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从血痕、血液、精斑中提取DNA对河南地区随机人群CSFIPO、TPOX和TH01基因座(CTT)进行了基因频率分布调查,现报道如下。1材料与方法137例血样取自河南省血液中心和本实验室检案材料;精斑为本实验室检案积累。采用Chexelx-100处理法提取DNA模板,混合斑中DNA的提取采用两步消化法(‘]。复合扩增采用Promega公司Geneprint试剂盒试剂,按试剂盒说明书操作。扩增产物用4%聚丙烯酸胺变性凝胶分离,恒功率40W电泳1.sh。检测用eromesa公司银染试剂盒,按其说明书操作。通过凝胶中标本扩增带与Promege公司提供的全等位基因标准… 相似文献
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目的建立PCR-RFLP、非变性PAG胶垂直电泳和银染技术进行ABO基因分型的方法体系,并对200名广东汉族人群ABO基因型频率进行了调查。方法用Chelex-100和酚、氯仿抽提法处理样本,PCR扩增后用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳和银染技术检测分型。结果ABO位点特异性扩增片段长度为175bp~210bp,6种基因型频率分布为0.0250~0.4300,杂合度H值为0.5162,个体识别力DP值为0.7111。结论该方法可成功运用于血液、血痕、精斑、毛发、骨组织和混合斑等检材的个体识别及亲权鉴定的检验。 相似文献
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PCR-RFLP技术鉴定ABO基因型的法医学应用研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 建立 PCR- RFLP、非变性 PAG胶垂直电泳和银染技术进行 ABO基因分型的方法体系,并对 200名广东汉族人群 ABO基因型频率进行了调查。方法 用 Chelex- 100和酚、氯仿抽提法处理样本, PCR扩增后用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳和银染技术检测分型。结果 ABO位点特异性扩增片段长度为 175bp~ 210bp, 6种基因型频率分布为 0.025 0~ 0.430 0,杂合度 H值为 0.516 2,个体识别力 DP值为 0.711 1。结论 该方法可成功运用于血液、血痕、精斑、毛发、骨组织和混合斑等检材的个体识别及亲权鉴定的检验。 相似文献
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目的调查山东汉族人群19个STR基因座的群体遗传学资料,为亲权鉴定提供遗传学数据。方法采用GoldeneyeTM20A试剂盒对山东汉族人群中205例无关个体进行基因分型,得到19个STR基因座的等位基因频率及群体遗传学参数。对Identifile一、SinoFilerTM、PowerPlex16和GoldeneyeTM20A4个试剂盒进行比较,并对l例特殊的亲子鉴定案件进行分析。结果获得山东汉族人群19个STR基因座的群体遗传学参数。累积个体识别率(CDP)及累积非父排除率(CPE)从高到低分别为GoldeneyeTM20A、SinoFilerTM、PowerPlex16、IdentifilerTM试剂盒。对实际案件进行分析.作为二联体,IdentifilerTM试剂盒无被排除基因座,而SinoFilerTM、PowerPlex16和GoldeneyeTM20A试剂盒均不能排除父子关系。结论与IdentifilerTM、SinoFilerYn和PowerPlex163种试剂盒进行比较.GoldeneyeTM20A试剂盒效能更高.但不能完全满足二联体鉴定的要求。 相似文献
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HUMCYAR04基因座是Holly等人[1]报道的一个短串联重复序列(STR)基因座。笔者根据本实验室的条件,以中国人为研究对象,进行了此基因座的扩增和频率调查,并用于法医物证常见的血痕、混合斑的检验,取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.血液取自昆明及玉溪地区191名无关汉族个体的静脉血,构椽酸钠抗凝;2混合斑及组织决、血痕血样实验室办案中积累;3.家系血样自愿者提供;4HUMCYAR04序列[1]:5’GGTAAGCAGGTACTTAGTTAGCTAC-3’;5’-GTTACAGTGAGCCAAGGTCGTGAG-3’。由北京赛百盛(美国)生物工… 相似文献
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ABO基因分型及其在法医学中的应用 总被引:4,自引:2,他引:2
为建立一种ABO血型系统基因分型方法,采用PCR-RFLP技术,成功地将ABO系统区分为AA,AO,AB,OO,BB,BO六种基因型。对240名中国汉族无关个体血样的ABO(基因型频率调查结果表明,6种基因型的频率分布为0.0125~0.3834,符合Hardy-Weinbeng遗传平衡法则(P>0.1),其DP值为0.8161。家系分析表明,亲代a、b、o基因传递遵守孟德尔遗传规律。对法医学中常见的血痕、混合斑、骨组织及毛发根部等生物样品进行检测,均能准确判定ABO基因型,并可在实际案件鉴定中应用。 相似文献
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TKM法提取血液DNA调查山西地区人群的HUMTPOX基因座多态性 总被引:1,自引:1,他引:0
采用TKM法提取DNA模板,进行PCR扩增,对山西地区汉族人群的HUMTPOX基因座[1]进行了群体遗传学调查,获得山西地区HUMTPOX基因座的群体遗传学数据。所用方法,结果显示较佳,现报告如下。1材料与方法1.1材料TKM1溶液:10mmol/L,Tris-HCI(pH7.4);10mmoVLKCI;10mmol/LMgC12;Zmmol/LEDTAoTKMZ溶液:TKMI溶液中加0.4mol/LN。CI.10%SDS及NP-40。互.2DNAM取0.sml抗凝血加入0.smlTKMI溶液和12.splNP-40,混匀,室温下离心10min(30O0r/min),奔上清,细胞沉淀中再加TKMI溶液,混匀后再离… 相似文献
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目的探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件。方法存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1~3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1.0mm纸片,分别用ONATyper^TM15Plus试剂盒、Goldeye^TM20A试剂盒和华夏。”试剂盒在标准条件(说明书条件)、优化条件1(标准条件+1μLDMSO)和优化条件2(标准条件+室温浸泡1h)扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率。结果陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均〉97.00%,且均高于新鲜血痕。新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27.22%~31.67%,在优化条件2下,检验成功率相似(〉97.00%),与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异(P〈0.01)。结论新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率。 相似文献
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目的探讨联苯胺血痕预试验处理后样本DNA含量的变化及对STR分型检测的影响。方法选取10名无关个体EDTA抗凝血液制成滤纸血痕,保存干燥时间分0.5h、1h、3h、6h、12h、24h六个实验组,并采用磁珠提取法、QIAcubeDNA提取纯化法、chelex-100提取法提取样本DNA,应用RT-PCR定量技术检测样本DNA含量,同时应用PCR-STR技术和Idfiler-plus试剂盒检测相应样本STR分型。结果联苯胺血痕预试验后处理样本,随保存时间的延长,其样本DNA含量显示逐渐降低的趋势。回归线性对数分析显示,磁珠提取法:Y=-0.40871n(x)+0.7044R0—0.7633;QIAcubeDNA提取纯化法:Y=-0.23931n(x)+0.4764R0—0.8715;chelex-100提取法:Y=-0.11781n(x)+0.2302R2=0.9571。不同DNA提取方法对同一保存时间的联苯胺血痕预试验试剂处理样本DNA含量间差异有极显著性,P〈O.01。结论联苯胺血痕预试验后对后续STR分型影响较大,联苯胺血痕预实验后的血痕不能继续进行STR分型检测。 相似文献
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目的分析中国北方汉族人群21个常染色体STR基因座和1个Y染色体STR基因座的遗传多态性,为个体识别和亲权鉴定提供遗传学数据。方法用GlobalFiler PCR AmplificationKit荧光标记试剂盒对1081例中国北方汉族无关个体的DNA进行PCR扩增.3500XL遗传分析仪电泳分析,用GeneMapperID-X软件分析等位基因片段大小,用Modified-Powerstates.xls分析软件进行等位基因频率和法医学常用参数统计分析。结果在中国北方汉族人群中.21个常染色体STR基因座的遗传多态性高,杂合度(H)分布在0.604~0.939之间,随机匹配率(MP)分布在0.007~0.206之间,个体识别力(PD)在0.794~0.993之间,非父排除率(PE)在0.296~0.875之间,典型父权指数(TPI)在1.26-8.19之间,多态性息含量(PIC)在0.55.0.94之间:DYS391基因座共检出6个等位基因,GD值为0.4158。结论中国北方汉族人群21个常染色体STR基因座具有较高多态性,可以用于法医学亲权鉴定和个体识别,也可以用于人类学和遗传学研究。1个Y染色体STR基因座和1个Y-InDel遗传标记可以辅助判断被鉴定人性别。 相似文献
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应用PCR-SSP方法对辽宁地区159名无关个体进行HLA-DRB1位点基因分型,检出8组等位基因(扩增片段大小为100bp),基因频率范围在0.02201~0.23899。36种可能基因型中检出33种。经x2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律。本地区汉族群体的期望杂合度为85%,观察杂合度为83%。个人鉴别机率(DP)为0.94非父排除率(EPP)为66%。本法具有简单、快速、结果可靠的特点,不仅适用于法医学亲子鉴定和个人识别、移植配型,亦可用于相关疾病及人类遗传学研究。 相似文献
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目的探讨5种免提取试剂盒对滤纸血痕样本检验的效果。方法陈旧滤纸血痕(存放时间12~14个月)及新鲜滤纸血痕(存放时间小于1个月)各920份,分别随机分为5组。应用AGCU 17+1、Goldeneye 20A、Powerplex16HS、Identifiler Plus、Identifiler Direct 5种免提取试剂盒进行检验,对比各组检验结果。结果陈旧滤纸血痕5种试剂盒的检验成功率为98.91%~100%,各组间无差异(P>0.05);新鲜滤纸血痕,Identifiler Plus和Identifiler Direct试剂盒检验成功率高于AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒(P<0.01);将样本做陈旧化处理后再用成功率较低的3种试剂盒进行检验,成功率分别升至100%、99.46%、99.46%;Identifiler Plus试剂盒扩增循环27次效果优于28次。结论本文5种试剂盒均可用于滤纸血痕的直接扩增检验,但使用AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒需将新鲜血痕做陈旧化处理;Identifiler Plus试剂盒需将循环次数降为27次。 相似文献
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用单克隆抗体ELISA按文献提供的方法,调查了贵阳地区汉族人群GZm(23)因子的频率。在239份样本血痕,GZm(23)因子阳性占4728%,计算GZm(23)的基因频率为0.2739,x’为0.00049,识别能力为0.3977。采集资阳地区239份无关汉族人静脉血制成血痕,晾干后放入冰箱内保存,1月内检验。检验结果见表且。GZm(23)广泛稳定地存在于人类血液、体液中,本文调查了贵阳地区GZm(23)因子频率为该地区法医学个体识别提供了一个基础数据。贵阳地区人群GZm(23)基因频率与成都地区人群GZm(23)基因频率0.5493比较显著差异(Pwto.05… 相似文献
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SE33基因座是短串联重复序列STR基因座,位于人类6号染色体长臂,核心序列为AAAG,片段大小在203~333之间。本文对北京地区汉族人群206例无关个体的血样进行SE33基因座多态性调查,现报道如下。1材料和方法206份北京地区汉族无关个体血样。Chelex-100法提取DNA;PowerPlex SE33基因座扩增试剂盒(Promega,美国)(详见试剂盒说明)、9700基因扩增仪扩增;产物用AB I 3100基因分析仪进行分离和检测;Genescan和Genetyper软件进行结果分析。运用统计学计算通用公式[1]进行统计学分析。2结果和讨论206例无关个体的SE33基因座分型结果见表1。表1… 相似文献
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STR系统是人类基因组中具有高度多态性的遗传标志系统,其DNA片段通常小于500hp,很容易通过PCR扩增并进行检测\笔者参照美国Promega公司的HUMCSFIPO-HUMTPOOHUMTHVCTT)三位点复合扩增的方法,在对中国上海地区117例个体作了人群频率调查以后,逐步将该方法运用于血液。血痕、精斑的检验,在凶杀、强奸等刑案及亲子鉴定中起到了证据的作用。材料与方法样品取自刑案中涉及的活体血液150例、死者血液及血痕140例、精斑20例。一、DNA提取1.血液及血痕中的DNA提取取lml无菌水于1.5ml离心管,加入10pl血液或3mmZ血痕,小心… 相似文献