分子量为４０６８５，２０８４４及１５６９３．３Ｄ的三条蛋白区带处，有与牛精清蛋白位置上相近的蛋白区带，但含量及分子量尚有差异。