草果知母汤加减方及其拆方对戊四唑点燃大鼠脑内NMDAR1 mRNA的影响

目的:探讨草果知母汤加减方及其拆方抗癫痫作用机制.方法:使用戊四唑(pentylenetetrazol, PTZ)点燃大鼠模型,利用原位杂交法定量分析大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl-D-aspartate receptor 1, NMDAR1) mRNA的表达.结果:草果知母汤加减方及其拆方治疗4周后,与模型组比较,全方组和拆方1组海马CA1、皮质内NMDAR1 mRNA表达水平均显著下降(P<0.01);拆方2组仅皮质内NMDAR1 mRNA表达水平显著下降(P<0.01).结论:草果知母汤加减方及其拆方能降低脑内NMDAR1 mRNA表达,从而起到抗癫痫作用.     

针刺对海洛因复吸大鼠脑组织GRP78和CRT表达的影响

目的 观察针刺百会、大椎穴对海洛因复吸大鼠脑组织糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78，GRP78）和钙网织蛋白（calreticulin，CRT）的影响，探讨针刺干预海洛因脑损伤的机制。方法 将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、依赖组、模型组、针刺组和药物组，每组8只。按重复3次“染毒→戒断”的方法复制海洛因复吸大鼠模型。于实验第46天取各组大鼠海马、中脑腹侧被盖区（ventral tegmental area，VTA）脑组织，分别运用荧光RT-PCR和Western blot法，观察各组大鼠海马和VTA区GRP78和CRT蛋白及其mRNA表达水平。结果 与正常组比较，模型组和依赖组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著降低（P<0.05）；与模型组比较，针刺组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著增高（P<0.05）；针刺组与药物组比较，仅海马CRT mRNA表达水平的差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 针刺干预海洛因脑损伤的机制与其上调海马和VTA中CRT、GRP78的表达水平有关。     

刺血加艾灸疗法对急性痛风性关节炎大鼠外周血单个核细胞TLR2与TLR4mRNA表达的影响

目的 探究刺血加艾灸疗法治疗急性痛风性关节炎的作用机制。方法 将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、刺血艾灸组，每组10只，采用尿酸钠混悬液右后踝关节注射法复制痛风性关节炎大鼠模型。分别在模型复制时、模型复制后24 h及灌胃治疗后3 d测量右后足肿胀度；灌胃3 d后，从腹主动脉取血，检测血清尿酸（uric acid，UA）含量及外周血单个核细胞中Toll样受体2（toll-like receptor 2，TLR2）和Toll样受体4（toll-like receptor 4，TLR4）mRNA的表达水平。结果 与正常对照组比较，模型组大鼠足肿胀度，血清UA含量及TLR2、TLR4 mRNA表达水平均显著上调（P<0.01）。刺血艾灸组足肿胀度，血清UA含量，TLR2、TLR4 mRNA表达水平较模型组均显著下调（P<0.05，或P<0.01），且显著低于秋水仙碱组（P<0.05，或P<0.01）。结论 刺血加艾灸疗法能够降低痛风性关节炎大鼠的关节肿胀度及血清UA水平，其机制可能与外周血单个核细胞中TLR2与TLR4 mRNA的表达水平下调有关。     

补肾生髓方和益气活血方对局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号通路Nurrl、SMO mRNA及其蛋白表达的影响

目的 探讨补肾生髓方和益气活血方对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达的影响。方法 采用线栓法复制右侧大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注大鼠模型，将大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾生髓方组和益气活血方组。脑缺血2 h后，持续灌注7 d。采用PCR检测额顶叶皮质Nurr1、SMO mRNA表达水平，采用Western blot检测其蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，模型组Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达水平均明显上调（P<0.05）；益气活血方组和补肾生髓方组Nurr1 mRNA及其蛋白、SMO蛋白相对表达水平均较模型组明显下调（P<0.05）；模型组、益气活血方组和补肾生髓方组SMO mRNA相对表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；益气活血方组与补肾生髓方组Nurr1、SMO蛋白表达水平有显著差异（P<0.05）。结论 补肾生髓方和益气活血方促进脑组织修复的作用与其下调Notch信号转导通路中Nurr1、SMO mRNA及其蛋白表达有关。     

加减薯蓣丸对血管性痴呆模型大鼠海马区GSK-3β Cyclin D1表达的影响

目的 观察加减薯蓣丸对血管性痴呆（vascular dementia，VD）模型大鼠海马区糖原合酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达的影响，探讨其防治VD的机制。方法 将40只SPF级雄性Wistar大鼠分为正常组、模型组、西药组和中药组，每组10只。采用改良双侧颈总动脉结扎法复制VD模型。中药组、西药组分别给予加减薯蓣丸、尼莫地平灌胃，正常组和模型组均给予生理盐水灌胃，均连续灌胃6周。光镜下观察大鼠海马神经细胞的组织形态学变化，Western-blot法检测海马区GSK-3β表达水平，免疫荧光法检测海马区Cyclin D1表达水平。结果 光镜下可见中药组、西药组VD大鼠海马神经细胞病变较模型组明显减轻。Western blot和荧光免疫法显示，中药组、西药组VD大鼠海马区GSK-3β水平较模型组显著降低（P<0.05），海马区Cyclin D1表达水平较模型组明显升高（P<0.05）；中药组与西药组GSK-3β、Cyclin D1表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 加减薯蓣丸可能通过激活Akt通路抑制GSK-3β表达，上调Cyclin D1表达，从而保护VD大鼠海马神经细胞。     

扶正益气中药对脾虚大鼠脑内IL-6Rα水平及其基因表达的影响

目的 研究脾虚大鼠脑内白介素-6受体α(interleukin-6 receptor α,IL-6Ra)水平及其mRNA表达的变化,以及扶正益气中药的干预作用.方法 将40只SPF级雄性Wistar大鼠分为正常组、模型组、治疗1组(四君子汤治疗)、治疗2组(玉屏风散治疗).采用耗气破气、饮食失节、劳倦过度结合的方法,复制脾虚动物模型;采用免疫组织化学法测定大鼠脑内IL-6Rα水平,原位杂交法测定大鼠脑内IL-6Rα mRNA表达的变化.结果 与正常组比较,模型组大鼠海马CA1区和下丘脑腹侧核IL-6Ra水平及IL-6Rα mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,治疗1组和治疗2组IL-6Rα水平及IL-6Rα mRNA表达水平显著降低(P<0.01);治疗1组与治疗2组IL-6Ra水平及IL-6Rα mRNA表达水平比较,差异无显著性.结论 脾虚可导致IL-6Rα水平及其mRNA表达水平异常,扶正益气类中药四君子汤、玉屏风散可以通过调节IL-6Rα水平及其mRNA表达水平,改善机体防御功能.     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织UCP2 mRNA及蛋白表达的影响

目的观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨疏肝健脾方药治疗NAFLD的作用机制。方法采用高脂饲料喂养12周复制雄性SD大鼠NAFLD模型,将模型大鼠分为疏肝组、健脾组、疏肝健脾综合组(综合组)、三七脂肝丸组(三七组)、模型组,各组给予相应治疗8周。测定各组大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇含量。采用RT-PCR方法检测肝组织UCP2 mRNA的表达,免疫组织化学方法检测肝组织中UCP2蛋白活性变化。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织中UCP2 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,疏肝组、健脾组和综合组UCP2 mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。模型组肝组织UCP2蛋白表达水平显著升高;与模型组比较,各用药组UCP2蛋白表达水平均显著下调(P<0.01)。结论疏肝健脾方药可使NAFLD大鼠肝组织中UCP2基因和蛋白表达水平降低。     

抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肝脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的观察抵当陷胸汤通过调节TGF-β1/Smad3信号通路干预糖尿病大鼠肝纤维化病变的部分机制。方法根据数字随机表法将34只SD大鼠分为空白组(10只)、模型组(8只)、抵当陷胸汤组(8只)和ALT-711组(8只),按55mg/kg剂量腹腔单次注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病模型,予以相应的药物每天按相应剂量经胃灌药,于第8周末,麻醉后取材。采用Western blot法和实时荧光定量PCR法分别检测大鼠肝脏转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及其信号蛋白Smad3蛋白及其mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠肝组织TGF-β1、Smad3蛋白及mRNA表达水平均明显上调(P<0.05),p-Smad3蛋白表达水平明显上调(P<0.05);与模型组比较,抵当陷胸汤组和ALT-711组大鼠肝脏组织TGF-β1、Smad3蛋白及mRNA表达水平均明显下调(P<0.05),p-Smad3蛋白表达水平明显下调(P<0.05);抵当陷胸汤组和ALT-711组大鼠肝脏组织TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白及TGF-β1、Smad3mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抵当陷胸汤通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路激活干预糖尿病肝纤维化病变。     

养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠肾小球足细胞TGF-β1、p27蛋白及其基因表达的影响

目的 从足细胞途径探讨养肝益水颗粒改善高血压肾损害的作用机制。方法 将64只自发性高血压大鼠随机分4组，每组16只，即养肝益水颗粒高、低剂量治疗组，贝那普利组，模型组，并选取16只WKY大鼠作为正常组。检测实验前后各组大鼠的血清肌酐（serum creatinine, SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen, BUN）水平；采用RT- qPCR检测大鼠肾皮质转化生长因子（transforming growth factor beta 1,TGF- β1)、p27 mRNA表达水平；Western blot检测大鼠肾皮质TGF- β1、p27蛋白表达变化。结果 治疗前后各组自发性高血压大鼠SCr、BUN水平显著高于正常组（P＜0.05）；治疗后，养肝益水颗粒高、低剂量组，西药组大鼠SCr、BUN水平均显著降低（P＜0.05），但3组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。模型组肾皮质p27蛋白、p27 mRNA及TGF- β1 mRNA、TGF- β1蛋白表达水平均明显高于正常组（P＜0.05）；治疗后，养肝益水颗粒高、低剂量组相比，高剂量组肾皮质p27蛋白及p27 mRNA表达水平均降低（P＜0.05）；肾皮质TGF- β1 mRNA、TGF- β1蛋白相对表达水平显著降低（P＜0.05）。结论 养肝益水颗粒通过下调TGF- β1、p27的表达，调节足细胞的增殖和凋亡，维持足细胞正常形态和结构，从而达到保护肾脏的目的。     

通督调神针灸法对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠皮质区CD34、CD133及血清VEGFR-2表达的影响

目的 探究通督调神针灸法对局灶性脑缺血再灌注模型（middle cerebral artery occlusion model/reperfusion model,MCAO/R）大鼠脑保护及血管新生的作用。方法 将150只SD大鼠随机分为假手术组、通督调神针灸组、常规针刺组、通心络药物组和模型对照组,每组30只。通督调神针灸组取百会穴艾灸,大椎穴刺络放血;常规针刺组选取风池、曲池、合谷、足三里、三阴交针刺治疗;通心络药物组予以通心络胶囊,每日每次1.0 g/kg灌胃。假手术组、模型对照组不予治疗;其余各组每日治疗1次,共28 d。治疗第7、14、21、28天处死大鼠立即取脑,脑组织石蜡包埋后切片,免疫组织化学法检测缺血皮质区CD34、CD133阳性表达,采用ELISA法检测VEGFR-2的表达。结果 MCAO/R大鼠缺血皮质区CD34、CD133及血清VEGFR-2表达量在第7天较高,随后逐渐降低;通督调神针灸法、常规针刺及通心络药物均可不同程度促进MCAO/R模型大鼠缺血皮质区CD34、CD133及血清VEGFR-2表达（P<0.05）,且通督调神针灸法促进MCAO/R模型大鼠缺血皮质区CD34、CD133及血清VEGFR-2表达水平高于常规针刺及通心络药物（P<0.05）。结论 通督调神针灸法能有效促进MCAO/R大鼠缺血皮质区CD34、CD133及血清VEGFR-2表达。     

通督调神针法结合夹脊穴治疗脑卒中后痉挛性瘫痪

目的 观察比较通督调神针法结合夹脊穴与单纯通督调神针法治疗脑卒中后痉挛性瘫痪的疗效差异。方法 将61例患者随机分为观察组（通督调神针法结合夹脊穴）31例和对照组（单纯通督调神针法）30例，两组患者均给予康复治疗，对照组针刺取督脉穴百会、风府、水沟、大椎、至阳、腰阳关为主穴；观察组在对照组基础上结合夹脊穴针刺，取颈2—7、腰1—5夹脊穴，双侧交替针刺，每日针刺1次，每次40 min，每周6次，共治疗4周。两组患者均采用简易Fugl- Meyer运动功能量表和修订的Barthel指数（Barthel index，BI）量表评定运动功能，比较两组的疗效差异。结果 治疗4周后，观察组肢体痉挛改善程度与对照组相当，差异无统计学意义（P>0.05）；两组治疗后Fugl- Meyer和BI评分均较治疗前显著升高（P<0.05），观察组治疗后Fugl- Meyer和BI评分较对照组升高更为显著（P＜0.05）。结论 通督调神针法结合夹脊穴在改善脑卒中后痉挛性瘫痪患者的痉挛状态方面与单纯通督调神针法疗效相当，但在提高肢体运动功能和日常生活活动能力方面，通督调神针法结合夹脊穴均优于单纯通督调神针法。     

低频脉冲穴位电刺激联合通督调神针刺治疗脑卒中后失语临床观察

目的 观察低频脉冲穴位电刺激联合通督调神针刺治疗对脑卒中后失语患者语言功能、交流能力及生存质量的影响.方法 将60例患者随机分为两组,两组均采用基础语言康复训练,观察组加用低频脉冲穴位电刺激联合通督调神针刺治疗,对照组加用传统针刺治疗,均治疗2周.比较两组患者治疗前后西部失语成套测试(western aphasia battery,WAB)失语商、日常生活交流能力(communicative abilities in daily living,CADL)评分、脑卒中失语症患者生活质量量表(stroke and aphasia quality of life-39 generic version,SAQOL-39g)评分.结果 与治疗前比较,两组患者治疗后WAB失语商、CADL评分、SAQOL-39g评分均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).观察组治疗后WAB失语商、CADL评分、SAQOL-39 g评分升高值均大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 低频脉冲穴位电刺激联合通督调神针刺治疗可提高脑卒中后失语症患者的语言功能、交流能力及生存质量.     

通督调神针刺法对血管性轻度认知障碍患者血清脑源性神经营养因子和血浆同型半胱氨酸的影响

目的 观察通督调神针刺法对血管性轻度认知障碍患者的疗效，以及对血清脑源性神经营养因子（brain derived neural nutrition factor，BDNF）、血浆同型半胱氨酸（homocysteine， Hcy）水平的影响。方法 将61例血管性轻度认知障碍患者随机分为治疗组（31例）和对照组（30例），对照组患者口服药物多奈哌齐治疗2个月，治疗组除口服多奈哌齐外还予通督调神针刺法治疗4个疗程。采用简易智力状态检查（mini-mental state examination，MMSE）量表、蒙特利尔认知评估（Montreal cognitive assessment，MoCA）量表评价患者治疗前后认知水平变化，采用酶联免疫吸附法检测血清BDNF水平，循环酶法检测血浆Hcy水平。结果 与治疗前比较，治疗后两组患者MMSE评分、MoCA评分均明显增加（P＜0.05）；治疗组与对照组MMSE和MoCA评分差值比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。与治疗前比较，两组患者治疗后血清BDNF水平显著升高，血浆Hcy水平显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）；治疗组血清BDNF水平升高程度、血浆Hcy水平降低程度均显著大于对照组（P＜0.05）。两组基于MMSE评分的疗效比较，治疗组优于对照组（P＜0.05）。结论 通督调神针刺能够提升血管性轻度认知功能障碍患者的认知功能评分，提高相关细胞因子的表达水平，降低相关危险因素的影响。     

通督调神针法配合热敏灸治疗脑卒中后痉挛性瘫痪40例

目的 比较通督调神针法配合热敏灸与单纯通督调神针法治疗脑卒中后痉挛性瘫痪的临床疗效。方法 将80例患者随机分为治疗组（通督调神针法配合热敏灸）和对照组（单用通督调神针法），每组40例。两组患者均给予基础疾病的常规治疗，对照组以风府、大椎、百会、腰阳关、至阳为针刺主穴；治疗组在对照组基础上配合热敏灸，取穴范围为肩髃、天井、三阳络、外关、阴陵泉、悬钟附近的热敏点，灸至热敏现象消失。治疗前及治疗4、8周末，分别采用改良的Ashworth量表（modified Ashworth scale, MAS）评定肢体痉挛程度，采用修订的Barthel指数(modified Barthel index, MBI)评定日常生活能力，采用改良的Rankin量表评定脑卒中后残疾程度，采用美国国立卫生研究院卒中量表（National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)评定神经功能的缺损程度，采用临床痉挛指数（clinical spasm index，CSI）评定脑卒中后肢体痉挛程度。结果 随治疗时间延长，两组患者MAS分级逐渐改善，MBI评分逐渐升高，改良Rankin、NIHSS和CSI评分逐渐降低；广义评估方程分析结果显示，治疗组在改善MAS分级方面明显优于对照组（P<0.05）；治疗4周末，治疗组患者MBI评分显著高于对照组（P＜0.05），改良Rankin和CSI评分显著低于对照组（P＜0.05）；治疗8周末，治疗组仅CSI评分显著低于对照组（P＜0.05）。结论 通督调神针法配合热敏灸可改善脑卒中后痉挛性瘫痪患者的肢体痉挛和日常生活能力，两者具有协同作用。     

超声引导下针刺八髎穴联合通督调神针法治疗脑卒中后尿失禁临床观察

目的 观察超声引导下针刺八髎穴联合通督调神针法治疗脑卒中后尿失禁的疗效。方法 将60例脑卒中后尿失禁患者随机分为试验组和对照组,每组30例,试验组采用通督调神针法联合超声引导下针刺八髎穴治疗,对照组采用通督调神针法联合传统方法针刺八髎穴治疗,每日1次,每周治疗6 d,共治疗4周。采用国际尿失禁咨询委员会尿失禁问卷简表(the International Consultation on incontinence questionnaire-short form,ICI-Q-SF)评价漏尿情况和排尿次数,采用排尿日记观察日间和夜间的尿失禁次数和排尿次数,基于治疗后ICI-Q-SF评分下降率判定临床疗效。结果 与治疗前比较,两组患者治疗后ICI-Q-SF评分,日间、夜间排尿次数和尿失禁次数均显著降低（P＜0.05）,且试验组上述指标下降程度显著大于对照组（P＜0.05）。试验组基于ICI-Q-SF评分的疗效显著优于对照组（P＜0.05）。结论 超声引导有助于八髎穴定位,提高八髎穴针刺联合通督调神针法治疗脑卒中后尿失禁的疗效。     

通督调神针法联合经筋结点放血治疗脑卒中后痉挛性瘫痪30例

目的 观察通督调神针法联合经筋结点放血治疗脑卒中后痉挛性瘫痪的临床疗效.方法 将60例脑卒中后痉挛性瘫痪的患者随机分为治疗组和对照组,各30例.对照组予以通督调神针法治疗,治疗组在通督调神针法的基础上予以经筋结点放血治疗.治疗前后分别采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institution Health Stroke Scale,NIHSS)评价神经功能缺损情况,采用改良Ashworth痉挛分级量表(modified Ashworth scale,MAS)评价肢体痉挛程度,采用简式Fugl-Meyer评定法(Fugl-Meyer assessment,FMA)评价脑卒中后运动功能障碍程度,并观察临床疗效.结果 与治疗前比较,两组患者治疗后NIHSS评分、MAS等级显著降低(P<0.05),FMA评分显著升高(P<0.05);治疗组治疗后NIHSS评分、MAS等级降低程度显著大于对照组(P<0.05),FMA评分升高程度明显大于对照组(P<0.05).治疗组临床疗效显著优于对照组(P<0.05).结论 通督调神针法联合经筋结点放血可显著改善脑卒中后痉挛性瘫痪的痉挛状态及运动功能,且优于单纯通督调神针法治疗方案.     

通督调神针法对轻度认知障碍患者注意网络功能的影响

目的 探讨通督调神针法对轻度认知障碍（mild cognitive impairment,MCI）患者注意网络功能的影响。方法 将60例MCI患者随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组接受常规针刺治疗,治疗组接受通督调神针刺疗法,疗程均为8周。治疗前后分别进行注意网络功能检查。结果 两组患者治疗后警觉效率和正确率均较治疗前显著升高（P<0.05）,两组治疗后执行控制效率和总反应时均较治疗前显著降低（P<0.05）,治疗组警觉效率、执行控制效率、总反应时和正确率的治疗前后差值均显著大于对照组（P<0.05）。结论 通督调神针法可一定程度恢复MCI患者的认知功能,其疗效优于常规针刺疗法。     

耳针对血管性痴呆大鼠认知功能及海马神经细胞的影响

目的 动态观察耳针对血管性痴呆（vascular dementia，VD）大鼠认知功能及海马神经细胞的影响。方法 从60只健康雄性SD大鼠中随机选取10只为正常组，其余采用四血管阻断法复制VD大鼠模型，然后随机分为模型组、耳针组、西药组，每组10只。于模型复制后第4天，治疗第30、60天时，采用跳台实验检测各组大鼠的学习记忆成绩，并进行神经行为学评分；于模型复制后第4天、治疗第60天时，光镜下观察各组大鼠海马CA1区神经细胞形态。结果 模型复制后第4天，与正常组比较，模型组大鼠学习记忆成绩、神经行为学评分及海马CA1区锥体存活细胞数差异均有统计学意义（P<0.05）；耳针治疗30、60 d后，与模型组比较，耳针组及西药组大鼠学习记忆成绩、神经行为学评分差异均有统计学意义（P<0.05），耳针组与西药组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗60 d后，耳针组、西药组大鼠海马CA1区锥体细胞存活数与模型组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；耳针组与西药组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 耳针可以提高VD大鼠的学习记忆能力，降低神经行为学评分；耳针可改善变性的海马CA1神经细胞，促进其修复与再生，从而提高VD大鼠学习记忆功能，这可能是临床耳针治疗VD有效作用的可能机制。