应用国产两性电解质对唾液中酸性富含脯氨酸蛋白多型系统的研究

<正> 酸性富含脯氨酸蛋白系统(Acidic Proline—Rich Proteins,APRPs)是存在于唾液中的一类有重要意义的遗传标记。1981年Azen等对构成这一系统的四种主要蛋白多型Pr,Db,Pa,PIF应用等电聚焦的方法进行了研究。作者等曾用进口两性电解质对四种酸性富含脯氨酸蛋自多型在辽宁地区的分布做了调查。     

唾液脯氨酸蛋白系统及唾液酶多态性

<正> 1973年 Azen 首次报道唾液富含脯氨酸蛋白以来,开创了唾液蛋白多态性检验的新领域。富含脯氨酸的唾液蛋白(Proline-richProteins,简写 PRP)占腮腺分泌蛋白的2/3。PRP 含有丰富的脯氨酸、甘氨酸及谷氨酸其主要作用是结合离子钙、羟基磷     

吉林地区朝鲜族唾液酸性富含脯氨酸蛋白遗传多态性的研究

应用聚丙烯酸胺凝胶等电聚焦技术，调查了吉林地区226名朝鲜族个体唾液酸性富含脯氨酸蛋白二位点上共6种等位基因频率的分布：PRH1*1为0．0331，PRH1*2为0．2124，PRH1*4为0．7477，PRH1*6为0．0068；PRH2*1为0．7544，PRH2*2为0．2456。按Hardy－Weinberg法则进行吻合度检验，其观察值和期望值一致，并对吉林地区朝鲜族与其它地区人群酸性富含脯氨酸蛋白等位基因的差异性做了比较。PRH1和PRH2在吉林延边地区朝鲜族的个人识别能力分别为0.58和0．53，两者总鉴别机率为0．80；PRH1和PRH2的非父排除率为0．1875和0．1510，两者总非父排除率为0．3102。     

大鼠死后骨骼肌蛋白质羰基和巯基含量的时序性变化

目的 测定大鼠死后不同时间股二头肌蛋白质羰基含量及巯基含量的变化值并探究其与死亡时间(postmortem interval,PMI)的关系。方法 健康大鼠颈部脱臼处死后,20℃恒温保存,分别于死后0 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、168 h提取大鼠股二头肌。利用吸光光度法,测定蛋白质羰基和巯基含量,分别按鲜重和蛋白质浓度(Protein Concentration,Cpr)计算,并建立与PMI之间的线性回归方程。结果 大鼠死后168 h内,蛋白质羰基含量持续增加,其中在144 h内随PMI增加规律明显,R²分别为0.971(按Cpr计算)和0.838(按鲜重计算)。大鼠死后168 h内,按Cpr计算的总巯基(Total Sulfhydryl,TSH)含量随PMI延长变化规律不明显,按鲜重计算的TSH含量随PMI延长逐渐降低(R²=0.905),非蛋白质巯基(Nonprotein Sulfhydryl,NPSH)含量在一定范围内波动,蛋白质巯基(Protein Sulfhydryl,PSH)含量随PMI延...     

不同温度对精液(斑)中酸性磷酸酶(ACP)活性的影响

<正> 酸性磷酸酶广泛分布于人体组织,含量最高的是前列腺液和精液。精液(斑)中酸性磷酸酶的检验,是有价值的一种常规预试验,特别是对作了绝育术的人的精液(斑)鉴定时,酸性磷酸酶的检验更为     

第七讲 常见法医学物证检验(续)

<正> 三、血液之外的其它体液检验血液之外的其他体液,如精液、尿液、汗液、唾液等在犯罪现场也可出现,其中尤以精液最为常见,因此我们着重介绍精液检验。(一)精液(斑)检验精液是精子和前列腺、精襄等分沁液的混合物。精子是精液的主要成份(病症和手术除     

MMP-11多克隆抗体的制备及其法医学意义

目的制备兔抗人基质金属蛋白酶-11(MMP-11)多克隆抗体,建立用MMP-11抗体检测月经血的可行方法,探讨其法医学意义。方法将用基因工程制备的人MMP-11融合蛋白免疫新西兰白兔,饱和硫酸铵法进行抗体纯化。运用蛋白印迹法检测月经血痕、外周血痕、阴道液斑、精液斑、唾液斑和尿液斑,盲测验证该方法的可靠性。结果高效价的兔抗人MMP-11多克隆抗体检测月经血MMP-11蛋白的阳性率为90.48%(93/105),而外周血痕、精液斑、唾液斑、尿液斑和阴道液斑均未检出MMP-11。结论用自制的抗MMP-11多克隆抗体所建立的蛋白印迹法检测月经血中的MMP-11特异性好,灵敏有效,可用于月经血及外周血的鉴别。     

无精斑证据性犯罪案件其他物证DNA检验(附6例报告)

在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验。但由于种种因素的影响 ,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性 ,不能为性犯罪提供有力证据。笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证 (如血迹、唾液斑、阴毛等 ) ,通过作ＤＮＡ检验 ,为案件侦破提供了重要证据。现报告如下 :一、材料自我室自 1 997年 1月～ 1 999年 1 2月受理的ＰＣＲ检验强奸案件 6例 ,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等。二、方法1 .ＤＮＡ提取 :血痕、唾液、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛采用ｃｈｅｌｅ - 1 0 0…     

人精浆SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳谱型研究

本文采用SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳(SDS-PAGGE)研究了102例中国正常男子精浆蛋白的电泳谱型,得到了具有精液特征性的,可与人阴道液、唾液、初乳及血清进行鉴别的人精浆蛋白电泳谱型,并可作为精斑的确证。另发现一种-83kd 变异型。频率为8. 82±2. 81%。提高了精斑的个人识别机率,在实际应用中取得了初步成效。     

UPLC-MS/MS测定唾液中的3种毒品成分

目的建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时检测唾液中的甲基苯丙胺、氯胺酮和吗啡成分。方法唾液样品经沉淀蛋白后,通过ACQUITY UPLC BEH Phenyl(100mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱分离,以0.3%甲酸水和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子(ESI+)多反应监测(MRM)模式进行质谱分析。结果甲基苯丙胺、氯胺酮和吗啡在4μg/L^20μg/L质量浓度范围内线性关系良好;在4μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L五组添加样本下,添加回收率范围在87%~128%;甲基苯丙胺、氯胺酮、吗啡的检出限(LOD)和定量限(LOQ)均分别为0.2μg/L和4μg/L。结论本方法采用乙腈沉淀蛋白提取,快速、简单、回收率高,适用于同时检测唾液中甲基苯丙胺、氯胺酮和吗啡。     

抗人精单克隆抗体A_(10)C_6特异性的研究

用作者实验室生产的单克隆抗体A_(10)C_6建立了反向间接血液试验(RPHA)方法。经检测人精液标本,发现其对人精液有100％的阳性反应,而对猪精液、牛精液、人乳汁、人阴道分泌物、人唾液等均呈阴性反应,证明了它对人精液较高的特异性。RPHA方法简便、灵敏、可靠,所用检材量少,有较高的应用价值,特别适于基层应用。     

饮食合理与职业病防治

——摄影、X线拍片和微机操作人员，应多吃高蛋白食品，以补充因放射线损害引起的组织蛋白质的分解；多饮绿茶，多食富含碘的食物，如海带、紫菜等。     

应用等电聚焦技术研究血清型取得的若干进展(综述)

近年来,随着等电聚焦技术的应用,血清型的研究也有许多进展,本文择其要者综述如下: 1.ORM ORM亦称α_1-酸性糖蛋白(α_1-acid glycoprotein),是人类血浆中含量最丰富的一种蛋白质(80—250mg/100ml,由肝脏合成,是一种急性时相反应物,分子量为41 000,含糖42％,含神经氨酸12％。     

混合斑(液)中前列腺素(PG)物质的检测

<正> 证实精液(斑)的方法虽然很多,但对无精子的、受高热作用后的以及腐败的精液(斑),酶以及蛋白质成份的检测,容易得出阴性结果。我们试图寻求一种简易、有效的方法,测定混合斑(液)中的前列腺素物质,以此判定精液(斑)     

红细胞酸性磷酸酶(EAP)型的分布及血痕EAP的检出

本文应用琼脂糖凝胶电泳法对辽宁地区213例汉族随机献血员的红细胞酸性磷酸酶(EAP)型进行了检测,其基因频率为EAP~(?)=0.169,EAP~b-0.831。结合文献资料分析了EAP型分布的种族差异,指出了各人种EAP型分布的特点。用琼脂糖凝胶电泳法,对红细胞溶血液EAP型的最小检出量为2μL(2×3mm滤纸条)及0.5μL(直接加样);对血痕EAP型的最小检出量为7.5μL血液制成的检样。本法在4℃保存4周以内的红细胞溶血液和室温保存25天的血痕均能正确判定EAP的型别。     

样品成份对“咖啡环”法DNA检测的影响

目的调查样品中常见成份对"咖啡环"法DNA检测的影响。方法将含有不同浓度SDS、Na Cl等的DNA-EB滴加到载玻片上,室温自然蒸发,用凝胶成像系统观察荧光沉积形貌(Deposition Pattern,DP)、计算积分光密度(Integrated Optical Density,IOD),分析量效关系。结果低浓度非DNA成份存在时,DP仍以环状沉积为主,但有年轮环、放射纹等成份特异性细微差异。浓度高时,DP因成份而异,可为环+散在光点型(Na Cl)、中央光斑+弱小环型(SDS)、同心或年轮状多环型(Triton X-100)、环+斑点型(H^+)等。非DNA成份对DNA含量估计有不同程度影响,但估计值多数在0.5~2倍以内。结论样品成份对DNA的DP和IOD均有影响,但不影响DNA含量的粗略估计,且能提供样品纯度和残留物信息。     

PuriTyper~(TM)法医学纯化试剂盒的性能验证

目的验证PuriTyperTM纯化试剂盒各项性能指标和法医学应用价值。方法收集及制备抗凝血液、常见案件检材(唾液、烟头、精液、毛发、指甲、骨骼及组织块)、斑痕样本(血斑、唾液斑、精斑)以及模拟添加抑制剂和模仿自然环境中放置的血斑。采用PuriTyperTM纯化试剂盒提取纯化并进行DNA定量,IdentifilerTM复合扩增试剂盒扩增,产物经ABI 3130遗传分析仪进行检测,Genemapper软件分析结果,对该试剂盒灵敏度、稳定性、重复性、检材适应性进行测试。结果采用该试剂盒提取0.1～40μL血液分别获得0.042～26.45ng/μL的DNA。3种斑痕样本DNA产量平行试验结果稳定。不同类型检材重复检验所获IPC的CT平均值在27.60至28.03之间。常见案件检材所得分型与已知结果均一致。结论 PuriTyperTM纯化试剂盒能够满足法医DNA检验的要求,对法医学实践具有重要的应用价值。     

无精斑证据性犯罪案件其他物证DNA检验(附6例报告)

在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验.但由于种种因素的影响,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性,不能为性犯罪提供有力证据.笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证(如血迹、唾液斑、阴毛等),通过作DNA检验,为案件侦破提供了重要证据.现报告如下: 一、材料 自我室自1997年1月～1999年12月受理的PCR检验强奸案件6例,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等.     

人类备解素B因子的多态性及其法医学意义(综述)

1 概述人类备解素B因子(Human Properdin Factor B, Bf)又称C3激活剂前体(C3PA),富含甘氨酸β糖蛋白(GBG)或β_(2~-)糖蛋白Ⅱ(B_(2~-)glycoprotein),是补体激活旁路激活途径中的一个重要分子,在有Mg~(2+)的存在下,参与补体旁路的激活.     

抗Le~a和抗Le~b血清的研制

利用进口抗Le~a、Le~b血清筛选OLe(a+b-)和OLe(a-b+)型人,测定其唾液中Le~a和Le~b型物质含量,择其型物质含量高者唾液,用家兔和山羊免疫,合格后采全血,分离血清,用O、A、B型红细胞吸收、除去种属及α和β等凝集素。再用O型Le非相应型红细胞吸收,精制出含不完全抗体的抗Le~a和抗Le~b血清。该血清对Le相应型红细胞均产生明显凝集反应,而不发生非特异的交叉凝集反应。经过盲测鉴定,17份红细胞的Lewis型测定完全准确。制备的抗Le~a和抗Le~b血清在效价和特异性方面达到了引进的同种血清水平,填补了我国抗Le~a、抗Le~b血清制造的空白。