用ELISA检测精液及精斑中精子抗原的研究

本实验应用单克隆抗人精子抗体和酶标记羊抗人精子抗体,采用ELISA方法确定精子抗原成份的存在。对10份新鲜精液,15份精斑进行了验测,其结果阳性率为100%。新鲜精液(精子数约10,000万个/ml)稀释100万倍,精斑浸出液稀释50万倍,均可出现阳性。对唾液斑、尿斑、乳汁斑、阴道斑、汗斑及输精管结扎的精液均为阴性。实验结果表明,本法检验精子抗原具有灵敏度高,特异性好的优点。     

抗人精液血清特异性的研究

确证精斑常用抗人精液血清作沉淀反应。这种抗血清特异性差,常与人类某些体液发生交叉反应,以致精斑确证试验结果不可靠,影响鉴定结果的准确性。作者用人类精子、精浆、精液与人类精浆特异性抗原p30分别免疫家兔,制备各种抗血清,用环状沉淀、琼脂双向扩散及免疫电泳等技术对这些抗血清的特异性进行了研究,报道如下。     

分泌抗人精子单克隆抗体的鼠—鼠杂交瘤

<正> 为了获得可用于检验性犯罪案件中人类精斑所需的特异性抗人精液血清,我们建立了生产抗人精子单克隆抗体(SMAB)的杂交瘤技术。将BALB/C小鼠的Sp2/o-Ag14骨髓瘤细胞与用洗涤人精子免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合。192个融合孔中,171孔有杂交瘤细胞生     

用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,结果正确检出精斑的准确率达100％。对混合多人精液稀释液的最高检出稀释度为1/10000,非精斑检材均不出现阳性反应。该法的特异性完全适合精斑确证检验鉴定的需要,其灵敏度明显高于传统的精斑确证检验方法。本法操作简单,无需特殊仪器设备,使用的抗体来源方便,便于应用。     

用胶乳凝集抑制试验鉴定人类精斑

作者用人类精浆致敏的胶乳和人初乳吸收后的抗人精液血清,采用胶乳凝集抑制试验凹玻板法盲测了180份生物性斑痕,结果表明此法确证人类精斑的敏感性,准确性均高于精子检出法,而与抗 p30血清琼脂双向扩散结果一致,且可用于混合斑的检验,具有快速、准确、简便等优点。     

用等电聚焦酶免疫技术检测人精液（斑）的ORM表型

作者用等电聚焦酶免疫技术从人精液(斑)中检出了 ORM 表型。10份精液的 ORM 表型分别与其配对血清表型一致。4℃存放50天的精斑全部能正确定型,室温存放的精斑100%正确分型的最长时限为30天。本研究为法医学性犯罪案件精斑个人识别提供了新手段。     

高效价鸡抗人精液血清的制备和应用

本文介绍一种制备高效价鸡抗人精血清的方法。给10只2kg 以上的公鸡同时静脉和肌肉注射5～10％混合人精液7～8次,获得特异性很强,效价达50,000倍左右的抗血清。通过实验和检案证明,对由于腐败污染、水浸或水洗而含微量精斑的检材,均能检出。     

免疫酶斑点法同步检测人精液中P30及ABH物质的研究及其应用

本文用免疫酶斑点法同步检测人精液中前列腺特异性抗原P30及ABO血型,并与常规的精子检出法和中和法进行比较。结果表明用免疫酶斑点法同步检测人精液申特异蛋白P30和ABO血型,可以替代常规的精子检出法和中和法在实际检案中应用。     

型特异性沉淀素血清检验人唾液斑精斑ABO血型的研究与应用

本文介绍了利用型特异性沉淀素血清环状沉淀法检验人唾液斑、精液斑ABO血型的方法与实验结果,并与中和试验及解离试验进行了比较。实验结果表明,本法操作简便,对多种干扰条件下的唾液斑、精斑均具有高度的型特异性,并能从分泌液与血液的混合斑中准确地鉴别出分泌液的血型。本法仅需0.4cm的分泌斑纱线即可进行血型鉴定,其灵敏度高于中和试验而略低于热解离试验,并能有效地检出陈旧分泌液斑中的型物质,因此适于在实际检案中应用。     

无精子精斑的STR基因型检验研究及在物证鉴定中的应用

在对强奸案的法医物证检验中,有时会遇到因行为人曾经做过输精管结扎术或行为人患无精子症,此时,行为人遗留下的精斑中无精子(精斑预试验和抗人精试验均阳性,但找不到精子),一般称为无精子精斑.对此种物证如沿用常规的精斑DNA提取方法检验,毫无结果.为了解决检案中对无精子精斑无法确定犯罪嫌疑人的问题,作者对此进行了试验研究,取得了满意的效果,并成功的应用于实际鉴定工作中.     

精斑检验干扰因素的研究

目的研究精斑检验中预试验与确证试验结果的关系,以及取材时间、生活习惯对确证检验结果的干扰。方法取376例阴道拭子,用酸性磷酸酶(ACP)染色法、斑点ELISA法和抗人精PSA金标试纸法检测检测精斑。结果ACP阴性时,可检出P30、精子,性生活后精斑确证检验大部分阳性检出分布在48小时以内样本中,结果经X2检验,P<0.01,差异性显著,而不同的生活习惯对P30检测具有显著性差异。结论研究结果对精斑的检验以及检材的提取具有推广应用和指导性意义。     

用人血清-唾液-初乳斑痕吸收免疫抗血清制备特异性抗人精液血清

本研究采用人血清-唾液-初乳混合液斑痕吸收抗人精液免疫血清,以消除抗血清的外器官特异性交叉反应。吸收后的抗人精液血清,仅和人精液及附睾和前列腺组织提取液发生反应,和人血清、唾液、初乳、阴道分泌液及尿液等5种人类体液分泌液及22种人体组织浸取液无交叉免疫反应;和8种动物精液也无交叉反应,具有良好的器官及种属特异性。获得的抗血清清亮透明,效价高。血清吸收方法简便易行,成本低,易于普及推广。     

GC/MS衍生化测定精浆中游离支链氨基酸和果糖

目的 建立人精浆中支链氨基酸和果糖的气相质谱衍生化分析方法.方法 精液样本液化离心后,按精子活率的临床标准分为正常组和非正常组,经TMS微波衍生化,GC/MS分析两组支链氨基酸、果糖衍生物含量差异.结果 正常组与非正常组的缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸在相对含量上均有一定差异.正常组3种氨基酸相对含量高于非正常组.果糖分析观察到同样的特征,正常组相对含量高于非正常组.结论 精子活率低的精浆样本仍可检出支链氨基酸和果糖,其差异有助于无精子、少精子精斑的法医学鉴别.     

ELISA检测精浆特异蛋白P_(30)鉴定人精斑

<正> 1978年美国Sensabaugh分离出精浆特异蛋白P30,并成功的制备出相应的抗P30血清。1987年我国也研制出抗人精浆特异蛋白P30血清,并应用该种抗血清建立了几种琼脂扩散和电泳方法鉴定人精斑。由于人精液中P30含量不高,平均为1.52±0.676mg/ml,鉴定微量精斑存在困难。为了更有效的提高方法的灵敏度。我们建立了鉴定微量人精斑的ELISA固相P30抗体法,现报告如下。     

抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨

抗P30胶体金免疫试纸条(又称精斑试纸条)是利用免疫学方法和色谱层析技术对前列腺特异性抗原(PSA,又称P30)进行特异性检测的一种简便方法[1]。由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验。但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈现阳性结果,却检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况,为验证及比较灵敏度及特异性,本文进行了一些探讨,现报道如下。1材料和方法1.1材料精斑试纸条:购自美国E-boat Dallas公司。样品:10支阴道棉签拭子取自一周内无性生活的女性志愿者,阴道分泌液斑…     

用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告了利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,正确检出精斑的准确率达100％。本法抗体来源方便,无需特殊仪器设备,操作简单,便于使用。     

中国人精子黄递酶Ⅲ型的分布及精斑黄递酶Ⅲ型的检出

应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术对辽宁地区200例正常人精子黄递酶Ⅲ型(DIA)的分布进行了研究。其基因频率分别为DIA_3~1=0.6850,DIA_3~2=0.2875,DIA_5~3=0.0275。由阴道液、唾液、乳汁及无精子症精液不能判定DIA_3型。室温保存精斑可检出时限为9个月。     

一例疑难精斑的检验

笔者受理了一起李控告魏将其强奸案，魏拒不承认。李将擦拭阴部的一块旧衣片送检。旧衣片上检有精子，每视野可见2～3个不完整的精子，偶见少量的扁平上皮细胞。用凝集反应确定李血型为B型；李的丈夫张的血型为O型；魏的血型为B型。用中和试验确定李的丈夫唾液为非分泌型；李与魏的唾液均为B分泌型。取该衣片精斑处与无精斑处检材浸泡，用16倍效价的抗A、抗B、抗H血清做吸收抑制凝集检验，空白检材与精斑检材均出现抗B血清抑制。由于李、魏、张三人的血型物质均可混于其中，而检材空白又出现B型，考虑旧衣片有李的B型物质干扰。李的B型…     

双面胶带法快速检出精子

在性犯罪案件中,确认精斑存在与否非常关键,而检出精子是认定精斑存在最简便、最可靠的方法,并且不需要特殊的试剂和仪器,同时也为案件以后进行DNA检验打下基础,适用于各基层实验室.作者在工作实践中,总结了一种简单实用的精子快速检出方法-双面胶带法,现介绍如下.     

精斑定性检验52例回顾分析

在性犯8罪物证检验中,确认精斑存在与否是非常关键的.检验精斑的方法很多,如P30检验、抗人精血消沉淀环及琼脂糖扩散试验等,其特点各异.最近笔者以Dot-ELISA进行P30检验、抗人精血清沉淀环试验及沉渣涂片镜检精子3种不同的方法对52例性犯罪案件进行了检验并做了统计分析,报告如下1 检验方法(1)P30检验,以DO-ELIA直接法进行(HRP-P30购于公安部第二研究所)(2)沉淀环试验,所用抗人精血清效价为1:2000,分别购于公安部第二研究所及淮北市公安局(3)精子检验,沉渣涂片,用美蓝染色后直接镜检,一般可用化人精血清沉淀环试验后的沉渣涂片,不必干燥