犯罪现场尿液DNA检验1例

本文作者对1例犯罪现场案犯遗留的尿液成功进行了DNA检验,现报导如下。1案例资料2005年8月至10月,杭州某区发生系列性盗窃案,多家公司财务室被盗。其中1起盗窃案犯罪现场的光滑磁砖地面上遗留有案犯尿液,勘察人员用医用一次性针筒抽取尿液送检。2005年12月抓获两名犯罪嫌疑人。DNA提取现场尿液混匀后吸取4m l分装于1.5m l Eppendorf管中,高速离心5m in后弃上清,加DDW涡旋震荡洗涤,高速离心5m in后弃上清,重复洗涤1次。将所有沉渣收集于一管内,取2μl涂片染色显微镜镜检检见少量脱落细胞。采用Chelex-100法(加入10%Chelex-100溶液500μl…     

特殊载体上人体细胞DNA检验2例

1案例资料案例1侯某(女,中学生),2002年12月15日晚5时,在放学回家途中遭1名男子强奸。侯某未及时报案,也未保存相关物证检材,给该案侦破带来一定难度。侦查人员在勘查时提取了现场遗留牙刷1把,经侯某回忆犯罪分子当时曾用牙刷捅其下身。检验人员用1根约3~4cm的干净纱线蘸取生理盐水,反复擦拭牙刷柄,并用另1根纱线再反复擦拭1次,将2根纱线一并放入1.5m l离心管中,加200μl生理盐水浸泡、振荡洗涤,12 000 r/m in离心,取上清液进行人血种属试验,结果呈阳性;再向管中加1m l无菌纯水,振荡洗涤,再次离心后去上清,5%Chelex-10050μl和PK 10mg/m l…     

3种提取高度腐败检材DNA的方法比较

本文对3种DNA提取方法在高度腐败检材DNA提取中的应用进行了比较,供法医学实践参考。1材料与方法1.1材料3份检材均为尸体肋软骨,其中1号为死后在水里浸泡18天解剖,酒精固定2年的检材,2号检材为死后15天解剖,酒精固定1年的检材,3号检材为死后10天解剖,后酒精固定1月的检材。1.2 DNA提取Chelex-100法[1]3份检材各500mg剪粹,分别加入200μl 5%Chelex-100,10μl PK(10mg/m l),10μlDTT(39mmol/m l二硫苏糖醇),37℃水浴过夜,100℃加热10m in,剧烈震荡,10 000 r/m in离心10m in,上清备用。有机法[2]3份检材各500mg剪粹,分别加入400μl TES…     

尿斑的DNA检验1例

1案件简价2006年1月,南方某市一女子被杀;警方在现场勘查中提取到一件部分被液体浸泡的有色毛衣(经当地鉴定该液体为尿液)。为确定这份尿斑为何人所留,办案单位于半年后将以上检材送检,要求进行DNA鉴定。2检验方法检材为现场提取的毛衣1件。在毛衣被液体浸泡之处(有黄色斑迹)分别剪取2处1cm2大小的斑迹(编号为1、1R)各置于1.5ml空离心管中,加入500μl磁珠裂解液(Promega公司)和20μl PK(5mol/L),56℃保温1h,13000r/min离心3min,吸取上清,移入干净的离心管中,此后依照DNA IQTMsystem进行DNA提取,方法详见试剂盒说明书,最后用20μl的…     

微量PCR反应体系在两种试剂盒中的应用

美国AB I公司的Profiler PlusTM试剂盒和Identifi-lerTM试剂盒在当前法医DNA检案中应用广泛,但价格昂贵。本实验利用5μl体系进行PCR扩增取得满意效果,降低了检验成本。1材料与方法1.1材料法医DNA检案中常规检材,血痕、精斑、烟蒂和毛发(带毛囊)各20份。Profiler PlusTM试剂盒和IdentifilerTM试剂盒(AB I,USA)。1.2方法1.2.1 DNA提取上述检材采用Chelex-100法[1]提取模板DNA。取9mm2血痕加入5%Chelex-100150μl,56℃2h;精斑经两步法视镜检精子量多少酌情加入5%Chelex-100 150~250μl,PK 10μl(2mg/m l),DTT 10μl(1mol/L…     

头盔上附着微量DNA的检验1例

1材料与方法1·1案例某地发生的系列抢劫案中,提取到现场遗留的摩托车头盔1顶,其上未见明显斑迹。1·2方法(1)采用棉签二步法[1]擦拭头盔上与口鼻相对应的内侧部位。(2)剪取擦拭后棉签放入0·5ml Eppendorf管中,加400μl纯水清洗,离心,去上清,保留约20μl液体和沉淀物。(3)加5%Chelex-100 200μl、PK(5mg/ml)10μl,56℃温育1hr。(4)振荡,100℃8min,振荡,13000r/min离心3min。(5)取上清液150μl,采用DNA IQTM系统(Promega Cat.#DC6700)浓缩纯化。(6)在Applied Biosystems公司的9700型Ge-neAmp PCR System上进行10μl体系的Identifi…     

浙江汉族人群15个STR基因座遗传多态性

本文应用PowerPlex 16荧光标记复合扩增系统,对浙江汉族510名无关个体15个STR基因座进行遗传学调查,现报道如下:1材料与方法1.1样本510名浙江汉族无关个体的血样来自浙江全省各地,系本实验室日常检案积累。1.2实验方法所有血样均采用硅珠法提取DNA[1]。参照文献[2]采用10μl扩增反应体系,其中包括:Gold STR 10×Buffer 1μl,Taq Gold DNA聚合酶0.3μl,10×Primer PairM ix 1μl,模板DNA 1μl(DNA量控制在0.5~1ng),用无菌去离子水补足体系,混匀,稍加离心后置AB I 9700型扩增仪中进行扩增。热循环参数为:95℃11m in,96℃1m in,然…     

硅珠法提取DNA在强奸案中的应用

通常情况下进行混合斑中精子DNA的提取采用酚－氯仿法及Chelex－１００法,但仍存在一些缺点。本实验室采用了一种新的方法进行精子DNA的提取,取得了较好的效果。介绍如下：１方法１．１试剂的配制犤１犦１．２操作方法（１）剪取精斑检材各约２cm×２cm,分别加入７５０μlTNE溶液、１０％SDS７．５μl及pk７．５μl（１０mg／ml）于１．５ml离心管中,置３７℃水浴１h。套管离心,１１０００r／min离心３min,弃上清液,沉淀用TNE垂悬,离心３min,重复２～３次。（２）沉淀中加入７ ０μlTNE、１０μl十二烷基肌氨酸钠及２μl…     

口腔拭子DNA检验的实时定量研究

目的寻求提高口腔拭子的DNA检验效率的方法。方法对来源于不同个体或同一个体不同擦拭次数的口腔拭子用Chelex-100或磁珠法提取的DNA用实时定量PCR技术进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统在ABI3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果在建立的Identifiler系统8μl扩增体系中,3个月内的口腔拭子用Chelex-100法提取的DNA模板1μl量较3μl量扩增效果好,磁珠法提取的DNA模板用量大小对复合扩增检测影响较小。结论用棉签擦拭颊粘膜5次制备口腔拭子,取其头部的约1/4用200μlChelex-100法提取DNA,然后用1μl模板进行复合扩增,是提高口腔拭子的DNA检验效率的简便可行的方法,但陈旧口腔拭子用磁珠法提取更能保证复合扩增分型成功。     

砖块上脱落细胞DNA分型检验

<正>1案例检验1.1简要案情郑某,男,2013年11月被发现死于家中床上。经现场勘查及法医检验,郑某系被人用砖块打击头面部致颅脑损伤死亡。提取现场两块沾有血迹的砖块要求进行DNA检验,以提供犯罪嫌疑人分型信息。1.2 DNA检验DNA提取根据嫌疑人可能的持砖方式,用棉签擦拭砖块1、砖块2后剪取棉纤维,加入裂解液500μL,56℃1h,95℃30min;采用硅珠法提取DNA,提     

瓜子壳上人体脱落细胞DNA检验

<正>1案例资料1.1简要案情2012年12月13日,某镇一村民家被盗,经调查和现场勘验确认遗留在现场的大板瓜子壳为嫌疑人所留,提取该检材要求进行DNA检验。1.2 DNA检验送检瓜子壳多呈两瓣前端张开状态,分析应为进食者以手卡住大板瓜子用门牙所嗑。挑选状态基本一致的瓜子壳数个,剪取尖端,加入5%Chelex-100 120μL及蛋白酶K(20mg/m L)10μL;振荡后56℃孵育1h,     

水中浸泡50余小时口罩上DNA检验1例

1案件简介2005年2月4日凌晨,我省某县发生一起特大入室抢劫杀人案,案发后50多个小时,在距离案发地1km处一农用大口井内打捞出一个沾有大量淤泥的白色口罩及其他相关犯罪物品。我们重点对口罩进行了DNA检验。2检验与结果(1)取适量检材,常规150μl5%的Chelex-100提取DNA。(2)取(1)中DNA50μl以Microcon-100浓缩柱浓缩至10μl,分别以模板DNA1、2μl进行Plus试剂盒扩增(28个循环,10μl体系),结果1μl模板DNA扩增出4 1个位点(见图2-A)。图2 Microcon-100浓缩柱提取的口罩DNA,Plus试剂盒扩增(28个循环,10μl体系)图谱A:模板1μl(3)取(1)…     

咀嚼后槟榔表面唾液斑DNA检验1例

1案例资料1.1简要案情某日,3名男子在公共场所寻衅滋事逃逸,警察在现场提取到遗留的3枚嫌疑人咀嚼过的槟榔,要求进行DNA分型。1.2 DNA检验样本处理3枚槟榔中2枚较干燥,表面纤维稀疏蓬松,直接剪取槟榔纤维;1枚表面相对潮湿,用无菌脱脂棉在表面进行擦拭。DNA提取及纯化将上述槟榔纤维和擦拭脱脂棉分别置于1.5mL EP管中,加1 000μL纯水清洗,离心,弃上清,保留约100μL液体和沉淀物;     

通过枣核上唾液斑的DNA检验侦破盗窃案1例

1案情简介 2011年11月25日,某区某局三楼办公室发生盗窃案,侦查人员在现场发现吃剩的枣核数枚,分别包装、送检。 2检验过程及结果使用＂双棉签技术＂[1]提取枣核表面的唾液斑,放入1.5 mL Eppendorf管,用QIAamp DNA Investigator试剂盒（德国Qiagen公司）抽提DNA：加入ATL缓冲液180μL、PK 20μL,振荡混匀,56℃保温2h以上;加入AL缓冲液200μL、载体RNA（Carrier-RNA）2μL,70℃保温10min，     

宁夏回族3个STR基因座的多态性分析

本文作者调查了D16S539,D7S820,D13S317三个基因座在宁夏回族人群中的基因频率分布情况,现报道如下。1　材料与方法1.1　实验材料无关回族个体血样标本从宁夏医学院附属医院采集,血纱布阴干保存。1.2　实验方法1.2.1　DNA模板的制备　按chelex-100法提取血痕DNA。1.2.2　复合扩增　扩增引物及缓冲液均采用Geneprint试剂盒(PromegaCorporation),加入5μl模板DNA上清液及0.75μTaq酶(PE公司),总体积25μl于PCR仪(PE480)中,96℃变性2min,然后94℃变性1min,60℃退火1min,70℃延伸1.5min,循环10次;再于90℃变性1min,60℃退火1min,70℃…     

中国汉族人群2个高变MVR基因座遗传多态性

常染色体小卫星基因座D16S309(MS205)位于16p13.3(AE006466)[1],核心序列为45~54bp,重复次数8~87次[2]。D2S44(YNH24)基因座位于2q21.3-q22(AJ001534)[3],核心序列为31bp。本文采用MVR-PCR技术,选择重复单位3′侧翼区引物(公共引物)和MVR特异性引物匹配进行PCR扩增,对中国河北汉族人群2个基因座遗传多态性进行了调查。1材料与方法1.1样本及DNA提取116份枸橼酸钠抗凝血样由河北省血液中心提供,采自无血缘关系汉族健康个体。常规饱和酚-氯仿法提取DNA。1.2MVR-PCRD16S309引物序列参见文献[2,4]。反应体系为25μl,分别加入5μl…     

手指上提取女性上皮细胞的DNA分析1例

1案例资料2005年11月14日下午,李某(男,25岁)窜入山西临汾某矿区机房中,准备将刘某(女,68岁)实施强奸,由于李某当时过度紧张而导致阳痿,故强奸未遂,只是用手指抠刘的阴道后逃窜,刘某及时呼叫后,矿工将李某抓获并报案。在李拒不承认犯罪事实的情况下,侦察人员用盐水棉球擦拭李的右手食指、中指,并剪取其右手食、中、环指指甲,将上述检材连同李某、刘某的耳血一并送到DNA检验室。送检物品为一个擦拭棉球及3枚指甲。将擦拭棉球外周棉纤维剪取少许放入1.5ml离心管中,加入150μl5%Chelex-100悬浮溶液及5μl10mg/ml PK。将3枚指甲放入1.5ml离心…     

利用震荡冲洗法提取指甲末端异体细胞

1案例资料 1.1简要案情2013年某日晚9时许,一女子在某施工路段,被一男子从后方捂住口鼻部,拖至路边实施抢劫。案发后,剪取受害人的指甲末端,并及时送至DNA实验室检验。1.2 DNA检验及结果1.2.1初检DNA用半干的棉签按照两步擦拭法[1]擦拭10枚指甲末端,剪下棉签球头,分别放入1.5m L离心管中并加入500μL试剂混合液（400μL TES、80μL SLS和20μL蛋白酶K），37％消化12h。     

捆绑胶带上人体脱落细胞DNA分型检验及结果分析

正1样本与检验1.1简要案情2014年10月至2015年1月期间,山西某县发生多起夜间入室抢劫案件,嫌疑人戴帽子、口罩、手套,入室后用透明塑料胶带将被害人头部及双手进行捆绑,现场提取到大量胶带。1.2 DNA检验DNA提取选取多个单层胶带,分别剪取胶带两端置于2m L离心管中。加入5%Chelex-100 500μL和PK 10μL,振荡混匀后,56℃水浴过夜,沸水浴     

室外毛巾上腐败血痕STR分析1例报道

1材料与方法1.1案例2006年某日,深圳市某山顶发现一具高度腐败女尸,现场提取一块方形小毛巾(有灰黑色可疑血痕),送检做DNA检测。1.2方法1.2.1提取DNA方法一:常规Chelex-100法[1]提取方形小毛巾上可疑血痕。方法二:应用德国QIAGEN公司生产的BioRo-bot EZ1全自动核酸纯化仪[2](以下简称BioRobotEZ1)提取方形小毛巾上可疑血痕。(1)剪取适量检材,置0.5 ml Eppendorf管中,加入EZ1试剂盒(EZ1 DNA Tissue Kit(48)(Cat.No.953034))中试剂BufferG2 190μl,PK 10μl,56℃裂解30 min,去载体将裂解液转移置2.0 ml样本管中。(2)在BioRobo…