ABO基因座限制性扩增片段长度多态性在法科学中的应用

研究ABO基因应限制性扩增片段长度多态性（AmP－RFLP）发现,该基因座在中国人群中有较高的识别能力（DP0．7146）［1］。笔者分别对血斑、混合斑、毛发、组织、唾液等生物检材及其最小量、最长检出时限、组织特异性进行ABO基因座Amp－RFLP分析,获得了令人满意的结果。1材料与方法1．1实验材料1．1．1血斑本实验室1995～1998年保存的20份血痕。1．1．2混合斑各地、市公安局送检的20份强奸案件物证检材（1995～1998）年。1．1．3头发1周内拔取不同个体的头发7份。1．1．4唾液斑本处室采取的7份唾液斑。1．1．5组织块7种同一个体不同…     

三个STR位点复合扩增多态性及法医学应用

STR（shorttandemrepeat），即短串重复序列，广泛存在于人类基因组中，平均每15kb就存在一个STR位点，为法医个体识别和亲子鉴定提供了丰富的遗传标记[1,2]。复合扩增多个多态片段长度不重叠STR位点，可以节约检材，提高单次PCR扩增的信息量。现将我们对三个STR位点（HHUMCSFIPO[AGAT]a，HUMT－POX[AATG]a，HUMTH01[AATG]a）复合扩增分型的研究以及在法医学中应用报道如下。材料和方法一、实验材料无关个体血样取自北京地区汉族个体，家系取自北京郊区两家庭，血痕、混合斑、毛发等为实验室积累，同一个体不同组织脏器…     

50例强奸案混合斑中精子ABO基因分型

自 1990年Yamamoto[1] 报道了ABO基因的核苷酸序列以来 ,国内外学者们致力于建立ABO基因型的测定方法 ,如PCR RFLP法[2 ] 、PCR 直接测序[3] 、PCR SSCP法[4 ] 等。但由于ABO基因分型操作烦琐 ,个体识别率低 ,很少被应用于法庭科学实践。本研究对HerrinG[5] 方法进行改良 ,运用PCR RFLP技术 ,检测 5 0例经STR认定的强奸案混合斑中的精子ABO基因型和犯罪嫌疑人血痕的ABO基因型 ,并探讨ABO基因分型在实际检案中的可信性及应用价值。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　样本　 5 0例强奸案中的混合斑检材和案犯血痕 (北京市公安…     

壮族人群pMCT118基因座基因频率分布

pMCT118（D1S80）基因座位于人类第1号染色体P6位置,是具有高度多态性的VN－TR基因座,已广泛应用于法医学、群体遗传学及器官移植等方面’‘－”。本文作者用PCR结合PAG电泳及银染显带技术调查了该基因座在广西壮族人群中的频率分布资料。1材料和方法1．1血样取广西崇左县三代均为壮族的无关个体血样206份及5个家系血样。所有样本取Zml新鲜血,构缘酸钠抗凝。1．2主要仪器及试剂DNA扩增仪（PE9600型）,核酸电泳系统（Bi。RAD）、Acr、BisTEMED、APS、蛋白酶K、TaqDNA聚合酶及10xbuffer,dNTP（Promega）,pM－CTlls…     

云南省汉族p33.6位点的基因频率调查

P33．6（D；S；；l位点）是Jeffreys等人1988年首先报道的一个VNTR位点，国内陈松等人（1993）“’对IO0名中国汉人进行了此位点扩增，得到了分辨率高、清晰易读的图谱。我们参考了Jeffreys和陈松等人的方法，根据本实验室的条件，以云南省汉人为研究对象，进行了此位点的扩增和频率调查，报道如下。材料和方法1．血液取自昆明及玉溪地区100名无关个体（汉族）的静脉血，构檬酸钠抗凝。2．4个家系12人的血样由玉溪地区人民医院血库提供。3．引物序列为：5’－TGTGAGTAGAGGAGA＊＊T＊＊C＊＊＊一丁；5’＊＊G＊＊A＊＊C＊＊T＊…     

云南怒族人群HPRTB、DXS7423、DXS101基因座遗传多态性

HPRTB、DXS7423、DXS101是X染色体上常见的3个STR基因座,定位于Xq22.1-Xq28,其核心序列分别为AGTA、TCCA和CTT-ATT,本文对3个X-STR基因座的等位基因频率和基因型频率数据进行调查,为法医学检案提供基础遗传频率数据。1材料与方法1.1样本采集100份无血缘关系的怒族健康个体静脉血在云南随机采集,每份3m l,EDTA抗凝,-70℃保存[1]。1.2方法1.2.1 DNA提取及扩增Chelex-100法提取基因组DNA[2]。3个基因座引物序列及扩增条件见表1。表1 3个基因座的引物信息及扩增条件基因座PCR引物序列(5’to3’)变性退火延伸循环数HPRTBA…     

河南地区人群3个基因座的基因频率分布

从血痕、血液、精斑中提取DNA对河南地区随机人群CSFIPO、TPOX和TH01基因座（CTT）进行了基因频率分布调查,现报道如下。1材料与方法137例血样取自河南省血液中心和本实验室检案材料;精斑为本实验室检案积累。采用Chexelx－100处理法提取DNA模板,混合斑中DNA的提取采用两步消化法（‘］。复合扩增采用Promega公司Geneprint试剂盒试剂,按试剂盒说明书操作。扩增产物用4％聚丙烯酸胺变性凝胶分离,恒功率40W电泳1．sh。检测用eromesa公司银染试剂盒,按其说明书操作。通过凝胶中标本扩增带与Promege公司提供的全等位基因标准…     

P33.6位点扩增片段长度多态性的法医学应用

P33．6位点扩增片段长度多态性（Amp－FLP）在中国人群中有很高的识别能力，本实验室继对中国人P33．6位点Amp，FLP[1]报道之后，又对血液、血斑、精液、精斑、混合斑、毛发、唾液等生物检材进行P33．6位点的分析，获得了令人满意的结果。将该方法用于案件的检验，在破案中发挥了重要作用。材料与方法一、实验材料1．收集自愿者提供的精液、精斑和精液与阴道分泌物的混合斑各20份，并同时收集供者血液。所有样品均-4℃保存。2．收集自愿者提供的毛发（20根）、唾液（1份）和血斑（10份），室温保存。二、实验方法1．检材样品的处理（1…     

5个Y-STR基因座复合扩增及其单倍型

多个Y STR基因座复合扩增在国内外已得到应用[1、2 ] 。本文作者报道用银染法复合扩增DYS389II、DYS389I、DYS390、GATA A7 2和DYS393等 5个Y STR基因座 ,并对广东汉族 4 15名无关男性个体进行基因分型调查。1　材料和方法1 1　材料4 15份广东汉族无关男性个体血样来自本室日常检案标本 ,用Chelex 10 0法提取DNA。1 2　引物序列DYS389Ⅱ、DYS389Ⅰ、DYS390、GATA A7 2和DYS393等 5个基因座引物序列见文献 [3、 4 ],由上海生物工程有限公司合成。1 3　PCR扩增条件总体积 2 5 μl,内含dNTP 4 2 0 μmol/L ,MgCl23 0mm…     

法医DNA分型的可重复性

为了了解国内法医DNA分型的可靠性，选择酪氨酸羟化酶基因第1内含子什＂mantyrosinehydroxylasegene,intron1）的短串联重复序列（STR）TH01基因座为遗传标记，在国内5个法医实验室进行了DNA分型的可重复性研究，报道如下。材料与方法一、样本制备和分送国内5个法医实验室参加本次研究工作，由华西医科大学法医学系作为协调单位，负责制备与分送盲测样本。每个法医实验室4份样本，2份为纯化DNA，2份为血痕。血液样品采自成都地区无血缘关系汉族个体，常规方法提取DNA；血痕样本由另外两名个体新鲜血液0．5ml滴于滤纸上制成，室温晾干…     

江西上饶地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性

短串联重复序列（STR）检测已经广泛应用到法医物证学个体识别及亲权鉴定中,本文对485例江西上饶地区汉族无关人群15个STR基因座进行遗传多态性分析,为法医物证学相关研究工作提供数据。1材料与方法 1.1样本及DNA提取随机收集上饶地区汉族健康无亲缘关系滤纸血痕样本485例,其中男性361例,女性124例。采用常规Chelex-100法提取DNA[1]。     

福建汉族人群17个Y-STR基因座遗传多态性调查

本文应用PCR技术对福建汉族189名无关男性的血样进行Yfiler^TM17个STR基因座遗传多态性调查，现报道如下。1材料与方法 1．1实验方法 福建省各地189名汉族男性无关个体的血样，系本实验室日常检案积累。Chelex-100法提取DNA；采用12．5μl扩增反应体系翻；热循环参数参照PowerPlex Y System试剂盒推荐方法。     

中国人pMCT118位点扩增产物HinfⅠ限制性片段长度多态性

pMCT118（又称DIS80）是一个高度多态性的VNTR位点（重复单位16bp，核心序列为GNNGTGGG），位于1号染色体上。用PCR方法分析其多态性，国内外已有报道ti，2］K。s。i等人（‘］通过对pMCTlls位点碱基序列进行分析，发现该位点扩增物正链5’端第61个碱基由C转换成T，引入了Hinfl的酶切位点，使其产生了两种多态性Hinfl十和Hinfl－。本文对中国人pMCTlls位点扩增产物Hinfl限制性片段长度多态性进行了研究，现报告如下。材料与方法1．样品48例中国人无关个体血样由本实验室日常积累，DNA提取用Chelex快速提取法［’］。2．pMC…     

D20S161和D8S384两个基因座在法医学中的应用

评估D2 0S16 1和D8S384两个基因座在法医学中的应用价值。用自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒 ,对人血、人精液、人唾液、动物血、人血与动物血的混合检材和人血痕、人精液斑、人唾液斑、动物血痕、人血与动物血的混合斑痕检材 ,以及陈旧血痕检材进行检测分型 ,并用这两个基因座PCR引物序列与DNA数据库进行联网对比分析。自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒能对人血、人精液、人唾液、人血与动物血的混合检材分型 ,而动物血没有PCR产物 ;自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒能对人血痕、人精斑、人唾液斑和人血与动物血的混合斑痕检材正确分型 ,而动物血痕没有PCR产物 ;斑痕检材分型结果与对应体液检材分型结果无差异 ;5 0份陈旧血痕检材全部获得阳性分型结果。DNA数据库联网比较提示 ,D2 0S16 1和D8S384基因座引物除了能与各自的模板序列发生特异性扩增外 ,理论上不能与DNA数据库中 6 0 6 36 4种已知序列产生PCR产物。D2 0S16 1和D8S384两个基因座具有高度的种属特异性 ,抗污染能力强 ,不易受降解的影响 ,是解决法医现场生物检材个人识别和亲子鉴定的理想手段     

ABO基因分型及其在法医学中的应用

为建立一种ABO血型系统基因分型方法，采用PCR-RFLP技术，成功地将ABO系统区分为AA，AO，AB，OO，BB，BO六种基因型。对240名中国汉族无关个体血样的ABO（基因型频率调查结果表明，6种基因型的频率分布为0．0125～0．3834，符合Hardy－Weinbeng遗传平衡法则（P＞0．1），其DP值为0．8161。家系分析表明，亲代a、b、o基因传递遵守孟德尔遗传规律。对法医学中常见的血痕、混合斑、骨组织及毛发根部等生物样品进行检测，均能准确判定ABO基因型，并可在实际案件鉴定中应用。     

用引物Y_3、Y_4和PCR方法鉴定性别的法医学应用

用Y3、Y4和Alu9．1、Alug．2两对引物和PCR方法检测陈旧血痕和毛根的性别获得成功。引物Y3、Y4扩增的靶序列位于Y染色体特异3．4Kb重复序列中，扩增产物为460bp；引物Alu9．1、Alu9.2用以扩增男女共有的Alu重复序列，扩增产物为130bP。室温保存13年之久的19例脐带血血痕（男性9冽，女性10例）和室温保存10～11个月的10例已知性别自然脱落毛根（男性6例，女性4例）的性别测定结果均正确；对一起凶杀案的血痕性别测定为定案提供了重要证据。本方法简化了样品的前处理过程。     

陕西安康地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性

短串联重复序列(STR)分型检测已被广泛应用于法医学个体识别和亲权鉴定,本文调查511名陕西安康地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性,为法医学研究和实践提供基础数据. 1材料与方法 1.1 样本及DNA提取 511份安康地区汉族无血缘关系个体血样,为本实验室日常工作中积累,其中男性385名,女性126名.采用Chelex法提取模板DNA[1]     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

张家口地区汉族人群G2m(23)因子频率调查及血痕G2m(23)检出时限

1993年以来，时有G2m（23）因子在中国不同人群中分布的报道。本文验测张家口地K600名汉族无关健康人血清及室温保存1～16年的94份人血痕的G2m（23）因子，旨在了解本地区议人群体G2m（23）分布规律及血痕中G2m（23）因子的检出时限。材料与方法600份血清样大来自本市血站，均系无血缘关系且健康的汉族男女。血样置4℃冰箱保存，12小时内检测。94份血痕样本为室温保存1～16年的受检案件剩余检材，检测前用PI3S－T浸泡，4C冰箱过夜。用酶标单克隆抗GZm（23）抗体（由公安部物证鉴定中心血清室提供）．技文献方法对上述样本进行检测。结…     

辽宁汉族人群23个STR基因座遗传多态性

本文应用24个基因座复合扩增系统对辽宁汉族群体23个STR基因座进行遗传多态性调查,为法医学个体识别、亲权鉴定以及群体遗传学研究等提供基础资料。1材料与方法1.1样本342份辽宁汉族无关个体血滤纸样本为本实验室积累,使用BSD600-Duet（BSD Robotics公司,澳大利亚）自动打孔机,打取血痕样本。