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微滴式数字PCR技术用于生物样品种属鉴定和绝对定量 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 运用微滴式数字PCR技术进行生物样品的种属鉴定和绝对定量.方法 选择人mtDNA两个编码基因ND4和16S rRNA,设计特异性引物与探针,用人来源及常见动物样本验证种属特异性,再用重组质粒和2组共16份人来源生物检材,倍比稀释.使用微滴式数字PCR技术进行种属检验和绝对定量,验证其灵敏度和稳定性.结果 人重组质粒FAM (ND4)可进行人来源样品的检测,其检测结果与各级稀释梯度基本吻合,微滴式数字PCR技术可以检测出反应体系中低至单拷贝的DNA.结论 微滴式数字PCR技术可以进行生物样品的种属鉴定和绝对定量,并具有很高的灵敏度和特异性,可应用于日常法医物证检验. 相似文献
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目的应用Ion Torrent PGM~(TM)测序系统对人线粒体DNA(mitochondria DNA,mtDNA)全序列进行分析检测,研究不同组织间mt DNA序列差异情况。方法通过法医尸体检验采集6名无关个体的组织样本,包括胸腔血液、头发、肋软骨、指甲、骨骼肌和口腔上皮。使用4对引物对线粒体全序列进行扩增,应用Ion Shear~(TM)Plus Reagents试剂盒和Ion Plus Fragment Library试剂盒等构建文库,并在Ion Torrent PGM~(TM)测序系统上进行线粒体基因组全序列测序,并针对异质性位点和在HVⅠ区域突变位点,进行Sanger测序验证。结果所有样本的全基因组mtDNA都扩增成功,6名无关个体分属于6种不同的单倍型,同一个体不同组织之间mtDNA存在异质性差异。异质性位点和HVⅠ区域突变位点采用Sanger测序结果均得到验证。通过Kappa统计方法进行一致性检验后发现,相同个体不同组织的mtDNA序列检验结果仍具有较好的一致性。结论本研究所采用的人线粒体基因组全序列的测序检验方法,可以检测出同一个体不同组织间mtDNA的异质性差异,该差异具有较高的一致性,该结果对mtDNA在法庭科学中的应用具有指导作用。 相似文献
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目的探讨Ion Torrent PGMTM系统用于孕妇外周血血浆中胎儿游离DNA的Y-STR检测的可行性。方法采集8例孕晚期(38周)和8例孕中期(12周)的无关孕妇外周血血浆,提取胎儿游离DNA,对DYS390、DYS391、DYS393、DYS438、DYS437、DYS456、DYS635共7个基因座进行复合扩增,在Ion Torrent PGM^(TM)系统进行Y-STR测序分析和毛细管电泳分析,并将两者结果进行比较。结果在分娩男性胎儿的孕晚期及中期孕妇血浆中均检测到Y-STR片段,测序检测得出的基因座比毛细管电泳检测得出的多,且与分娩胎儿的Y-STR基因型相一致。结论 Ion Torrent PGMTM系统用于孕妇外周血血浆胎儿游离DNA的Y-STR检测,具有高灵敏度、高通量的特点,且有较好的法医学应用价值。 相似文献
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[本刊讯]由中国行政管理学会和同济大学联合主办、同济大学经济与管理学院承办的“2005中国公共管理变革:理论与实践”研讨会,于2005 年7月2-3日在上海锦江饭店召开。这次研讨会坚持理论联系实际的原则和百家争鸣的会风,对我国深化行政管理体制改革的思路和战略, 公共管理创新的理论和实践,进行了交流。会议论文和代表发言主要围绕建设服务型政府的理论与体系,公 相似文献
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“上访”不是一件好事,但在全国各地每天都奔走着的上访者中,的确有一些是在为公众的利益奔走呼号的。本文中的三名“上访代表”,几年间不惜冒着难以预测的政治风险和经济风险,顶风冒雪,四处奔波,吃苦受累,在刚刚为全厂近百名“一刀切”职工讨回149万元的经济补偿时,孰料却被几 相似文献
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西北平原 《Women of China(中文海外版)》2001,(11)
背景:吉林省白山市一个14个月的男童周成汉,因患“小儿腹泻”医院给他静脉注射了6岁以下儿童禁止使用的硫酸庆大霉素,而且计量过大,造成“感音神经性双耳极度耳聋。”经吉林省医疗事故技术鉴定委员会鉴定:医院“构成二级乙等医疗技术事故”,白山市中级人民法院也做出了“属四级残”的法医鉴定。 相似文献
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