P33.6位点扩增片段长度多态性的法医学应用

P33．6位点扩增片段长度多态性（Amp－FLP）在中国人群中有很高的识别能力，本实验室继对中国人P33．6位点Amp，FLP[1]报道之后，又对血液、血斑、精液、精斑、混合斑、毛发、唾液等生物检材进行P33．6位点的分析，获得了令人满意的结果。将该方法用于案件的检验，在破案中发挥了重要作用。材料与方法一、实验材料1．收集自愿者提供的精液、精斑和精液与阴道分泌物的混合斑各20份，并同时收集供者血液。所有样品均-4℃保存。2．收集自愿者提供的毛发（20根）、唾液（1份）和血斑（10份），室温保存。二、实验方法1．检材样品的处理（1…     

50例强奸案混合斑中精子ABO基因分型

自 1990年Yamamoto[1] 报道了ABO基因的核苷酸序列以来 ,国内外学者们致力于建立ABO基因型的测定方法 ,如PCR RFLP法[2 ] 、PCR 直接测序[3] 、PCR SSCP法[4 ] 等。但由于ABO基因分型操作烦琐 ,个体识别率低 ,很少被应用于法庭科学实践。本研究对HerrinG[5] 方法进行改良 ,运用PCR RFLP技术 ,检测 5 0例经STR认定的强奸案混合斑中的精子ABO基因型和犯罪嫌疑人血痕的ABO基因型 ,并探讨ABO基因分型在实际检案中的可信性及应用价值。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　样本　 5 0例强奸案中的混合斑检材和案犯血痕 (北京市公安…     

PCR-RFLP技术鉴定ABO基因型的法医学应用研究

目的 建立 PCR－ RFLP、非变性 PAG胶垂直电泳和银染技术进行 ABO基因分型的方法体系,并对 200名广东汉族人群 ABO基因型频率进行了调查。方法 用 Chelex－ 100和酚、氯仿抽提法处理样本, PCR扩增后用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳和银染技术检测分型。结果 ABO位点特异性扩增片段长度为 175bp～ 210bp, 6种基因型频率分布为 0.025 0～ 0.430 0,杂合度 H值为 0.516 2,个体识别力 DP值为 0.711 1。结论 该方法可成功运用于血液、血痕、精斑、毛发、骨组织和混合斑等检材的个体识别及亲权鉴定的检验。     

PCR－RFLP技术鉴定ABO基因型的法医学应用研究

目的建立PCR－RFLP、非变性PAG胶垂直电泳和银染技术进行ABO基因分型的方法体系,并对200名广东汉族人群ABO基因型频率进行了调查。方法用Chelex－100和酚、氯仿抽提法处理样本,PCR扩增后用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳和银染技术检测分型。结果ABO位点特异性扩增片段长度为175bp～210bp,6种基因型频率分布为0.0250～0.4300,杂合度H值为0.5162,个体识别力DP值为0.7111。结论该方法可成功运用于血液、血痕、精斑、毛发、骨组织和混合斑等检材的个体识别及亲权鉴定的检验。     

ABO基因型检验及其法医学应用研究

目的采用ＰＣＲ技术对ＡＢＯ血型系统进行基因型检验。方法选择最佳扩增条件进行四引物复合扩增,用限制性内切酶ＫｐｎＩ和ＡｌｕＩ分别酶解扩增产物,电泳分离、银染显色法检验ＡＢＯ基因型。结果对２７０例血斑、２０例混合斑、２０根毛发（有毛囊）、１２份唾液斑等不同的生物检材进行了分型,与血清学方法检验结果相符。结论该方法能够应用于法医学的检验     

法医SNP复合检测体系的构建及应用

目的构建48-SNP位点复合检测体系,用于个体识别、性别鉴定、ABO基因分型。方法采集225份无关个体样本(血斑及口腔拭子),18份案例样本(不同组织及体液斑),选择43个常染色体位点、4个ABO基因位点和1个性别鉴定位点,根据单碱基延伸技术通过GenomeLabTMSNPstream基因分型系统进行SNP分型;并检测体系灵敏度、同一个体不同组织同一性及模拟腐败检材。结果 48-SNP体系分型结果与测序结果的一致性为100%,最小DNA检出量为0.25ng,不同组织来源样本检测同一性很好;利用该体系检测225名无关汉族个体,所有位点均符合Hardy-Weinberg平衡,整个系统的随机匹配概率为9.4×10-18,累积非父排除率(CEP)为0.999 788,累积个体识别率大于0.999 999 999 999 999 99。结论本文48-SNP体系能同时进行个体识别、ABO基因分型和性别鉴定,可以作为现有STR检验体系的补充。     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

ABO基因分型及其在法医学中的应用

为建立一种ABO血型系统基因分型方法，采用PCR-RFLP技术，成功地将ABO系统区分为AA，AO，AB，OO，BB，BO六种基因型。对240名中国汉族无关个体血样的ABO（基因型频率调查结果表明，6种基因型的频率分布为0．0125～0．3834，符合Hardy－Weinbeng遗传平衡法则（P＞0．1），其DP值为0．8161。家系分析表明，亲代a、b、o基因传递遵守孟德尔遗传规律。对法医学中常见的血痕、混合斑、骨组织及毛发根部等生物样品进行检测，均能准确判定ABO基因型，并可在实际案件鉴定中应用。     

ABO基因型检验及其法医学应用研究

目的 采用ＰＣＲ技术对ＡＢＯ血型系统进行基因型检验。方法 选择最佳扩增条件进行四引物复合扩增,用限制性内切酶ＫｐｎＩ和ＡｌｕＩ分别酶解扩增产物,电泳分离,银染显色法检测ＡＢＯ基因型。结果 对２７０例血斑,２０例混合斑,２０根毛发,１２份唾液斑等不同的生物检材进行了分型,与血清学方法检验结果相符。结论 该方法能够应用于法医学的检验。     

5 μl PCR反应体系的建立

PCR技术最大的优点是使目的DNA片段成百上千万倍增加,尤其适合于微量检材检验,该技术已成为常规法医物证检验技术。实际检案中,多余的PCR扩增产物没有用处,更是为了节约成本,我们微量化了ProfilerPlus试剂盒反应体系至５μl,报道如下,供参考。１材料与方法１．１材料送检案件滤纸提取血样１０份,混合斑检材为花短内裤１条,卫生纸２份,阴道擦拭纱布２份,地上提取精斑１份,镜下均检见人精子。所用试剂、仪器为：ProfilerPlus试剂盒;９６００型PCR仪;３１０型遗传分析仪。１．２方法（１）用Chelex１００法提取１０份血斑…     

生物素掺入反向杂交法在法医学中应用的研究

建立了一套快速、准确检测人类 HLA－ DQA基因的反向杂交检测技术,可准确判定 HLA－ DQA基因位点的 6个等位基因即 0101、 0102、 0103、 0201、 0301、 0401。调查了中国北方汉族人群中 200例无关个体的 HLA－ DQA基因频率及基因型的频率分布,杂合度 (H)为 0.75,个体识别能力 (DP)为 0.928。采用生物素直接掺入 PCR扩增的方法, 1ng的 DNA样品即可准确判型。对血液、血斑、精斑、精液与阴道液的混合斑、肌肉组织等检材进行检测,效果良好。在刑事案件及亲子关系鉴定中应用,准确地判定了检材的 HLA－ DQA基因型,为侦察破案提供了科学依据。将此项技术商品化,完成了试剂盒的研制。     

矛盾分泌型精斑检验1例

1案情摘要1995年6月某日晚九时许，周某报称被人强奸．从周某被强奸时所穿的短裤上检出人精斑，笔者用中和法（凝集抑制试验）在斑速处检出B血型物质，确定为B血型精斑，而重大嫌疑人赵某血样呈AB型，似被排除作案可能．然而在对其唾液进行ABO血型检验时，意外发现其唾液中仅检出B型物质，未检出AH物质，与体液ABH物质分泌规律不符，表现为矛盾分泌型．其血型物质与精斑检材中血型物质一致，故不能排除其作案可能．案件经全面调查，最后确认赵某即为本强奸案的犯罪分子，且赵某对作案经过供认不讳．2讨论通常根据体液（唾液、精液等）…     

限制性组合分析法推定男女混合斑中个体分型初探

正混合斑是指包含两名或两名以上个体的混合生物检材,在多数情况下,此类检材的DNA分型往往表现为两人或多人的混合分型,使结果分析较为复杂[1]。本文尝试采用2005年国际法医遗传学会(ISFG)推荐的关于混合斑结果分析中的计算方法对混合斑案件中单一个体DNA分型结果进行分析。1材料与方法1.1样本及检验样本由公安部物证鉴定中心提供强奸案件中床单上混合斑检材1份,为日常检案积累,根据案情调查证实该检材系混合斑。DNA检验采用Chelex法提取上述检材DNA,经DNATyperTM15 plus试剂盒扩增后在ABI 3130遗     

限制性组合分析法推定男女混合斑中个体分型初探

混合斑是指包含两私或两名以上个体的混合生物检材，红多数情况下，此类检材的DNA分型往往表现为两人或多人的混合分型，使结果分析较为复杂[1]．本义尝试采川2005年国际法医遗传学会（ISFG）推荐的关于混合斑结果分析中的计算方法对混合斑案件中单一个体DNA分型结果进行分析。     

HUMCYAR04基因座扩增片段长度多态性

HUMCYAR04基因座是Holly等人[1]报道的一个短串联重复序列（STR）基因座。笔者根据本实验室的条件，以中国人为研究对象，进行了此基因座的扩增和频率调查，并用于法医物证常见的血痕、混合斑的检验，取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1．血液取自昆明及玉溪地区191名无关汉族个体的静脉血，构椽酸钠抗凝；2混合斑及组织决、血痕血样实验室办案中积累；3．家系血样自愿者提供；4HUMCYAR04序列[1]：5’GGTAAGCAGGTACTTAGTTAGCTAC－3’；5’－GTTACAGTGAGCCAAGGTCGTGAG－3’。由北京赛百盛（美国）生物工…     

D20S161和D8S384两个基因座在法医学中的应用

评估D2 0S16 1和D8S384两个基因座在法医学中的应用价值。用自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒 ,对人血、人精液、人唾液、动物血、人血与动物血的混合检材和人血痕、人精液斑、人唾液斑、动物血痕、人血与动物血的混合斑痕检材 ,以及陈旧血痕检材进行检测分型 ,并用这两个基因座PCR引物序列与DNA数据库进行联网对比分析。自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒能对人血、人精液、人唾液、人血与动物血的混合检材分型 ,而动物血没有PCR产物 ;自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒能对人血痕、人精斑、人唾液斑和人血与动物血的混合斑痕检材正确分型 ,而动物血痕没有PCR产物 ;斑痕检材分型结果与对应体液检材分型结果无差异 ;5 0份陈旧血痕检材全部获得阳性分型结果。DNA数据库联网比较提示 ,D2 0S16 1和D8S384基因座引物除了能与各自的模板序列发生特异性扩增外 ,理论上不能与DNA数据库中 6 0 6 36 4种已知序列产生PCR产物。D2 0S16 1和D8S384两个基因座具有高度的种属特异性 ,抗污染能力强 ,不易受降解的影响 ,是解决法医现场生物检材个人识别和亲子鉴定的理想手段     

微量生物检材常规初检后再行PCR检验的方法

在实际检案中，经常遇到案发现场可获取的生物检材量微，在进行必要的种属检验、精斑确证实验、ABO血型检验等常规物证初检后，便无多余的生物检材移送DNA实验室进一步做法医DNA检验。因此，笔者通过对检案中遇到的上述微量物证检材的再行处理利用，在本实验室条件下，对其进行了TH０１、HUMACTBP２、AluVpA、DIS８０等位点的DNA－PCR分析，获得了良好的效果。使其在实际办案中更充分地发挥了证据作用，报告如下。１材料与方法检案中已经种属或ABO血型检验后的血痕、唾液斑（如烟蒂外层纸）浸泡凹板，加入３００μl去离子水，…     

应用抗人精液单克隆抗体检验混合斑中精液成份的ABH血型物质

用本文报道的方法检测了123份混合斑检材（新鲜混合斑60份，陈旧混合斑63份），对保存在一年内的混合斑中精液成份中的血型物质检出率可达100％。     

pMCT118位点扩增片段长度多态性及其应用

本文报道了对98例中国人 pMCT118位点扩增片段长度多态性的等位基因频率调查及有关法医生物物证检验问题的研究。用多聚酶链反应、小型聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法,在12h 内检测低至1ngDNA 的 pMCT118位点扩增片段长度多态性。已发现22个等位基因,大小分布在340～780bp 之间,基因频率为0.005～0.3,杂合度为79%。对6个家系22名相关个体的分析符合孟德尔定律。探讨了微量检材样品制备和对混合斑、单根毛囊、唾液等生物检材的法医应用。对20个实际案例进行了检验。     

无精斑证据性犯罪案件其他物证DNA检验(附6例报告)

在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验。但由于种种因素的影响 ,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性 ,不能为性犯罪提供有力证据。笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证 (如血迹、唾液斑、阴毛等 ) ,通过作ＤＮＡ检验 ,为案件侦破提供了重要证据。现报告如下 :一、材料自我室自 1 997年 1月～ 1 999年 1 2月受理的ＰＣＲ检验强奸案件 6例 ,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等。二、方法1 .ＤＮＡ提取 :血痕、唾液、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛采用ｃｈｅｌｅ - 1 0 0…