PCR-RFLP检测线粒体DNAD-环多态性

用PCR方法,对174名无关中国人汉族个体线粒体DNA(mtDNA)的16081～16545bp区域进行扩增,产物经Hae、Rsa限制性内切酶(RFLP)分析,分别发现了10种表现型,个人识别率分别为0.8174和0.8675,为毛发、指甲等无核DNA生物学检材的检验提供了一条便捷的途径。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　样品　无关中国汉族个体静脉抗凝血134份,制成血痕;40名无关汉族个体毛发毛干各2根及其他体毛、指甲少许;新鲜及腐败尸体上提取的同一个体不同的组织块;猪毛、狗毛、牛毛、马毛等哺乳动物毛毛干各两根。1.1.2　主要试剂　TaqDNA聚合酶(华美公司);Hae、Rs…     

脱落毛发及毛干DNA的STR分型研究

目的探讨脱落毛发及毛干细胞核DNA提取、含量和STR分型问题。方法对脱落毛发或毛干进行DNA提取和定量,使用低扩增体系、增加循环次数和多次平行扩增等方法扩增DNA样本,采用叠加比较的方法分析STR分型。结果15cm脱落毛发样品DNA含量大于0．3ng的样品占52．8％,STR分型成功率为55．6％;15cm毛干样品DNA含量大于0．3ng的样品占30．6％,STR分型成功率为25％。结论采用增加循环次数、多次平行扩增等LCN—STR分型方法和Mini—STR试剂盒有助于脱落毛发及毛千的STR基因座分型获得。     

人体脂肪组织DNA提取方法的比较

在法医物证学检验中，进行DNA分型的检材多为血液（痕）、毛发、指甲、肌肉组织及骨骼等，极少选择脂肪组织。脂肪组织采用常规方法提取模板DNA效果不佳，本文通过对不同提取方法进行比较，以探索可适用于脂肪组织DNA提取的方法。     

1例土埋2年半尸体的指甲DNA检验

在日常检案中，DNA检验人员通常根据尸体的腐败程度来决定提取那种检材以及采取何种方法得到足够的遗传信息。据高俊薇等报道。当检验腐败尸体的心血、肌肉等组织无法得到STR分型结果时，拔取其指甲进行STR分型往往能得到满意的效果。指甲检验成功率与保存环境有关．土埋1个月以上尸体的指甲DNA经有机法提取成功率不高。本例在处理一起土埋2年半、完全白骨化的尸体时，以指甲作为检验对象，分别以有机法、硅珠法和磁珠法对经Chelex-100提取后的模板DNA进行纯化浓缩。并对其效果进行比较。     

用PCR扩增X-Y-特异片段性别鉴定的研究

采用5%Chelex-100处理方法提取 DNA,用 PCR 扩增 Amelogenin 基因片段检测血痕和毛根的性别。扩增一个样品只需1/10体积3mm~2血痕 Chelex-100处理液或1/10体积一根毛发 Chelex-100处理液(含模板 DNA)。100例血液样品结果显示,在男性可同时显现977bpX 特异片段和788bpY 特异片段,而在女性只观察到977bp X 特异片段,该方法用于性别鉴定可靠、灵敏、方便。     

指甲擦拭物Y-STR检验在女性被杀案件中的应用

1案例 本市发生一起女性被害案件。现场遭到很大程度的破坏．通过混合斑等常规生物检材检测．均未得到有效证据。技术人员遂提取了死者指甲进行DNA检验。用双蒸水浸润的纱线擦拭被害人指甲内侧尖部．放入1．5mL离心管中．采用Chelex法提取检材基因组DNA，ldentifilerTM试剂盒（美国AB公司）复合扩增检测，结果在被害人的指甲擦拭物中检出含有微量     

mtDNA测序技术在法医检案中的应用

<正> 在法医DNA检验中,高度腐败甚至白骨化的尸体,软组织已遭到严重破坏,往往失去核DNA检验应具备的条件。这种情况下,对硬组织,如毛发、骨骼、指甲等进行mtDNA序列分析,并应用于法医个体识别及亲缘认定则具有独特的优势[1]。本文作者对检案中积累的毛发及腐败尸体的骨骼、指甲、血痕等进行mtDNA测序研究,并应用于案件鉴定,取得了满意的效果。     

Chelex-100提取生物检材DNA实时PCR定量研究

目的研究Chelex-100法提取的生物检材DNA用量与复合STR分型成功率的关系。方法113份各种生物检材采用Chelex-100法提取DNA，应用Quantifiler人类DNA定量试剂盒在ABI 7500荧光定量PCR仪上进行实时PCR定量，同时用Identifiler复合扩增系统在ABI 3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果各种生物检材提取的DNA浓度分别为：37份滤纸、纱布血痕0．042～5．28ng／μl，16份口腔拭子1．15—4．21ng／μl，18份烟头0．016～1．46ng／μl，10份肋软骨0．531—14．40ng／μl，8份肌肉5．75—24．80ng／μl，7份指甲0．788—11．50ng／μl，17份精斑0．79～99．50ng／μl。在建立的8μl扩增体系中，根据上述结果，调整用于复合STR扩增的DNA模板量在0．5—3ng之间，大部分样品可获得完全的STR分型。结论Chelex-100法提取的检材DNA模板用量在0．5—3ng之间可得到有效STR扩增，浓度为0．5ng／μl以上的DNA样品，用小体积模板（1μl）比大体积（3μl）模板扩增效果好。     

1例土埋2年半尸体的指甲DNA检验

在日常检案中,DNA检验人员通常根据尸体的腐败程度来决定提取那种检材以及采取何种方法得到足够的遗传信息。据高俊薇等[1]报道,当检验腐败尸体的心血、肌肉等组织无法得到STR分型结果时,拔取其指甲进行STR分型往往能得到满意的效果。指甲检验成功率与保存环境有关,土埋1个月以上尸体的指甲DNA经有机法提取成功率不高。本例在处理一起土埋2年半、完全白骨化的尸体时,以指甲作为检验对象,分别以有机法、硅珠法和磁珠法对经Chelex-100提取后的模板DNA进行纯化浓缩,并对其效果进行比较。一、样本来源2005年7月中旬,在距本市某内陆河入海…     

P33.6位点扩增片段长度多态性的法医学应用

P33．6位点扩增片段长度多态性（Amp－FLP）在中国人群中有很高的识别能力，本实验室继对中国人P33．6位点Amp，FLP[1]报道之后，又对血液、血斑、精液、精斑、混合斑、毛发、唾液等生物检材进行P33．6位点的分析，获得了令人满意的结果。将该方法用于案件的检验，在破案中发挥了重要作用。材料与方法一、实验材料1．收集自愿者提供的精液、精斑和精液与阴道分泌物的混合斑各20份，并同时收集供者血液。所有样品均-4℃保存。2．收集自愿者提供的毛发（20根）、唾液（1份）和血斑（10份），室温保存。二、实验方法1．检材样品的处理（1…     

一种用于降解DNA样本的性别鉴定方法

目的　建立一种采用PCR技术对降解DNA样本进行性别鉴定的新方法。　方法　采用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置 5～ 15年的男、女血痕标本各 5 0例、毛发各 2 0例、骨骼各 2 0例以及现场提取 5 - - 2 0天的男、女腐败肌肉各 10例标本中提取的降解DNA样本进行扩增。用PAG( 9%T ,3 %C)电泳、银染显带检测扩增产物。　结果　所有样本均得到正确结果 ,男性检材表现为 83bp的Y特异性及 80bp的X特异性 2条谱带 ,而女性检材仅有 1条 80bp的X特异性谱带。　结论　用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便 ,是降解DNA检材性别鉴定十分理想的方法。     

VNTR-P~(33.6)基因座特殊变异1例

在近期受理的1例亲子鉴定案中,发现P33.6基因座的Amp－FI,P变异,现报道如下,供法医同仁们在实际办案中借鉴。l卖＊摘要1999年3月,某男（56岁,医生）和某女（52岁）协同“女儿”张某（女,33岁,干部）来本室做亲子鉴定。2DNA检验2．l检材可疑父亲某男（l号检材）、可疑女儿张某（2号检材）、可疑母亲某女（3号检材）各3mlEDTA抗凝静脉血。2．2DNA提取用酚、氯仿草取法分别从3份静脉血中提取DNATE溶解备检。2．3DNA检验2．3．IVNTR．PCR取l、2‘3号检材DNA样品,分别扩增pMCT“’、P3’‘、apoB三位点,扩增产物用5％T…     

对眉毛ABO血型检验认定肇事车辆一例

1993年，××县境内国道327线发生一起交通事故，肇事车辆逃逸，邢屯村邢氏父子二人当场死亡。法医检验其中一人左眉大部缺失。经侦察，发现一辆可疑肇事车辆，在其左前侧竖护板上沾附有数根可疑眉毛，要求鉴定其是否为邢某所留。通过肉眼及镜下观察并与提取的邢尸体眉毛进行对比，发现两者在长度问．9～0．6cm）、色泽、硬度、粗细及毛尖端、毛根瑞形状等方面均很相似。用解离试验测定证明为AB型，与邢某毛发血型一致，为认定肇事车辆提供了依据。对眉毛ABO血型检验认定肇事车辆一例@于佳艳$山东临沂地区公安处!276001@刘玉民$山东临沂地…     

腐败尸体不同组织的DNA扩增效果

<正> 在法医实际检案工作中,经常需对腐败尸体进行DNA鉴定。提取腐败尸体组织进行DNA检验所需的检材,不同检验技术要求不尽相同。为提高腐败检材检出效率,本文作者对从高度腐败尸体上提取的软骨、指甲、肌肉、头皮、血液等进行DNA的提取、荧光标记STR复合扩增技术进行扩增分型,并比较分析了扩增效果,现报道如下。     

单根毛发DNA分型方法的改进

毛发是法医学常用的检材之一,在凶杀、强奸、盗窃等刑事案件中常常作为重要的物证出现,因而寻求简便快速的方法进行毛发DNA分型,是法医物证检验中的一大任务。本研究建立了一种利用单根毛发进行DNA分型的简单快速方法,介绍如下。1材料与方法1.1样本20名志愿者（男、女各10名,）年龄20-35岁,提供的毛发若干根及血样本。     

染色毛干mtDNA不同提取方法的研究

目的为染色毛发线粒体DNA选择最佳的提取方法。方法在5个染发个体中各取5根头发,采用Chelex-100法、有机法、磁珠法、H2O2结合Chelex-100法及Chelex-100结合M icrocon100法等5种不同的提取方法提取染色毛发m tDNA,利用2%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。结果Chelex-100结合M icrocon100方法提取染色毛发扩增m tDNA效果较好,其余方法无扩增产物。毛发的不同部位对扩增结果无影响。结论染色毛发采用恰当的提取方法可以提取到m tDNA模板,为法医日常检案提供帮助。     

PowerPlex21直扩法与磁珠法用于毛发STR检验的比较

目的比较Power Plex21直接扩增法与磁珠提取后扩增法用于带毛囊毛发STR检验的效果。方法带毛囊毛发平均分成2组,每组含拔取毛发20根、自然脱落带毛囊毛发20根,剪取毛囊后1组用Power Plex21试剂盒直接扩增,1组先用磁珠法提取DNA然后扩增Power Plex21试剂盒,扩增产物在3130XL遗传分析仪上进行电泳检测分析。结果拔取毛发直接扩增和磁珠提取后扩增均成功检出全部STR基因型。自然脱落带毛囊毛发直接扩增检出STR基因型的成功率为55%,磁珠提取后扩增检出STR基因型的成功率为25%。结论 Power Plex21直接扩增法比磁珠提取后扩增更适于带毛囊毛发的STR检验。     

一种用于降解DNA样本的性别鉴定方法

目的 建立一种采用PCR技术对降解DNA样本进行性别鉴定的新方法。方法 采用针对amelogenin基因X染色体外显子3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置5－15年的男、女血痕标本各50例、毛发各20例、骨骼各20例以及现场提取5－－20天的男、女腐败肌肉各10例标本中提取的降解DNA样本进行扩增。用PGA（9％T,3％C）电泳、银染显带检测扩增产物。结果 所有样本均得到正确结果,男性检材表现为83bp的Y特异性及80bp的X特异性2条谱带,而女性检材仅有1条80bp的X特异性谱带。结论 用针对amelogenin基因X染色体外显子3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便,是降解DNA检材性别鉴定十分理想的方法。     

指甲DNA的STR分型研究

目的 研究尸体所处环境、指甲DNA提取部位及提取方法对STR分型的影响。方法 对案件中不同条件腐败尸体指甲,使用不同部位、不同体系和时间消化,酚-氯仿法提取指甲核DNA,进行PCR扩增及STR分型。结果 提取指甲甲体、甲根部位均可获得STR分型。结论 指甲是法医检案中一类具有实用价值的检材。     

利用Y-STR特性侦破重大凶杀案1例

1简要案情河南某村庄发生一起重大凶杀案,村民赵某（女,32岁）及6岁女儿张某被人杀死在自己家里,母女俩人均被利器割断咽喉致死。经法医检验母女俩人无性侵犯,身上有明显搏斗痕迹。技术人员勘查现场后提取了现场血迹,赵某、张某血样及十指指甲,送检DNA检验。2 DNA检验及结果严格按照GA/T383-2002《法庭科学DNA检验规范》标准操作。（1）对现场血迹进行潜血试验及种属试验后确定全部为人血。