circRNA应用于体液斑鉴定的技术可行性研究

目的利用circ RNA检测技术,探索circ RNA分子应用于体液斑迹鉴定的可行性。方法制备精液、唾液、阴道分泌物三种体液斑迹样本,以Qiagen RNeasy Micro试剂盒提取总RNA,经RNase R消化后得到circ RNA,进行逆转录PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测分析。结果制备的体液斑迹样本均可检测到circ RNA分子,提示circ RNA普遍存在于法医常见体液斑迹中,具备一定的应用价值。结论 circ RNA的检测可与现有DNA检测技术兼容,利用其组织特异性,可成为体液斑迹鉴定的新标记,具备重要的研究价值。     

mRNA在体液斑鉴定研究中内参基因的选择与应用

利用mRNA分析技术鉴定生物检材中各种体液斑迹的组织属性来源是近年来法医物证学的一个重要进展。终点逆转录PCR和实时荧光定量PCR技术是法医学实验室常用的mRNA检测技术,为保证实验结果的准确性,研究者通常选用组成性表达的管家基因作为内参,对不同样本提取RNA进行质控和标准化,以正确评估目标mRNA在各样本中的表达量。本文聚焦近年来使用mRNA分析技术进行体液斑迹组织属性来源鉴定的研究报道,对这些工作中内参基因的选择与应用效果进行综述。     

排便后擦拭手纸DNA检验1例

<正>1案例资料1.1简要案情樊某,女,4岁。2011年2月被一男性猥亵,因其之后已洗澡,故提取现场粘有粪便的手纸、樊某当时穿的棉毛裤及樊某血样,要求进行DNA分型检验。1.2 DNA检验DNA提取剪取手纸(P30试验阴性)及棉毛裤上的可疑斑迹(P30试验阳性)少许,用双蒸水浸泡、离心,手纸疑斑迹用Chelex-100法提取DNA并采用磁珠法进     

尿斑的DNA检验1例

1案件简价2006年1月,南方某市一女子被杀;警方在现场勘查中提取到一件部分被液体浸泡的有色毛衣(经当地鉴定该液体为尿液)。为确定这份尿斑为何人所留,办案单位于半年后将以上检材送检,要求进行DNA鉴定。2检验方法检材为现场提取的毛衣1件。在毛衣被液体浸泡之处(有黄色斑迹)分别剪取2处1cm2大小的斑迹(编号为1、1R)各置于1.5ml空离心管中,加入500μl磁珠裂解液(Promega公司)和20μl PK(5mol/L),56℃保温1h,13000r/min离心3min,吸取上清,移入干净的离心管中,此后依照DNA IQTMsystem进行DNA提取,方法详见试剂盒说明书,最后用20μl的…     

Gm抗原检测用于精斑检验一例

安徽省某地人民检察院于1992年11月底送来一强奸案某些物证检材,包括受害人彭某内裤带斑迹布片,彭某和被告人钱某唾液痕、血痕纱布。要求鉴定被害人彭某内裤片上的斑迹是否为人精斑:如果是精斑,则是否为钱某所遗留。     

DNA检案中混合拭子提取方法的优化

正在强奸案中,阴道拭子作为犯罪证据,其重要性不可替代。通常精斑预实验阳性的阴道拭子检材即为混合斑的拭子,分离检验方法是采用差异裂解法(两步法)先除去精子外的其他细胞DNA,保留精子DNA[1],再通过DNA IQTMSystem提取精子DNA,获得纯精子的DNA图谱。但在实际操作中,混合斑中的阴道上皮细胞和精子DNA未作定量检测,使用该方法提取精子DNA时,往往会出现女性DNA去除不干     

应用激光生物检材发现仪提取痕量DNA1例

1案例资料 2013年某日,本地区村民何某家中的一只保险箱被窃。在中心现场提取到口罩一副,怀疑为犯罪嫌疑人遗留,要求进行DNA检验。1.1 DNA检验口罩在自然光下观察,未见可疑斑迹。将检材置于暗室,使用TL-445B台式激光生物发现仪（Tech-Long国际股份有限公司）用445nm纯蓝激光激发,佩戴专用眼镜则见可疑斑迹处出现荧光反应（图1）。     

血痕特异性mRNA标记研究

血痕是案发现场尤其是命案中比较常见的生物物证,而血痕的正确组织来源推断是当前鉴定工作中急需解决的问题。随着法医物证学的不断发展,以mRNA(messenger RNA)为基础的体液斑迹组织来源鉴定技术作为一种不同于传统血痕免疫学检测的新型方法,已经越加显示其独特的优越性。在该技术的基础上,实现共同提取生物物证的RNA与DNA的目标,建立体液斑迹鉴定与DNA分型兼容的方法,有利于现场重建,提高生物物证的证据效力,完善证据链。本研究建立了一个包括血痕总RNA提取、逆转录、荧光特异引物扩增、遗传分析仪电泳检测分析等步骤的血痕来源推断技术平台。实验共采集制备了40份的中国人群(女性)外周血、16份月经血样本,筛选了5个外周血标记:HBA、HBB、GYPA、SPTB、ALAS2,2个月经血标记:MMP7、MMP11,构建了一个囊括外周血、月经血特异标记的荧光复合扩增体系。结果显示mRNA技术为基础的鉴定血痕来源的方法是可行的,并且建立了血痕RNA检验的遗传分析仪结果判读方法。     

咬痕DNA分析1例

对咬痕进行DNA分析 ,国外学者推荐使用两根棉签法[1] 提取 ,即先用湿棉签擦拭咬痕 ,再用干棉签擦拭 ,将两根棉签分别进行DNA提取和扩增 ,以增加检出单一个体基因型的机会。本文作者提取 1例咬痕样本进行DNA分析 ,取得满意结果 ,现报道如下。1　案例资料2 0 0 2年 11月 ,在某地女厕内发现一女尸。尸体衣物被撕毁 ,其乳房、前胸、面颊部位有咬痕 ,女尸内裤有少量血迹。用棉签蘸取少量生理盐水 ,在尸体咬痕上轻轻擦取咬痕斑迹 ,Chelex法提取棉签上的咬痕斑迹和死者心血、内裤上血迹DNA ,用ABIPro filerPlusTM 、Y PLEXTM5试剂 (REL…     

可疑斑迹前列腺特异性抗原检测1例

正1案例1.1简要案情某夫妻携带一张附着有可疑斑迹且潮湿的卫生纸到本鉴定中心,该卫生纸为丈夫在家里客厅垃圾桶中所捡。该夫妻要求检验卫生纸上可疑斑迹中是否有男性精液及女性成分,对其进行DNA检测,并与夫妻双方DNA分型结果进行比对。1.2检验过程及结果通过金标试剂条法对卫生纸上的斑迹进行人精液前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)检验,结果呈阳性(图1),提示该卫生纸上含有人精液或人前列腺液。     

混合斑中女性成分DNA检验2例

<正> 在强奸案的检验鉴定中,只要能从受害人的阴棉、内裤以及现场提取的物品上的精斑成分中鉴定出嫌疑男性的DNA,即可能为案件提供证据。但有时仅有男性DNA成分鉴定还不能完全构成强奸案的必要证据,必须同时鉴定精斑中的女性成分才能提供直接、确凿的证据。现报道两例如下。     

生物检材中DNA损伤及修复研究进展

从犯罪现场遗留的生物斑迹中提取到的DNA样本可能因为长时间暴露于恶劣的环境中而遭受到各种类型的损伤,导致扩增失败不能获得分型结果。对这些受损伤的DNA样本进行修复并提高其检测成功率,是近年来法庭遗传学领域新的研究热点。本文通过对DNA损伤的原因和类型、DNA损伤修复机制、生物检材中DNA损伤修复研究和应用进行综述,希望能对相关研究和应用提供帮助。     

基于微生物标记物鉴别唾液、阴道分泌物的多重荧光标记复合扩增检测体系构建

目的 构建基于微生物标记物的荧光复合检测体系，实现对唾液斑迹、阴道分泌物斑迹的区分鉴别。方法经文献检索结合本实验室前期工作，根据特异性和丰度筛选唾液和阴道分泌物微生物标记物；制备唾液斑迹、阴道分泌物斑迹样本，提取总DNA，利用毛细管电泳技术构建基于微生物标记物鉴别唾液、阴道分泌物的多重荧光标记复合扩增检测体系，并使用体液斑迹样本对体系特异性、灵敏度进行检验。结果 本研究筛选出5个唾液微生物标记物（微黄奈瑟氏菌Neisseria subflava、非典型韦荣氏菌Veillonella atypica、唾液链球菌Streptococcus salivarius、口腔链球菌Streptococcus oralis、凯托卟啉单胞菌Porphyromonas catoniae）和3个阴道分泌物微生物标记物（卷曲乳杆菌Lactobacillus crispatus、加氏乳杆菌Lactobacillus gasseri、短双歧杆菌Bifidobacterium breve），利用毛细管电泳技术构建了8重微生物荧光标记复合扩增检测体系，并使用140份样本对体系特异性进行验证；测试结果显示，唾液和阴道分...     

DNA亲缘关系分析在凶杀案件中应用1例

1案例资料2005年9月6日,新疆某县母女俩被杀死在家中。现场勘验时在卧室一长条桌抽屉上发现1枚残缺汗液指纹上粘附微量可疑斑迹,分析极可能为作案人所留,遂将其提取并进行DNA检验,确定为男性个体所留,将其与多名重点嫌疑人的血迹进行STR基因型比对,结果现场指纹上斑迹的STR分型与嫌疑人中阿某(维吾尔族,男,57岁)虽可排除同一,但相似度大大高于无关人群,因此推测作案人有可能与阿某具有亲缘关系。进一步检验住在当地的阿某其他男性亲属(两个兄弟和1个儿子)及其妻子的STR分型,结果均与现场斑迹STR分型不一致,但都提示可能有亲缘关系,进…     

混合斑分型检验结果拆分结合数据库检索比对1例

正1案例资料简要案情王某,女,某日报警称被一名男子强奸。现场提取受害人内裤进行物证检验。DNA分型检验剪取受害人内裤裆部1.5cm×1.5cm左右大小的斑迹,置于1.5m L离心管,加1m L生理盐水震荡涡旋。PSA试纸条检测结果为阳性。离心后,弃去大部分上清,取少量混旋液均匀涂布在载玻片上,甲醛固定后HE复染法染色,显微镜下观察未见精子。     

利用Y-STR检验侦破杀人抛尸案1例

1 案例 1.1案情 某年7月22日8:00许,某县公安局110指挥中心接到群众报警,称某县一桥下水中发现一具被床单包裹并捆绑的男尸.尸体已高度腐败,取肋软骨备检.在层层包裹的床单夹层中,发现一小片卫生纸,经仔细观察发现纸上留有某种斑迹,遂对该斑迹进行血斑和精斑预试验,结果精斑预试验呈阳性.提取该精斑得到一男性DNA,和死者基因型不同,这为破案又找到一个新的突破口,必须在查找尸源的同时查找精斑的身源.     

Clean—Up System在混合斑DNA提取中的应用

强奸案生物物证鉴定中经常遇到混合斑检材的DNA检验，作者在日常检验中用Clean-Up System（promega公司产品）替代混合斑差异裂解后的有机法提取步骤，效果良好，报道如下。     

"接触"DNA在法医STR检验中的研究

目前,在获得法庭DNA证据过程中,经常遇到衣物和床单上提取的混合斑迹分型结果.经由穿着或睡觉者与衣物、床单的接触,含有微量DNA的上皮细胞会遗留在上述物品上.为了评估这些微量"接触"DNA的意义,作者研究了这种正常条件下使用的衣物上微量DNA的转移程度,给实际办案提供参考.     

现场生物斑迹遗留时间推断研究进展

就现场提取的生物检材而言,我们除了需要准确获得DNA STR分型进行个体识别和亲子鉴定,还希望能够通过技术手段获知其遗留时间、空间定位等更多信息。本文以血迹为主要研究对象,就国内外采用光学、细胞生物学、分子生物学等方法推断生物斑迹遗留时间进行总结,并对法医微生物学这一法庭科学新领域在时空线索推断中的应用做以介绍,为现场生物斑迹遗留时间推断研究提供参考。     

两种DNA提取方法检测微量陈旧汗斑1例

与人体接触过的衣、物常常附有体表脱落的上皮细胞成分。有试验证明,人体只要接触物体5秒钟以上,即有可能细胞遗留在物体上,也就是说,有可能留下核DNA及线粒体DNA[1]。在刑事案件中,如能成功地对有关物品上粘附的脱落上皮细胞的DNA检验,便可为案件的侦查和审判提供重要的线索和证据[2]。作者在实际检案中遇到一例微量陈旧汗斑,通过联合应用两种DNA的提取方法并进行了对比,解决了该案的难题。报道如下:1简要案情2003年初,某女被杀害。现场提取男士夹克衫一件,领后部有可疑油渍样斑迹,考虑此处有穿衣者留下的汗斑。2检验2.1检验材料犯罪…