上海地区人体精子黄递酶_Ⅲ型的遗传多态性研究

Straub提纯一种与NADH或NADPH氧化有关的电子传递酶,具有黄素蛋白特性,命名为黄递酶(Diaphorase,DIA).Caldwell等首先报导了黄递酶的遗传多态性,可分1-1型、2-1型和2-2型三型,由一对共显性基因控制,作者认为此酶为精子细胞和睾丸组织所特有,称为精子黄递酶(sperm diaphorase,SD).Frsher等报导了黄递     

中国人精子黄递酶Ⅲ型的分布及精斑黄递酶Ⅲ型的检出

应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术对辽宁地区200例正常人精子黄递酶Ⅲ型(DIA)的分布进行了研究。其基因频率分别为DIA_3~1=0.6850,DIA_3~2=0.2875,DIA_5~3=0.0275。由阴道液、唾液、乳汁及无精子症精液不能判定DIA_3型。室温保存精斑可检出时限为9个月。     

精浆r—谷氨酰转移酶多态性研究

本次实验采用聚丙烯酰胺阶段梯度凝胶电泳方法,对武汉地区135名无关男性精液γ—GT进行了遗传多态性调查,根据γ—GT的电泳差异,分为1型、2型、2—1型三种常见表现型,1型为靠近正极的单一带,2型为靠近负极的单一带,2—1型为1型带和2型带组成的杂合双带。表现型频率分别为0.156,0.356,0.488,基因频率为γ—GT~1=0.400,γ—GT~2=0.600(P>0.5)。室温下保存8周的精斑,也能检测出较清晰的谱带。本次实验还探讨了单纯阴道分泌物及精液、阴道分泌物混合斑进行γ—GT分型的可能性。     

应用淀粉/琼脂糖混合凝胶电泳同步检测红细胞EsD和GLOI表型

1973年 Hopkinson 等采用淀粉凝胶电泳发现 EsD(Esterase,酯酶 D)有三种表型即1—1;2—1;2—2型。1975年 K(?)mpf 等也发现了 GLOI(Glyoxala-se Ⅰ,乙二醛酶Ⅰ)同样具有1—1;2—1;2—2三种表型。由于它们都具有遗传多态性,作为遗传标记,受到人类学家、     

孕早期绒毛膜PGM_1多态性研究

我们采用混合淀粉凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳的方法,分析了妊娠早期绒毛细胞及父母红细胞的葡萄糖磷酸变位酶-1(PGM_1)的多态性。结果证明妊娠早期绒毛中可查出 PGM_1酶型,按孟德尔法则遗传。共观察到3种常见遗传表型和10种常见亚型。     

异体骨髓移植引起红细胞酶型变化一例

余某，女，21岁，诊断为“急性早幼粒白血病”。1993年12月在医院接受其胞妹的骨髓移植（均为“B”型血）。为了观察异体骨髓在余某体内的生长状况及其外周血红细胞酶型的变化过程，我们于手术前及术后40天、100天分三次抽取其少量静脉血制成干血纱布样本，另取供髓者的血纱布作为对照，利用同功酶电泳技术，测定其红细胞酶型中的酯酶D（ESD）、乙二醛酶（GLO1）及磷酸葡萄糖变位酶（PGM1）的表现型，与供髓者的酶型相比较。一、仪器和方法1．仪器：LKB－2117型电泳槽、LKB—2119型冷却循环装置、LKB－2297型电源。2．样本处理：从…     

武汉地区211例GLOI分型调查

应用淀粉/琼脂糖凝胶平板电泳法对武汉地区211例献血员作了红细胞乙二醛酶Ⅰ(GLOI)的分型调查.3个常见表现型的分布为GLOI 1-1型7例(3.32%)、2-1型52例(24.64%)、2-2型152例(72.04%).基因频率GLOI~1=0.1564,GLOI~2=0.8436.识别能力(DP值)为0.4192. 人类红细胞GLOI(Glyoxalase I)具有遗传多态性,它是由人类第6号染色体上一对等显性等位基因GLOI~1和GLOI~2所控     

河南汉族群体DYF403S1和DYF404S1序列分析及多态性

目的调查2个新的多拷贝基因座DYF403S1和DYF404S1在240例河南汉族群体无关男性个体中的遗传多态性,评价其法医学应用价值。方法用6-FAM荧光染料标记引物,PCR扩增产物采用ABI 3500遗传分析仪检测,根据分型检测结果,分别对2个基因座的不同等位基因进行序列分析。结果 DYF403S1基因座为4拷贝,该基因座包含2种核心序列并表现出2种不同的基序,等位基因分别为23~33、38~53。DYF404S1基因座为双拷贝,等位基因为11~18。本研究中2个多拷贝基因座组成的联合单体型共229种,出现最多的单体型为26-28-29-48/14-15,频率是0.016 7,仅出现1次的单体型共220种,占91.67%。单体型多样性(HD)和个体识别力(DP)分别为0.999 6和0.995 4,单体型辨别能力(DC)为0.954 2。结论 2个多拷贝基因座DYF403S1和DYF404S1在河南汉族群体中具有较高的遗传多态性。     

汉族与藏族群体PON基因座遗传多态性

有机磷农药是广泛应用于农业生产的有效杀虫剂 ,也作为杀菌剂或杀鼠剂与人类日常生活密切相关 ,常引起各种性质的中毒事件发生。对硫磷(parathion)是具有代表性的剧毒有机磷农药 ,其在体内生成对氧磷 (paraoxon ,POX) ,使毒性进一步增加[1] 。人肝脏合成的对氧磷酶 (paraoxonase ,PON)可分解对氧磷 ,并降低其毒性。由于PON基因的突变 ,编码合成具有多态性的两种同工对氧磷酶 ,使酶的分解活性存在差别[2 ] 。PON基因座多态性很有可能成为法医学个体识别和亲子鉴定的一个有价值的遗传标记 ,在中毒程度鉴定分析中也有参考价值。鉴于国内还…     

基因多态性、饮酒种类与乙醇代谢的相关性CSCD

目的探索ADH1B和ALDH2基因多态性以及饮酒种类对乙醇代谢的影响,为司法鉴定实践中涉及乙醇代谢结果解释或对血乙醇含量回推的案件提供数据支持。方法筛选出81名志愿者,通过多重SNa Pshot分型方法获得ADH1B、ADH1C和ALDH2的基因型。饮酒剂量为1.0 g/kg,在饮酒前以及饮酒后30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、7 h和8 h静脉采血1 m L,通过顶空气相色谱法检测血中乙醇和乙醛的浓度,计算血乙醇达峰时间(T_(max))、乙醇峰值质量浓度(C_(max))、乙醇曲线下面积(area under curve,AUC_(乙醇))、AUC_(乙醛)和乙醇消除斜率(β)。为排除ADH1C基因多态性的干扰,选择携带ADH1C*1/*1基因型的个体,根据ADH1B和ALDH2的基因型分组,对各组上述参数进行单因素方差分析,并运用最小显著差异法进行组间比较,基因间的相互作用关系采用双因素方差分析。对3种饮酒种类(白酒、红酒和啤酒)组间的各参数进行随机区组设计方差分析。结果不同ADH1B和ALDH2基因型组间T_(max)和C_(max)差异无统计学意义,部分基因型组间AUC_(乙醇)、β和AUC_(乙醛)差异有统计学意义。个体饮相同剂量不同种类酒时,各组间各参数差异均无统计学意义。结论乙醇代谢受相关基因多态性影响较大,基本不受饮酒种类的影响。     

中国人血清脱氧核糖核酸酶I(DNase I)的遗传多态性研究

应用薄层PAGIF（T=5％，C=3％）结合特异酶底物染色技术，调查了中国随机人群DNaseI遗传多态性的分布，检出在中国人群中两种常见的等位基因，即DNaseI*1和DNasel*2，其基因频率DNaseI*1为0．53，DNaseI*2为0．47。家系分析表明：子代个体谱带分别来自父亲和母亲，谱带在亲代和子代之间的传递符合孟德尔遗传规律。按Hardy－Weinberg法则进行吻合度检验，观察值与期望值一致。人血清DNaseI等电点经测定为4．0。     

广东汉族人群H19基因上游差异甲基化区SNP

目的调查广东汉族人群中H19基因上游差异甲基化区(differentially methylated region,DMR)的单核苷酸多态性(SNP)及单倍型。方法应用PIA分型法,以限制性内切酶Mcr BC、HpaⅡ消化基因组DNA分别获得个体单亲源DNA模板链,经测序,分别获得个体H19基因上游DMR单亲源SNP等位基因、基因型及单倍型数据。结果共检出13个SNP(rs10840167、rs2525883、rs12417375、rs4930101、rs2525882、rs2735970、rs2735971、rs11042170、rs2735972、rs10732516、rs2071094、rs2107425、rs4930098)及1个突变点(g7351c)。所有位点经统计学分析均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。除rs12417375位点DP值为0.279,其余12个SNP DP值在0.446~0.614;g7351c突变点DP值为0.013,提示为南方汉族民族特异性位点。共检出8种单倍型(命名为单倍型1~8),其中有3种为新发现的单倍型,其DP、PIC、PE及H分别为0.891、0.714、0.524和0.758。结论 PIA分型法获得的H19基因上游DMR SNP位点及其单倍型遗传标记系统具有较高的鉴别能力,在法医学鉴定中具有较好的实用价值。     

珠海地区汉族人群10个Y-STR基因座的多态性

目的 调查珠海地区汉族人群10个Y-STR基因座及其单倍型的遗传多态性，探讨其法医学应用价值。方法 应用Y-PLEX荧光标记复合扩增系统，对珠海地区汉族200名无关男性个体进行10个Y-STR基因座的复合扩增，用ABI310型基因分析仪对扩增产物进行检测，统计10个Y-STR基因座的群体遗传学参数。结果 9个Y-STR基因座分别检出5、6、6、5、4、5、5、5、7个等位基因，DYS385基因座检出44种单倍型；GD值最低为0.3904(DYS391)，最高为0.9497(DYS385)；10个Y-STR基因座共同构成的单倍型161种，其中134种单倍型只出现1次，20种单倍型出现2次，3种单倍型出现3次，3种单倍型出现4次，1种单倍型出现5次，累计GD值为0.9948。结论 10个Y-STR基因座具有较高的个体识别能力，可应用于法庭科学中的个体识别与亲权鉴定。     

大连地区汉族人群4个STR基因座的多态性

采用 310型DNA全自动测序仪 ,选用商品化试剂盒AmpFeSTRTM Confiler (PE公司 ) ,复合扩增D16S5 39、CSF1PO、TPOX和TH0 14个STR基因座 ,对大连地区汉族人群进行了基因频率调查 ,现将调查结果报道如下。1　材料和方法6 10份血液来源于大连市中心血站无关个体 ,采用chelex 10 0法[1] [2 ] 提取DNA后采用 310型DNA全自动测序仪 ,按AmpFeSTRTM Confiler试剂盒说明书进行扩增和检测。用GenescanTM 分析软件分析结果并自动比对。2　结果与讨论4个STR基因座的等位基因在大连地区汉族人群中的分布频率见表 1;杂合度 (H)、H期标…     

应用等电聚焦电泳对人精液黄递酶Ⅲ表型分布的研究

应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳对武汉地区198例成人精液黄递酶Ⅲ(DIA_3)作了分型。观察到4种表现型,基因频率分别为DIA_3~1=0.7727;DIA_3~2=0.2172;DIA_3~3=0.0101。对保存精斑进行检测证实,室温下保存9周的精斑仍能作DIA_3分型。在聚丙烯酰胺凝胶中引入分离剂HEPES,提高了分辨率。改进后的等电聚焦技术尤适于DIA_3基因产物的分离。文中还调查了我国汉族人群DIA_3频率分布,并与其它群体资料作了比较。     

荆州地区汉族人群9个STR基因座多态性及法医学应用

本文选择Promega公司的3个复合扩增系统对荆州地区汉族人群进行了基因频率调查,获得了9个STR基因座的群体遗传学参数,报告如下。1材料与方法1.1实验材料1.1.1样本146例汉族无关个体血样来自荆州市各县市区,系本实验室日常检案积累。1.1.2主要仪器设备eppendorf-5331型扩增仪(eppendorf公司);model-4001型电泳仪及SA-32型电泳槽(GIBCO公司)。1.1.3主要试剂Chelex-100(Bio-Rad公司);Taq酶(Promega公司);3个复合扩增试剂盒(Promega公司)。1.2实验方法1.2.1模板DNA的制备所有血样均用5%chelex-100快速提取DNA。1.2.2复合扩增扩增总体…     

中国汉族群体人类补体C8A多态性

采用免疫沉淀、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)、被动转印及酶免分析 ,研究了人类补体 C8A等位基因频率在成都地区汉族群体中的分布。 12 1份样本被分为 3种常见型 ,即 C8A- A、C8A- B及 C8A- AB,由两个等位共显性基因 C8A * A及 C8A* B控制 ;同时发现了 2个稀有亚型 ,即 A3亚型及新发现的 Ax亚型。等位基因频率为 C8A* A=0 .5 0 83,C8A* B=0 .4835 ,C8A*稀有型 =0 ,0 0 83。说明 C8A多态性在中国群体中具有良好的分布 ,个人识别率(DP)达到 6 1.14% ,可用于法医学个人识别及亲子鉴定     

印记基因5个SNP分型及亲代来源的检测

目的 采用复合PCR-Snapshot联合甲基化敏感酶切技术,检测印记基因中5个SNP的甲基化状态、印记亲代来源及分型.方法 选择15例亲子鉴定已证实为亲生关系的家系样本,采用单碱基延伸复合检测技术,检测家系样本IGF2AS rs1003483、SNURF rs220028、SNURF rs4906939、DLGAP2 rs6558478、SIM2 rs737380等5个SNP分型,同时选用核酸内切酶(McrBC)和甲基化敏感的限制酶(msRE) HhaⅠ、HpaⅡ消化子代DNA,验证印记基因的亲代来源.结果 经用本文方法检测,证实rs1003483为父源印记;rs220028、rs4906939为母源印记;rs6558478及rs737380未在差异甲基化区,不能确定其印记亲代来源.结论 复合PCR-Snapshot联合甲基化敏感酶切技术简单、高效,在检测多个SNP分型的同时可确定亲代来源,可在相关研究和实践中选用.     

中国汉族人群46个Y-STR基因座多态性与突变调查

目的调查分析46个Y-STR基因座在中国汉族人群中的遗传多态性与突变情况。方法收集中国汉族人群1 008名无关男性个体、1 124对父子共2 165份男性血样。采用Yfiler PlusTM、AGCU Y-24、GFS 24Y 3种复合扩增试剂盒进行46个Y-STR基因座分型,统计各基因座群体遗传学参数与突变情况。结果 1 008名中国汉族无关男性个体,共检出1 001种单倍型,其中994种仅出现1次,总体单倍型多样性值(HD)和识别能力(DC)分别为0.999 986和0.993 1。46个基因座共检出548个等位基因,基因多样性值(GD)在0.432 0~0.953 2之间,37个基因座GD值大于0.6。1 124对父子共检测出51 739次等位基因传递,193对父子41个基因座共观察到214次突变,平均突变率为4.1×10-3(95%CI 3.6~4.7×10-3)。其中一步突变209次(97.7%),两步突变5次(2.3%);175对仅1个基因座发生突变(90.7%)。结论本文46个Y-STR基因座中大多数在中国汉族人群中具有较高的遗传多态性,适合法医学应用,高突变率基因座在Y-STR数据库家系查询与父系鉴定应用中应予以关注。     

单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定G2m(n)因子及成都地区汉族频率调查

作者应用单克隆抗体,首次建立了检测人类免疫球蛋白同种异型 G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。并调查了成都地区汉族群体 G2m(n)因子的频率。在被调查的517份血清中,G2m(n)因子阳性率为79.69%。由此计算出 G2m(n)基因频率为0.5493,方差为0.0004。