丹皮酚泡囊乳膏的制备及其体外透皮吸收考察

目的 以泡囊为载体制备丹皮酚乳膏，优化丹皮酚乳膏的制备工艺及制备处方，并考察体外透皮吸收情况。方法 用乙醇注入法制备丹皮酚泡囊；用乳化法制备丹皮酚乳膏；应用控制变量法优化制备工艺；采用正交设计优化制备处方；并采用TP-6型透皮扩散实验仪，以大鼠腹部离体皮肤作为渗透屏障，通过高效液相色谱法测定药物的累计渗透量来考察丹皮酚乳膏体外透皮吸收情况。结果 基于丹皮酚泡囊制得的乳膏在12 h和24 h的累积渗透量分别是丹皮酚原料药的1.1倍和1.2倍，在24 h时皮内药物滞留量是丹皮酚原料药乳膏的1.26倍。结论 基于丹皮酚泡囊制得的乳膏在有效期内各时间段的体外透皮吸收高于原料药乳膏，且丹皮酚泡囊乳膏的皮内滞留量明显高于丹皮酚原料药乳膏。     

HPLC测定复方丹皮酚凝胶中丹皮酚含量

目的:建立复方丹皮酚凝胶中丹皮酚的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为SHIMADZU VP-ODS(4.6 mm×150 mm, μm),流动相为甲醇-水(50∶50),检测波长为274 nm.结果:丹皮酚进样量为0.05～0.30 μg时呈良好的线性关系(r =0.999 8).平均回收率为100%,SD为0.87%(n =5).结论:PLC法可用于复方丹皮酚凝胶的质量控制.     

丹皮酚对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢及自噬的影响

目的 探讨丹皮酚（Paeonol,Pae）对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢及自噬的影响,为揭示Pae抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）早期病变的作用机制提供依据。方法 采用维生素D2及高脂饲料联合应用法复制大鼠高脂血症模型,将大鼠分成Pae高剂量（300 mg/kg）、中剂量（150 mg/kg）、低剂量（75 mg/kg）组,雷帕霉素组（0.2 mg/kg）,阿托伐他汀组（5 mg/kg）,分别每天灌胃一次,连续6周,模型组和正常组给予等容量溶媒灌胃。采用全自动生化分析仪检测血脂和肝脂水平,光镜下对肝脏脂肪变性程度进行评分,电镜下观察自噬小体,免疫组织化学法观察肝脏中自噬相关因子微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ型（microtubule-associated protein 1 light 3, type 2,LC3Ⅱ）、p62及过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ）的表达。结果 Pae可以降低血清和肝脏中甘油三酯、总胆固醇水平及肝系数,减轻肝脏脂肪变性程度,减少脂滴数量,促进自噬小体的产生,上调肝细胞中LC3Ⅱ、PPARγ表达,下调p62表达。结论 Pae可以促进脂质代谢并升高肝脏自噬小体形成及相关因子表达。     

基于STAT-3/NF-κB/ICAM-1通路探讨丹皮酚缓解小鼠结肠炎相关性结直肠癌的作用机制

目的 从STAT-3/NF-κB/ICAM-1信号通路探讨丹皮酚缓解小鼠结肠"炎—癌转化"的机制.方法 构建结肠"炎—癌转化"小鼠模型,ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素10(inter-leukin-10,IL-10)水平,Western blot法和免疫组织化学染色法检测小鼠结肠组织内信号转导及转录激活因子3(signal transdncers and activators of transduction-3,STAT-3)、核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)p65和细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白表达水平.结果 光学显微镜下可见丹皮酚治疗组小鼠结肠的炎症细胞浸润、腺体紊乱等病变明显减轻.丹皮酚可显著降低肿瘤数量、肿瘤质量及脾脏指数(P<0.05),显著降低模型小鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平(P<0.05),显著升高血清IL-10水平(P<0.05),显著降低小鼠结肠STAT-3、NF-κB p65和ICAM-1的表达水平(P<0.05),其中以丹皮酚中剂量组的作用为优(P<0.05).结论 丹皮酚能有效缓解小鼠溃疡性结肠炎的炎症反应,其作用机制与调节STAT-3/NF-κB/ICAM-1信号通路有关.     

丹皮酚抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞TNF-α 释放对共培养体系中血管平滑肌细胞凋亡及 p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察丹皮酚（Paeonol，Pae）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）损伤的大鼠血管内皮细胞（vascular endothelial cells，VECs）炎性因子释放及对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）凋亡的影响，阐明Pae抑制VSMCs凋亡是否通过影响VECs释放的炎性因子调控p38 MAPK信号通路。方法 组织块预消化贴壁法原代培养VECs和VSMCs；Transwell小室建立VSMCs和VECs共培养体系；LPS诱导VECs损伤；MTT方法检测细胞存活率；ELISA检测VECs分泌肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）的水平；流式细胞仪检测VSMCs凋亡率；Western blotting检测VSMCs中p38 MAPK信号通路及凋亡相关蛋白表达。结果 与正常对照组比较，LPS可显著提高VECs分泌的TNF-α水平（P＜0.05），明显升高共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P<0.05），显著提高VSMCs凋亡率（P<0.05）；与LPS刺激组比较，Pae可显著抑制VECs分泌的TNF-α（P＜0.05），明显降低共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P＜0.05），显著降低VSMCs凋亡率（P＜0.05）。结论 Pae可抑制VECs释放TNF-α，从而抑制p38 MAPK信号通路，进而减少VSMCs凋亡。     

基于CD40/NF-κB通路丹皮酚调控miR-145抑制小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞炎症反应

目的 观察丹皮酚基于白细胞分化抗原CD40/核转录因子-κB(clusters of differentitation 40/nuclear factor kappa-B,CD40/NF-κB)通路调控miR-145抑制小鼠动脉粥样硬化血管巨噬细胞源性泡沫细胞炎症反应的作用机制.方法 高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠20...     

丹皮酚对高脂血清诱导的大鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用及其黏附功能的影响

目的观察丹皮酚（Paeonal，Pae）对高脂血清诱导的大鼠单核细胞（mononuclear cell，MC）与大鼠主动脉内皮细胞（rat aortic endothelial cells，RAECs）黏附的影响及对RAECs损伤的保护作用。方法高脂乳剂灌胃大鼠并制备高脂血清；组织块预消化贴壁法培养RAECs；淋巴细胞分离液分离MC；孟加拉玫瑰红活细胞染色法测定MC与RAECs的黏附功能；甲基噻唑基四唑比色法以及台盼蓝死细胞染色法检测Pae对高脂血清诱导的RAECs损伤的保护作用。结果30～70ml／L高脂血清呈剂量依赖性地诱导MC与RAECs的黏附，50ml／L时促进MC与RAECs黏附达最大值；高脂血清与RAECs共育6h即可明显促进黏附作用，24h时达最大诱导效应。Pae在浓度为15～240μmol／L时，呈剂量依赖性地抑制高脂血清诱导的黏附作用；240μmol／L孵育24h时抑制作用最明显；Pae在30，60，120μmol／L浓度时，对高脂血清损伤的大鼠RAECs有明显的保护作用。结论Pae对高脂血清诱导的大鼠MC与RAECs黏附功能有抑制效应，对高脂血清损伤的大鼠RAECs有明显的保护作用。