2人份混合检材STR图谱分析

目的探讨混合检材STR图谱分析结果。方法收集了3例实际案例检材,提取DNA,PCR扩增后用310型遗传分析仪检测。结果当DNA含量差距不大时,2人份混合检材检验结果易于分析,当DNA含量差距较大时或者2人份以上混合检材,图谱分析非常困难。结论根据本文提出的问题和实验结果,当遇到这样的混合样品,分析结论一定要谨慎。     

DNA纹印技术的初步研究——用PYNH24探针分析MspI的RFLP

应用 Southern 印迹杂交技术,分析了人体基因组 DNA MspI 酶解物与特异探针 PYNH24杂交的限制酶切片段长度多态性,获得清晰易读的杂交图谱。50个不相关个体血样中未发现相同图谱,显示了个体特异性,为法医生物物证检验工作提供了新的分析手段。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

非同位素标记DNA探针初步研究

本文报导了将辣根过氧化物酶直接标记在单链 DNA 探针上,制备出非同位素的 DNA 探针,采用化学光增强法检测杂交结果,所得图谱清晰,容易判读。所制备出的 DNA 探针可用于人类性别鉴定和个体识别,为 DNA 检验技术推广应用开辟了新的领域。     

环氧乙烷消杀DNA污染效果初探

目的初探环氧乙烷消杀DNA污染的效果。方法收集98例分别含有唾液、皮屑、汗斑、毛发、血斑、肋软骨的法医物证样本,分两组进行环氧乙烷灭菌6h和8h,提取DNA后扩增,使用3130XL或3500XL测序仪检测进行STR分型。结果 EO 6h组44例样本中有2例口腔拭子检出阳性结果,EO 8h组54例样本中有1例毛发检出阳性结果,阳性样本STR图谱表明仅有少量DNA残留,其余生物样本未检测到STR图谱。结论环氧乙烷能有效消杀DNA污染,可适用于DNA检验耗材的灭菌。     

Chelex-100法和QIAcube纯化法在接触性检材检验中的比较

<正>在法医DNA检验中,能否提取到足够浓度与纯度的DNA模板,是决定DNA检验成败的关键之一。本研究分别采用Chelex-100法与QIAamp DNA Investigator试剂盒结合QIAcube核酸自动化提取仪(QIAcube纯化法)提取实际检案中的DNA,同等条件下进行PCR扩增与电泳,比较分析二者的图谱,报道如下。1材料与方法1.1材料65份接触性生物检材来自本实验室日常检案积累,其中瓶口32份,工具手柄18份,绳索衣物类     

FTA-DNA直接提取法的研究与应用

目的建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法。方法取直径1．2mm FTA卡血样，分别用FTA-DNA直接提取法及FTA常规提取方法提取DNA，AB-Identifiler^TM试剂盒分别进行10山和25山体系检测比较，并筛选批量grA卡血样DNA自动化提取程序。结果200份grA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板，25μl体系PCR-STR检测，分型结果均良好。10μl体系检测，FTA-DNA直接提取法优于FTA常规提取方法，图谱RFU值为1000～2000，采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳；采用FTA常规提取方法检测，图谱RFU值100～2000，小片段优先扩增现象明显，且有19％的样本出现丢峰现象，采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显。经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10山体系检测本2万余份FTA卡采集的血样，均获得16个STR基因座DNA分型结果。结论本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA卡血样自动化DNA建库。     

DNA IQ^TM SYSTEM在疑难指甲DNA检验中的应用

目的探索DNA IQTMSYSTEM在疑难指甲DNA提取中的应用。方法 15份疑难指甲采用Chelex方法检验没有成功获得STR分型图谱,采用DNA IQTMSYSTEM提取法并纯化,采用Identifiler PLUS试剂盒进行复合扩增,产物经ABI3130XL型DNA基因分析仪检测。结果成功获得15例疑难指甲的STR基因座DNA分型。结论 DNA IQTMSYSTEM方法能快速、有效提取疑难指甲DNA进行STR分型。     

DNA技术在法医物证鉴定中应用的经验

自1989年开始DNA指纹技术研究获得成功并正式用于法医物证检验以来，我们已受理检案上干起。在此基础上开展的PCR技术及单位点DNA图谱技术，将DNA指纹中的同位素标记探针检测方法发展为辣根过氧化物酶标记探针及光增强检测法。这些新技术的应用，相互弥补各自的不足，使目前广泛的DNA技术更趋于完善。经过几年的办案实践，我们摸索出一些实验室经验，同时也看到一些存在的问题，现总结如下。一、多位点DNA指纹技术由于此项技术在侦察破案中的重要性已逐渐为广大司法工作者所认识，我们已经受28个省、市、自治区的基层公安系统和法院…     

吸附性载体上微量血痕的DNA分型

目的研究吸附性载体上微量血痕的DNA提取及其检验。方法用Chelex-100法、QIAamp MiniKit、及QIAamp Mini Kit改良法提取吸附性载体上微量血痕中的DNA,进行PCR扩增及STR检验。结果采用Chelex-100法及QIAamp Mini Kit的分型成功率很低;采用QIAamp Mini Kit的改良法能较好的得到分型图谱。结论采用QIAamp Mini Kit的改良法能较好的提取吸附性载体上微量血痕的模板DNA。     

腐败尸体阴道擦拭物中精子DNA检验1例

1案例资料2003年2月20日14时许,湖北省通城县龙王嘴沙场挖出一具女裸尸,经法医检验系机械性窒息死亡、属他杀。怀疑为2003年元月25日在沙坪镇下车后失踪的刘某。2DNA检验取死者肋软骨,死者阴道擦拭物,死者可疑父母的血样。先后4批共75名嫌疑人血样。血样和肋软骨采用5%chelex-100提取DNA。阴道擦拭物经PK消化去除女性细胞、PK结合DTT消化精子后采用酚-氯仿提取DNA。用荧光标记STR复合扩增技术,检验9个STR基因座,310型遗传分析仪检测,得到Amp-Flp图谱和分型结果。死者肋软骨的分型结果与死者可疑父母血样的分型结果比对,认定具有亲…     

我国法医DNA检验存在的问题及质量保证体系初探

法医DNA技术在我国已经走过10年的历程。用它检验的数千起案件中,不乏以DNA检验报告作为唯一判定依据的案例ODNA技术应用于我国的公安司法事业,其功效卓著。在法医DNA检验新技术不断涌现的同时,国内外法医界同行也在讨论如何对这类具有巨大潜能的技术进行质量控制的问题。据国外一些统计结果表明,未进行质量控制的实验室其DNA检验结果出现的误差率不能令人忽视,以致出现法庭不承认未进行质量控制的DNA实验室出具证据的例子。在国内,也有可能因管理问题、技术问题或人员问题而导致DNA检验的错误判型,其后果难以估量。目前,…     

粪便DNA提取及检验

目的　研究人类粪便DNA的提取和检验方法。方法　 8人份粪便样本 ,磁珠法提取DNA后 ,进行STR复合扩增和mtDNAHVI区测序分析。结果　用 2种方法提取的粪便DNA ,STR复合扩增检验均未获成功 ;方法1提取的粪便DNA有 6个样本、方法 2有 7个样本获得了清晰可读的mtDNAHVI区序列 ,并与唾液对照样本DNA的序列完全一致。结论　用本文建立的方法提取粪便DNA ,不适于STR分析 ,可通过mtDNA测序分析进行检验。     

水中浸泡50余小时口罩上DNA检验1例

1案件简介2005年2月4日凌晨,我省某县发生一起特大入室抢劫杀人案,案发后50多个小时,在距离案发地1km处一农用大口井内打捞出一个沾有大量淤泥的白色口罩及其他相关犯罪物品。我们重点对口罩进行了DNA检验。2检验与结果(1)取适量检材,常规150μl5%的Chelex-100提取DNA。(2)取(1)中DNA50μl以Microcon-100浓缩柱浓缩至10μl,分别以模板DNA1、2μl进行Plus试剂盒扩增(28个循环,10μl体系),结果1μl模板DNA扩增出4 1个位点(见图2-A)。图2 Microcon-100浓缩柱提取的口罩DNA,Plus试剂盒扩增(28个循环,10μl体系)图谱A:模板1μl(3)取(1)…     

甲醛固定组织的DNA提取

在法医物证检验中，分子量大于23kb的DNA分子可以直接作出指纹图谱，部分降解的DNA分子可以通过PCR扩增进行检验。但对甲醛处理的组织，用上述提取方法，只能得到已严重降解的小分子DNA，并由于甲醛溶液的影响，无法进行VNTR－PCR检验。因此，如何从甲醛处理的各种组织中提取大分子DNA是一个迫切需要解决的问题。本文摸索出从甲醛处理的组织中提取大分子DNA的方法。同时研究了固定时间对提取DNA质量的影响，找到了适合DNA释放的最佳PK酶解条件，包括离子强度、反应体系、酶解时间、温度等。材料与方法1．组织的处理取自同一个…     

DNA扩增技术用于轮奸案检材的检验

轮奸案物证检材的精斑成份往往来自多个个体，检验时相互干扰，影响环节较多。所以，对轮奸案精斑检材的提取检验及结果分析有很多问题值得探讨[1]。本文作者根据检案实践，对轮奸案件的检材搜集、DNA提取、分型等方面应注意的问题进行分析。实例资料例1．1993年1月至1994年3月，某市发生十几宗少女被轮奸系列案，其中一宗案件现场搜到18份卫生纸团。经检验，11份有人精斑。先后抓获谭某、奥莱等10名嫌疑人，疑犯均否认与案件有关。经DNA检验，其中2份卫生纸上精斑APO、DIS80、P33．6、D17530、HUMTH01、FABP等6个位点基因型均与…     

接触DNA在法医实践中的应用研究进展

人体在接触物体后,会在其表面留下少量接触DNA。对接触DNA的检验是目前法医DNA检验技术的热点和难点。接触DNA的检验成功率差异较大,受各环节多重因素影响。影响接触DNA检验成功率的主要因素有接触DNA检材的准确发现、接触DNA的提取与纯化以及扩增策略的选择和结果分析等。本文详述了接触DNA检验过程的进展及研究展望。     

模糊指印DNA检验1例

<正>汗潜指印的DNA检测有报道,但在实际案件应用较少。笔者工作中遇到1例磁性碳粉显现后呈现的模糊指纹,经相关检验获得DNA图谱。现报道如下:     

载体法检验微量检材DNA

目的解决微量生物检材DNA检验难题。方法采用载体法对已知微量血样DNA进行检验，再与目前高灵敏度的Chelex-100提取的DNA检验的相应结果进行比较。结果载体法针对微量血样的DNA检验。不但能得到正确的STR分型结果．同时在检验灵敏度上比Chelex-100法高出2倍以上。结论载体法可提高微量生物栓材中DNA检出率，且操作简单，在法医检案工作中具有较高应用价值。