果核微量生物物证DNA检材提取方法的考量

正近年来,犯罪现场物证呈现多样化、微量化的发展趋势。微量物证具有体积小、隐蔽性强、不易察觉、不易毁灭等特点~([1])。目前微量物证DNA检验工作的瓶颈主要在接触性DNA检材的发现和提取上,接触性DNA类生物检材因其DNA含量少、PCR抑制物多、DNA检验成功率低而成为法医DNA检验的重点和难点~([2])。本文结合实际工作中的3起案例,对果核上微量生物物证DNA的提取方法     

96孔过滤板在接触性DNA自动化检验中的应用

目的将96孔过滤板用于自动化工作站,对接触性DNA进行检验。方法收集553份现场提取的附着在烟蒂、饮料瓶、门窗把手、电源网线头、作案工具、手套上的微量接触性生物检材,在96孔过滤板上进行裂解后整体离心,分离载体与裂解液;应用自动化核酸提取纯化仪结合M48磁珠纯化试剂盒提取纯化DNA,采用IdentifilerPlus试剂盒进行扩增,3500XL测序仪电泳分型,ID-X专家系统分析结果。结果在553份检材中,成功获得STR分型的有271份,检验成功率在31.6%~97.3%之间,烟蒂、饮料瓶检材的成功率均在90%以上,提取纯化过程约90min。结论将96孔过滤板用于自动化工作站,可在实现批量接触性DNA的快速、自动化提取的同时,有效提高接触性DNA检出率。     

接触DNA在侦查实践中的应用

随着DNA提取和检验技术的进步与不断发展,犯罪现场遗留的DNA对于刑事犯罪侦查中犯罪嫌疑人的确定有着举足轻重的作用,但同时犯罪嫌疑人的反侦察意识越来越强,在作案过程中以及实施犯罪行为后遗留在现场的物证微乎其微。因此在对现场物证进行采集的过程中,接触性生物物证的发现、提取和DNA检出越来越重要。目前在犯罪现场中接触性检材所占的比例越来越大,对于案件的侦破也发挥着越来越大的作用。然而这些接触性检材一般极其微量、体积小、较为隐蔽、肉眼不易观察,且现场的各种污染大大加快了这种微量检材的降解速率,因此对于这类检材的检验和分析就成了法医物证检验工作的重点和难点。本文综述了接触DNA的种类、采集和提取方法,影响其检出的因素以及检验中遇到的问题,以期能更好地将其运用到法医学鉴定实践中。     

直扩试剂盒检验接触DNA检材初探

<正>接触性微量DNA检材的检验是法医物证学实际检案中的难点,目前所涉及相关检材呈现多样化、微量化趋势[1]。法医学实践中Identifiler Direct直扩试剂盒主要用于违法人员数据库建设,而用于现场检材则较少,用于微量DNA检材则更少。本文总结本实验室近年来采用该试剂盒对接触性微量DNA检材进     

接触性DNA及其现场发现

接触性DNA类检材在案件侦破和法庭证据中的作用越来越重要.本文指出对现场的接触性DNA的发现.提取策略,附着于不同载体上DNA的提取方法以及生物物证污染防控体系建立的探索将有助于此类检材的利用.     

犯罪现场生物检材真伪的分析

随着DNA检验技术的日趋成熟和广泛应用，其在案件侦破中的作用越来越显著，但潜在的隐患也日渐显现，一方面由于DNA检验技术灵敏度的提高，许多微量DNA检材都能得到成功分型；另一方面在不断提高生物检材检验水平的同时，犯罪分子也在时刻注意这些进展，利用生物检材伪装现场、     

EZ-tape在皮肤接触性检材DNA检验中的应用

正接触性检材在法医DNA检验中所占比例日益增大,其中皮肤接触性检材的检验更是其中的热点与难点之一。本研究使用EZ-tape脱落细胞粘取器转移皮肤接触性检材脱落细胞,获得了良好的效果,现总结如下。1材料与方法本实验室日常检案中受理的皮肤接触性检材共164份,其中工具手柄类15份,手印痕迹类72份,绳索类9份,面罩帽子类9份,衣物类18份,手套19份,     

磁珠直接吸附法对体态检材游离DNA的提取

目的采用磁珠直接吸附法对人体尿液、唾液、血液3种体态生物检材中的游离DNA进行提取检验,为法医物证中游离DNA的研究及检验工作提供参考。方法对3种生物检材采取离心吸取上清液的方法分离游离DNA,然后采用磁珠直接吸附法进行提取纯化,Identifiler-Plus试剂盒进行复合扩增后常规STR检测。结果在3种检材中均检出了游离DNA,其中血液中游离DNA检出率为100%,唾液为90%,尿液为70%。结论人体体态生物检材中存在游离DNA,同时磁珠直接吸附法可高效、快捷的提取生物检材中的游离DNA。     

现场大量生物检材的自动化提取应用

正随着司法诉讼进程对证据质量要求的不断提高,重特大案件的现场重建直接导致生物检材的送检量大幅度提升,时效要求也越来越高。而现场送检的生物检材种类繁多,以往应用Chelex-100法手工操作耗时长、易污染,手工磁珠法无法批量进行,传统方式已无法适应形势的要求~([1]),寻求高通量的生物检材DNA自动化提取应用已迫在眉睫。本研究通过采用Auto Lys STAR自动化工作站结合微量检材DNA提取试剂盒建立生物检材DNA自动化检验体系,以实     

改良EVO150-8方法在DNA自动化检案中的应用

目的探讨改良EVO150-8方法在批量生物检材DNA检验中的应用价值,建立一种自动化、简单、快速的DNA提取方法。方法采用改良EVO150-8自动化核酸提取纯化仪器与DNA IQ磁珠法纯化试剂盒,对各现场提取的880份血迹、烟蒂、口香糖、精斑（混合斑）、组织、骨骼、脱落细胞等常见生物检材进行DNA提取与纯化,采用Identifiler试剂盒进行扩增检验,用3130XL电泳,GeneMapper ID V3.2分析软件进行分析比对。结果在880份生物检材中,有836份检材成功获得STR分型;检验92份检材仅需时128min。结论改良EVO150-8适合批量生物检材的自动化提取。     

盗窃案件现场检材提取与DNA检测结果的统计分析

目的统计分析1574例盗窃案件中提取的2496个现场生物检材,为提高DNA在盗窃案件侦破中的应用成效提供参考。方法根据2496个生物检材的类型、现场提取方法、重点提取部位、DNA检测结果等进行统计和分析比较,总结常见类型盗窃案件现场生物检材的主要发现提取部位以及不同方法提取的现场生物检材DNA检出率。结果接触类检材已成为盗窃案件最多见的生物检材类型,但检出率仍然较低,对混合分型应进一步分析筛选以提高DNA的认定率;不同方法提取的现场生物检材在DNA检出率方面存在统计学差异,接触类生物检材以植绒拭子和原物提取的方式为首选;现场生物检材的主要发现提取部位根据盗窃案件的类型不同有所侧重。结论现场勘查人员在盗窃案件中发现和提取到有价值的生物检材是提高DNA检出认定能力的关键因素,应着力培养现场勘查人员的微量生物物证意识,提高现场勘查人员提取和处理微量生物检材的能力。     

唾液斑DNA检验在性侵害案件中的应用

自从STR-PCR技术应用于生物物证的检验,微量生物学检材的DNA检测已成为可能。血液、毛发、骨骼、组织、人体分泌物(精斑、唾液、汗液)等物证检材均可通过DNA检验技术进行基因型分析。注意物证存在的多样性,广泛提取各种DNA物证成为在侦察破案中充分发挥DNA检验技术作用的关键。     

Chelex-100法和QIAcube纯化法在接触性检材检验中的比较

<正>在法医DNA检验中,能否提取到足够浓度与纯度的DNA模板,是决定DNA检验成败的关键之一。本研究分别采用Chelex-100法与QIAamp DNA Investigator试剂盒结合QIAcube核酸自动化提取仪(QIAcube纯化法)提取实际检案中的DNA,同等条件下进行PCR扩增与电泳,比较分析二者的图谱,报道如下。1材料与方法1.1材料65份接触性生物检材来自本实验室日常检案积累,其中瓶口32份,工具手柄18份,绳索衣物类     

05式警用转轮手枪弹壳接触DNA检验方法的比较

目的比较05式警用转轮手枪弹壳表面接触性DNA检验方法,为实际检验提供参考和借鉴。方法制备40例击发后手枪弹壳的模拟样本,分别用两步转移法提取弹壳表面不同部位检材,采用两种DNA提取法和两种扩增试剂盒对样本进行STR分型检验,比较评价检验结果。结果避开发射药残留区域采用两步转移法提取样本,有助于提高检出率;Chelex-100联合Microcon-100法提取模板DNA的产量最高可达1.18ng,高于Mini M48试剂盒法(0.91ng);MiniFilerTM试剂盒的等位基因检出率(23.61%)高于IdentifilerTM试剂盒(6.41%)。结论采用选择适当区域提取检材,采用Chelex-100联合Microcon-100法提取DNA,经MiniFilerTM试剂盒扩增,进行弹壳接触DNA分型的效果较好。     

批量提取微量DNA在案件检验鉴定中的应用3例

随着DNA检验灵敏度的提高,越来越多的案件需进行微量生物检材DNA的检验,本实验室应用96孔板批量提取微量生物检材DNA,大大提高了检案效率,在案件中发挥了重要作用。现介绍如下：1方法1.1 DNA提取取细轴棉棒用TES浸湿棉棒上棉签后擦拭送检物品（如绳索、胶带、打火机、螺丝刀等）上可能有脱落上皮细胞的部位,     

腐败餐厨油污纸屑上DNA检验1例

接触类生物检材因其DNA含量少、污染严重、PCR抑制物多、DNA检验成功率低一直是法医DNA检验的难点之一[1,2]。特别是餐厨纸屑等非常规接触类生物检材,在气温较高,气候潮湿的环境极易腐败。本文通过对腐败餐厨油污纸屑的DNA检验,得到一男性常染色体和Y染色体DNA结果,经数据比对分析,锁定犯罪嫌疑人,成功助破尘封21年之久命案。     

脱落细胞DNA检验破获系列团伙盗窃案1例

正对大部分基层实验室来说,常规生物检材DNA检验技术已经成熟,随着犯罪手段的多样化,反侦察能力的提升,现场发现血斑、精斑、唾液斑等常见生物物证的几率越来越低,要进一步发挥DNA在侦查破案中的作用就要提高对现场疑难检材的检出率。本实验室在实际工作中成功检出一枚指纹DNA分型,成功破获系列团伙盗窃案。1案例资料1.1简要案情及检材提取某年某区(县)发生1起入室盗窃案,经现场勘     

降解生物检材DNA分析策略的研究进展

生物检材发生降解后的DNA分型是法医DNA领域的难题之一。本文对降解检材分析策略的研究进行综述。分析了目前常用的降解DNA分析方法与技术的优缺点,对近年来新出现的方法,如扩增前降解损伤DNA修复策略、扩增后纯化策略和核小体DNA策略做了介绍,希望能为降解生物检材DNA检验的研究和分析提供思路,为相关应用提供新方法的参考。     

定量PCR技术在法医学中应用的研究

目的研究荧光定量PCR技术在法医学中的应用。方法应用Taqman技术对法医各种生物检材进行DNA定量。结果该定量PCR技术对各种法医生物检材进行了准确定量,并判断检材中是否存在抑制物,从而指导了后续STR的检验。结论定量PCR技术是法医DNA检验中一项不可缺少的辅助技术。     

特殊检材的DNA检验3例

法医物证鉴定中,较常见的生物学检材有现场血痕、精斑、毛发、牙齿、香烟过滤嘴及在抵抗中遗留在当事人指甲缝中的生物成分DNA[1].但在实际工作中,发现提取的生物检材复杂多样,对于一些疑难检材在DNA提取方面便成为难点,而这些特殊检材的成功分析往往对案件的定性和侦破起着至关重要的作用.现将3个案例中4份特殊检材的DNA检验报道如下.