LC-MS/MS法检测人血液中的利多卡因及其代谢物

目的建立人血液样品中利多卡因及其代谢物单乙基甘氨酰二甲苯胺(MEGX)和甘氨酰二甲苯胺(GX的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。方法人血液样品经乙腈沉淀蛋白后,Zorbax RRHD Plus C18柱(2.1mm×50mm,1.8μm)分离,以0.1%甲酸和乙腈为流动相进行洗脱。质谱采用电喷雾正离子化(ESI+),多反应监测扫描模式。结果血液中利多卡因、MEGX和GX在相应范围内线性良好,相关系数(r 0.9950)。在血液中检出限分别为0.1 ng/mL、0.5 ng/mL和0.2 ng/mL,方法回收率为92.7%～103.9%,准确度为92.9%～113.1%,日内、日间精密度的相对标准偏差均不超过13.0%。在1例肌肉注射利多卡因死者心血中利多卡因、MEGX和GX的质量浓度分别为1.520μg/mL、0.019μg/mL和0.266μg/mL。结论本方法灵敏度高、选择性好,适用于血液中利多卡因及其代谢物的检测,可为利多卡因临床治疗过程中的药物浓度监测和法医学鉴定提供技术支撑。     

血中水合氯醛及其代谢物的GC-MS/MS和HPLC-MS/MS检测

目的建立血液中水合氯醛及其代谢物的色谱串联质谱检测方法,用于法医案件的检验。方法血液检材经乙酸乙酯萃取后气质联用选择离子扫描(SIM)检测水合氯醛和三氯乙醇,经乙腈沉淀蛋白后液质联用负离子模式下多反应监测(MRM)检测三氯乙酸。结果水合氯醛及其代谢物的线性范围分别是100ng/mL～15μg/mL、500ng/mL～20μg/mL和500ng/mL～15μg/mL,线性关系良好,R~2均大于0.998,最低检出限分别为15ng/mL、130ng/mL和30ng/mL,最低定量限分别为50ng/mL、500ng/mL和100ng/mL;日内精密度分别在2.26%～7.31%、3.09%～7.23%和2.79%～5.37%;日间精密度分别在4.14%～7.03%、2.18%～4.43%和2.75%～4.96%;提取回收率分别为92.72%～106.30%、94.22%～103.70%和89.05%～104.50%。并对水合氯醛相关案件进行检测,心血中水合氯醛浓度为411.34ng/mL,三氯乙醇浓度为9.49μg/mL,三氯乙酸浓度为8.32μg/mL。结论本文建立的水合氯醛及其代谢物的检测方法准确简单快速,可应用于水合氯醛中毒案件的法医学鉴定。     

LC-MS/MS法测定饮酒者尿液中乙醇和5-羟色胺代谢物

目的建立尿液中5羟(基)-β吲哚乙醇葡萄糖苷酸(5-hydroxytryptophol glucuronide,GTOL)和5羟(基)吲哚-3-乙酸(5-hydroxyindole-3-aceticacid,5-HlAA)的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,为疑似饮酒案件的法医学鉴定提供实验依据。方法尿液经乙腈(1%甲酸)沉淀蛋白,经Captiva EMR-Lipid滤柱过滤,以0.1%甲酸水溶液～乙腈(90:10 V/V)等度洗脱,在多反应监测模式下检测GTOL和5-HIAA,并对38例案件尿液样本定性定量检测。结果 GTOL的线性范围是0.025μg/mL～2μg/mL,线性关系良好,R2 0.999,检测限和定量下限分别为0.01μg/mL和0.02μg/mL。5-HIAA的线性范围是0.01μg/mL～50μg/mL,线性关系良好,R2 0.99,检测限和定量下限分别为0.02μg/mL和0.05μg/mL。GTOL和5-HIAA的批内和批间精密度均小于15%,准确度分别在90.52%～111.04%和96.81%～112.30%,稳定性变化率在-11.96%～3.71%。25例乙醇阳性尿液样本GTOL和5-HIAA比值均大于15(pmol/nmol),13例乙醇阴性尿液样本GTOL和5-HIAA比值均小于15(pmol/nmol)。结论本研究建立的尿液中GTOL和5-HIAA定性定量分析方法准确、灵敏,可快速、精确地得到GTOL和5-HIAA比值,为司法鉴定法工作中饮酒判定提供科学依据。     

分散固相萃取-GC/MS法测定人血中啶虫脒的含量

目的建立人血中新型农药啶虫脒的检验方法。方法用分散固相萃取法提取人血中啶虫脒,GC/MS/SIM法进行测定。结果在0.02μg/mL～2μg/mL添加水平范围内,线性关系良好,啶虫脒的平均添加回收率在76.4%～89.8%之间,相对标准偏差在1.3%～8.3%之间,啶虫脒的检出限为0.0075μg/mL。结论该方法操作简便,结果准确,适用于人血中啶虫脒的检验。     

固相萃取毛细管区带电泳法测定全血中甲基苯丙胺

目的建立全血中甲基苯丙胺的固相萃取毛细管区带电泳法检验方法。方法血液采用OasisHLB固相萃取小柱直接萃取,BeckmanP/ACEMDQ毛细管电泳仪区带法分析。结果回归方程y=0.0083x-0.0164,线性范围5～75μg/mL(r=0.994),日内精密度RSD=2.22%,日间精密度RSD=5.31%,盐酸甲基苯丙胺质量浓度为25.0μg/mL的全血相对回收率(91.63±2.5)%。电泳分离良好,空白无干扰。结论本方法操作简便,适用于全血中甲基苯丙胺的检验。     

液相色谱-串联质谱法测定血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷

目的建立血液、尿液中乙基葡萄糖醛酸苷（ethyl glucuronide,EtG）的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。方法血液、尿液用乙腈沉淀蛋白,离心后取上清液用LC-MS/MS检测。结果血液、尿液中EtG的检出限均为0.05μg/mL,线性范围均为0.10～5.00μg/mL（r〉0.999）,检测方法准确度为95%～109%,日间及日内精密度〈12%。对送检案例血液中EtG进行检测,效果良好。结论本方法适用于血液、尿液中EtG的检测。     

LC-MS/MS法测定全血中新型安眠药的研究

目的建立血液中检测新型安眠药的方法。方法取血液样品过ABN小柱,用甲醇洗脱,洗脱液供LC-MS/MS分析。色谱条件:色谱柱为:kinetex 2.6μC18(50m×3.0mm,2.6μm),以乙腈和水(10 mmol/L甲酸铵)溶液为流动相进行梯度洗脱,进样量为5μL。质谱条件:离子源为ESI源;监测方式为正离子多离子反应监测(MRM);扫描范围分别为全扫描。结果唑吡坦、扎来普隆和氟硝西泮的线性范围为1～500ng/mL,佐匹克隆、氯硝西泮和diclaepam的线性范围为5～500ng/mL,7-氨基氯硝西泮和尼美西泮的线性范围为1～250ng/mL,地洛西泮和氯甲西泮的线性范围为5～250ng/mL;日内精密度和日间精密度均≤15%(n=5);回收率范围为53.6-101.3%;基质效应范围为63.64-118.0%。结论该方法专属性强、灵敏度高、简单快速可用于新型安眠药的检测。     

人血浆中更昔洛韦的高效液相色谱快速分析

目的建立人血浆中抗病毒药物更昔洛韦的高效液相色谱快速分析方法。方法在一定pH值下用甲醇和二氯甲烷处理血浆,高速离心后外标法直接对上清液进行更昔洛韦定性、定量分析。以正常人血浆为空白样本添加标准更昔洛韦,优化色谱分析条件并确定检材的前处理方法、工作曲线、线性范围、方法的精密度和回收率。以所建方法对12位受试者血浆中更昔洛韦代谢浓度进行12h监测。结果该方法分析血浆中的更昔洛韦,其线性范围为0.05μg/mL～1.60μg/mL;最低检测限为0.01μg/mL(S/N≥3),日内、日间RSD≤5.1%,加样回收率在90.0%～95.4%之间。结论该分析方法操作便捷、实用、准确度高。适用于更昔洛韦的临床血药浓度监测和法医学药(毒)物快速鉴定。     

HPLC-UVD/FLD法测定血中氟乙酸类杀鼠剂

目的采用水相催化衍生化-液相色谱-紫外/荧光检测分析法,检测血中氟乙酸类杀鼠剂。方法血样经乙腈沉淀蛋白后,加入衍生化试剂4-溴甲基-7-甲氧基香豆素、催化剂四丁基溴化铵,在80℃水浴中衍生化反应120min,衍生产采用液相色谱-紫外/荧光检测分析。结果紫外检测法:氟乙酸根浓度在0.38～38.50μg/mL之间线性关系良好,最低检出限为0.10μg/mL;荧光检测法:氟乙酸根浓度在0.15～15.40μg/mL之间线性关系良好,最低检出限为0.050μg/mL。结论水相催化衍生化-液相色谱-紫外/荧光检测分析方法具有较好的灵敏度、准确性和精密度,可用于实际案例检测。     

高效液相色谱法测定卡西酮

目的建立卡西酮的高效液相色谱检测方法。方法采用UPLC-DAD分析方法。分析柱:Agilent ZorbaxSB-Phenyl柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为三氟乙酸(pH 3.5)∶乙腈为85∶15,流速0.2mL/min,检测波长254nm。结果卡西酮在0.5～1 000μg/mL浓度范围内线性关系良好R2=0.999 4,日内与日间保留时间和峰面积的标准偏差(RSD)均<1.06%,检出限为0.068μg/mL,平均回收率95.9%。结论本方法峰形好,分离度好,线性范围良好,回收率高,适用于刑事案件中卡西酮的定性定量分析。     

高效液相色谱法测定人血液、尿液中的2,4-D丁酯

目的建立检测血液、尿液中2,4-D丁酯的高效液相色谱分析方法。方法采用正己烷为样品萃取溶剂,色谱柱为Zorbax SB-Aq柱,流动相为V（甲醇）∶V（水）=60∶40。结果 2,4-D丁酯在血液和尿液中的线性范围分别为0.10～10.00μg/mL（r≥0.999 8）和0.08～8.00μg/mL（r≥0.999 5）,检测限分别为0.002 0μg/mL和0.001 8μg/mL,准确度为94.5%～104.5%,日内、日间精密度≤4.5%。结论本研究建立的血液、尿液中2,4-D丁酯的提取和HPLC检测方法,可应用于2,4-D丁酯中毒的快速检验和中毒死亡的法医学鉴定。     

分子印迹固相萃取技术-液相色谱法测定鱼塘水中2甲4氯苯氧乙酸

目的建立分子印迹固相萃取技术对鱼塘水中2甲4氯苯氧乙酸进行提取和分析的方法。方法以2甲4氯分子印迹聚合物为固相萃取材料,对鱼塘水中2甲4氯进行分离提取,洗脱液直接进行液相色谱分析。结果鱼塘水中MCPA的提取率在80%以上,检出限0.040μg/mL,在0.2μg/mL～2.0μg/mL范围内线性关系良好。结论该方法的准确度和精密度较好,适合实际发生案件的检测分析。     

固相萃取-气相色谱法检测生物检材中斑蝥素

目的建立固相萃取-气相色谱法检测生物检材中斑蝥素的方法。方法采用HLB固相萃取柱提取,气相色谱-内标法检测。结果斑蝥素在0.1～200mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.999以上;精密度（RSD）小于5%。对于添加血样,方法检出限为0.05μg/mL,加标回收率范围为93.03%～98.29%。结论该方法操作简便、快速、灵敏,提取回收率高,提取物含杂质较少,可用于实际案件中全血和尿样中斑蝥素的检测。     

血浆中水杨酸的高效液相色谱分析

目的 建立血浆中水杨酸的高效液相色谱快速分析方法。方法 以正常人血浆添加标准水杨酸对血浆样品的前处理方法、仪器测试条件、线性范围、精密度、回收率进行全面考查,对单剂量口服乙酰水杨酸缓释片的健康受试者血液中代谢成份水杨酸进行浓度监测。结果 该方法在血浆中的线性范围是0.05～4.0μg/mL;最低检测浓度为0.05μg/mL;日内、日间精密度分别小于4.3％和5.2％;回收率在97.2％-101.7％。结论 所建方法迅速、灵敏,可在1.5h内完成血浆中SA的检测,并可准确监测至服药后36h的血代谢浓度值。     

反相高效液相色谱法检测生物胺的法医学应用初探

目的采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测大鼠肌肉组织中7种生物胺,并探讨其在法医学中的应用价值。方法以丹磺酰氯为衍生剂,通过ZORBAX Rx-C18反相色谱柱分离,以乙腈-水作流动相梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温为20℃,DAD检测器,对色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺7种生物胺进行检测。结果 7种生物胺得到良好分离,在0.5～100.0μg/mL的范围内线性良好,相关系数均>0.99,检出限在0.14～0.50μg/mL之间;对大鼠肌肉样本的添加回收率在83.8%～100.6%之间,相对标准偏差均<11%。结论采用RP-HPLC法检测生物胺,方法简便、快速、灵敏,能够满足尸体组织中生物胺检测的需要。     

血液中64种常见有机氯菊酯类农药的快速筛查

目的建立人体血浆中64种有机氯菊酯类农药多残留的气相色谱（GC）快速筛查分析方法。方法空白人体静脉抗凝血用乙腈沉淀蛋白,乙酸乙酯∶环己烷（v/v,3∶1）进行液液萃取净化,使用HP-5色谱柱,采用气相色谱进行定性、定量分析。对方法进行优化并进行方法学评价。结果 64种农药在0.001~0.1μg/mL范围内线性关系均良好,相关系数在0.990 1~0.999 9之间。检出限在0.001~0.15μg/mL范围内,方法定量限在0.001~0.5μg/mL之间,回收率总体于80%~110%之间,相对标准偏差小于15%,方法检出限总体于0.01μg/mL以下,日内精密度在1.5%~11.5%之间,日间精密度在2.9%~13.9%之间。结论本文建立的人体血浆的农药多残留快速筛查测定法,符合农药残留分析方法的要求,可在相关研究和实践中选用。     

SPE/UPLC法检测血中吗啡、苯丙胺类及氯胺酮

目的建立SPE/UPLC方法在同一条件下同时检测血中吗啡、苯丙胺类及氯胺酮。方法采用SCX 3cc（60mg）固相萃取柱萃取血中吗啡、MA、MDMA、MDA及氯胺酮,用超高效液相色谱（UPLC）-二极管阵列检测器（PDA）检测,结合保留时间和紫外光谱进行定性、定量分析,对实验各环节进行优化,并进行实际案例检测。结果吗啡、MA、MDMA、MDA、氯胺酮的固相萃取提取回收率分别为81.4%±2.51%、88.2%±2.48%、91.8%±2.03%、93.8%±1.46%、74.8%±2.27%,峰面积和质量浓度的线性关系良好（r〉0.999）,线性范围分别为0.08～100μg/mL、0.4～100μg/mL、0.2～75μg/mL、0.3～75μg/mL、0.4～100μg/mL,检出限分别为30pg、200pg、80pg、100pg、200pg。结论本文所建方法适用于血中吗啡、苯丙胺类、氯胺酮常见毒品的筛选及定量分析。     

紫外分光光度法和二阶导数光谱法测定水样中的敌草快

目的建立测定水样中的敌草快的分析方法。方法采用紫外分光光度法和二阶导数光谱法测定水样中的敌草快。结果紫外分光光度法直接测定水样中的敌草快,在0.1~50μg/mL范围内线性关系良好,日内,日间精密度均小于2.6%。二阶导数光谱法在0.1~10μg/mL线性关系良好,日内、日间精密度均小于1.29%。结论该两种方法快速、简单、灵敏,适用于环境监测工作。     

人脑脊液中利多卡因的高效液相色谱分析

目的 建立人脑脊液中利多卡因的高效液相色谱(HPLC)分析方法。方法 以空白人脑脊液添加标准利多卡因进行HPLC分析,并系统考察实验中的色谱条件、样品处理方法、线性关系、精密度及回收率。结果 所建方法的线性范围是1.0～20.0μg·ml-1(r=0.9993),最低检测浓度为1.0μg·ml-1(S/N≥3),日内、日间检测的相对标准偏差≤3.0％,回收率为98.3％～102.7％。结论 所建方法定量检测人脑脊液中的利多卡,灵敏、准确、快速。     

LC-MS/MS分析生物检材中的呋喃酚葡萄糖醛酸结合物

目的建立生物检材中呋喃酚葡萄糖醛酸结合物的LC-MS/MS检测方法。方法血和肝等检材经乙腈沉淀蛋白,采用ZORBAX HILIC Plus(4.6mm×100mm,3.5μm)亲水性色谱柱,以水和含0.1%甲酸的乙腈为流动相,梯度洗脱,以负离子多反应检测(MRM)模式检测,扫描时间8min。结果血和肝中呋喃酚葡萄糖醛酸结合物的线性范围分别是20ng/ml～5μg/ml和50ng/g～5μg/g,线性关系良好,r~2均大于0.999,血和肝中最低检出限分别为10ng/ml和9.93ng/g,最低定量限分别为15.63ng/ml和16.56ng/g;批内及批间精密度分别在1.53%～5.02%和5.06%～6.85%;相对回收率为86.13%～92.71%和87.01%～94.06%。对一例克百威中毒死亡人体检材进行检测,克百威及呋喃酚的血浓度分别为0.77ug/g和29.65ug/g,呋喃酚葡萄糖醛酸结合物的血浓度为1.059ug/g,肝组织浓度为4.056 ug/g。结论本研究所建方法特异性强、灵敏度高,可满足法医学中对于血中呋喃酚葡萄糖醛酸结合物的检测需求。