复发性流产肾虚证小鼠子宫蜕膜组织miRNA表达谱检测及生物信息学分析

目的 探讨微小RNA（microRNA，miRNA）在复发性流产（repeated spontaneous abortion，RSA）肾虚证小鼠子宫蜕膜组织中的表达特征。方法 运用基因芯片技术对所采集的正常对照组和RSA小鼠蜕膜组织进行miRNA检测，运用Genespring软件对miRNA进行筛选及功能分析。应用生物信息学方法分析差异表达的miRNA及其靶向基因在RSA发生、发展中的作用。结果 芯片检测结果显示正常对照组和RSA肾虚证组筛选出差异表达的miRNA共有63条（22条上调、41条下调），实时荧光定量PCR验证的miRNA的表达情况与miRNA芯片结果一致。京都基因与基因组百科全书通路富集分析及基因本体分析显示，其差异表达的miRNA涉及到PI3K-Akt信号通路、细胞吞噬通路、癌症通路、黏着斑通路、肌动蛋白细胞骨架调控通路、轴突导向信号、MAPK信号通路、PAP-1信号通路等。结论 RSA肾虚证小鼠子宫蜕膜组织中存在差异表达的micro RNA，可能涉及RSA肾虚证的发生、发展。     

艾草可燃性特征的转录组学研究

目的 探讨艾草可燃性特征的转录组学基础。方法 采摘新鲜艾草后分别提取叶、根、茎组织的总RNA并建立3个组织的cDNA文库，进行高通量测序。对测序后的原始读段进行过滤得到高质量读段，使用Trinity软件对高质量读段进行de novo组装得到功能基因，再对功能基因进行京都基因和基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）注释和表达量的计算。结果 艾草高通量测序获得99 807个功能基因，与KEGG数据库比对后得到萜类和纤维素合成的代谢通路，发现参与萜类物质合成的相关基因有116个，编码16种关键酶；参与纤维素合成相关基因有119个，编码5种关键酶。在萜类物质合成的关键酶基因中，叶、根、茎组织中都仅存在1个MVD基因和2个CMS基因，并且这3种关键酶基因均在叶中的表达水平最高。结论 艾草中存在许多参与萜类和纤维素合成的关键酶基因，但其最关键的限速酶在艾叶中的表达量比根、茎高，这可能是艾叶作为灸材的关键因素之一。     

针刺对海洛因复吸大鼠脑组织GRP78和CRT表达的影响

目的 观察针刺百会、大椎穴对海洛因复吸大鼠脑组织糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78，GRP78）和钙网织蛋白（calreticulin，CRT）的影响，探讨针刺干预海洛因脑损伤的机制。方法 将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、依赖组、模型组、针刺组和药物组，每组8只。按重复3次“染毒→戒断”的方法复制海洛因复吸大鼠模型。于实验第46天取各组大鼠海马、中脑腹侧被盖区（ventral tegmental area，VTA）脑组织，分别运用荧光RT-PCR和Western blot法，观察各组大鼠海马和VTA区GRP78和CRT蛋白及其mRNA表达水平。结果 与正常组比较，模型组和依赖组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著降低（P<0.05）；与模型组比较，针刺组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著增高（P<0.05）；针刺组与药物组比较，仅海马CRT mRNA表达水平的差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 针刺干预海洛因脑损伤的机制与其上调海马和VTA中CRT、GRP78的表达水平有关。     

"贺氏三通法"不同时点针刺对脑缺血再灌注大鼠超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的 观察“贺氏三通法”不同时点针刺对脑缺血再灌注大鼠缺血区脑组织和血清超氧化物歧化酶(super oxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平的影响。方法 将成年雄性SD大鼠随机分为假手术组（8只）、模型对照组（10只）、针刺组（30只）。根据干预时间的不同,针刺组分为3 h针刺组、6 h针刺组、48 h针刺组,每组各10只。采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注模型,针刺组在模型复制成功后分别按3、6、48 h分组给予“贺氏三通法”针刺,每日1次。模型复制成功72 h后测定血清及脑组织中SOD活性和MDA含量。结果 与模型对照组比较,各针刺组大鼠脑组织SOD活性显著增加（P<0.01）,6 h针刺组血清SOD活性有升高趋势（P>0.05）;而针刺组大鼠血清MDA含量显著增加（P<0.01）。6 h针刺组大鼠血清SOD活性、MDA含量显著高于3 h和48 h针刺组（P<0.05,或P<0.01）。结论 “贺氏三通法”早期介入可调节SOD、MDA的代谢紊乱,从而对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织起到保护作用。     

补肾方含药血清处理的大鼠成骨细胞miRNA差异表达

目的 筛选补肾方含药血清干预的大鼠成骨细胞中差异表达的miRNA，为补肾方治疗骨质疏松症提供可供选择的目标miRNA，以探讨其通过调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法 经细胞性状鉴定的原代大鼠成骨细胞用含药血清干预，采用miRNA芯片检测补肾方含药血清干预3 d与干预1 d的成骨细胞miRNA表达水平，并挑选差异表达2倍以上的miRNA进行定量PCR验证。结果 培养的原代细胞具有典型的成骨细胞性状特征。与对照血清相比，补肾方含药血清干预3 d的成骨细胞共有24个2倍以上表达差异的miRNA，其中上调的16个，下调的8个。差异表达2倍以上的miRNA定量PCR结果与芯片数据一致。结论 补肾方通过成骨细胞中差异表达的miRNA调控靶基因改善骨质疏松症。     

针刺足三里穴对吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱的影响

目的:探讨针刺对吗啡依赖性的影响。方法:复制吗啡依赖大鼠模型,观察针刺足三里穴对吗啡依赖大鼠戒断症状及吗啡条件性位置偏爱的影响。结果:针刺组比模型组戒断症状积分明显减少(P<0.01),治疗后针刺组比模型组大鼠在白箱内停留时间减少,差异有显著性。结论:针刺具有抑制吗啡依赖性,对复吸行为具有潜在的干预作用。     

基于钟基因Clock和Bmal1调控探究辰时针刺自发性高血压大鼠的降压机制

目的 以自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）为观察对象，探究针刺降压的钟基因调控作用。方法 将24只SHR随机分为针刺组和模型组，12只Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作为正常组。针刺组选择辰时针刺SHR双侧曲池、足三里穴，模型组和正常组仅接受与针刺组同等强度的捆绑操作。4周后，各组分别在辰、酉时随机抽取6只大鼠，测量鼠尾收缩压（systolic blood pressure, SBP）和舒张压（diastolic blood pressure, DBP），然后检测血清5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、褪黑素（melatonin, MT）的含量以及心脏生物钟基因Clock和Bmal1的表达水平。结果 分组因素对SBP、DBP、血清MT含量、Clock表达结果的RQ值、Bmal1表达结果的RQ值的主效应均有统计学意义（P＜0.05），时辰因素对各指标的主效应和两者的交互作用均无统计学意义（P＞0.05）。模型组辰、酉两个时辰的SBP和DBP均高于正常组（P<0.05），针刺组辰时的SBP和DBP及酉时的SBP均低于模型组（P<0.05）。模型组辰时MT含量较正常组降低，5-HT含量较正常组升高（P<0.05），针刺组辰时MT含量较模型组升高，5-HT含量较模型组降低（P<0.05）；针刺组酉时的MT含量较模型组升高（P<0.05）。针刺组辰时心脏Clock基因表达水平和酉时心脏Bmal1基因表达水平较模型组升高（P＜0．05）。结论 辰时针刺可以降低SHR的“双峰”血压，其作用机制可能与提高血清MT含量，减少5-HT含量以及提高心脏Clock和Bmal1基因的表达水平有关。     

不同干预方法对局灶性脑缺血大鼠内源性神经干细胞增殖的影响

目的:观察针刺、康复训练、针刺+康复训练对成年局灶性脑缺血大鼠的神经功能缺损评分及内源性神经干细胞(NSCs)增殖的影响.方法:采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.并给予针刺、康复训练、针刺+康复训练干预,在缺血损伤后第4、7、14和21天,对大鼠进行神经功能缺损评分,同时应用Brdu免疫组化法观察再灌注损伤后大鼠NSCs增殖情况.结果:康复训练组、针刺组、针刺+康复训练组在术后第4、7、14、21天神经功能缺损评分比较,差异无显著性意义(P＞0.05);与造模组比较差异有显著性意义(P＜0.05).脑缺血后,第4、7、14、21天室管膜下区、缺血边缘区Brdu阳性细胞表达.第7天达高峰;第7天室管膜下区康复训练组和针刺组BrdU阳性细胞数显著高于相同时间段模型组(P＜0.05),针刺+康复训练组BrdU阳性细胞数显著高于相同时间段康复训练组和针刺组(P＜0.05);第14天和21天BrdU阳性细胞数在模型组、针刺组、康复训练组和针刺+康复训练组差异未见显著性意义(P＞0.05).结论:缺血性脑损伤后诱发内源性NSCs发生增殖.康复训练和针刺可增加局灶性脑缺血大鼠SVZ区内源性NSCs的增殖.     

行气调神针刺疗法对缺血性卒中后抑郁大鼠左前皮质及海马CREB和PDE4 mRNA表达的影响

目的 观察cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)和磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)在缺血性卒中后抑郁(post stroke depression,PSD)发病中的作用及行气调神针刺疗法对其的影响。方法 将SD大鼠随机分为正常组、模型组、行气调神针刺组、西药组,每组各20只。采用大脑中动脉电凝结合应激和孤养的方法复制PSD模型。针刺组取“人中”、双侧“合谷”和双侧“太冲”,针刺治疗6周,西药组予以盐酸氟西汀灌胃治疗6周。采用RT-PCR检测左前皮质及海马CREB mRNA和PDE4 mRNA的表达水平。结果 最终各组样本量为11。与正常组比较,模型组大鼠左前皮质及海马CREB mRNA表达水平显著下调(P<0.01),PDE4 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,西药组及针刺组大鼠左前皮质及海马CREB mRNA表达水平显著上调(P<0.01),PDE4 mRNA表达水平显著下调(P<0.01)。结论 行气调神针刺疗法治疗PSD的机制与上调脑组织CREB mRNA的表达和下调PDE4 mRNA的表达有关。     

针刺"开瘖五穴"结合语言康复训练治疗缺血性脑卒中后运动性失语临床观察

目的 观察针刺“开瘖五穴”结合语言康复训练治疗缺血性脑卒中后运动性失语的临床疗效。方法 将60例患者随机分为治疗组和对照组，每组30例。治疗组采用“开瘖五穴”针刺法结合语言康复训练，对照组采用传统针刺法结合语言康复训练。7 d为1个疗程，治疗3个疗程后，采用汉语失语症检查法（ABC法）评价患者的语言功能，采用中国式功能性语言沟通能力检测法（Chinese functional communication profile,CFCP）评价患者的语言沟通能力，基于汉语失语症检查法（ABC法）评分改善率判定临床疗效。结果 与治疗前比较，两组患者治疗后各项语言功能评分和CFCP评分均显著升高（P＜0.05），且治疗组治疗后口语表达评分和听理解评分升高值显著大于对照组（P＜0.05）；两组临床疗效比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 针刺“开瘖五穴”结合语言康复训练治疗缺血性脑卒中后运动性失语的临床疗效与传统针刺相当，均能改善患者语言能力。     

芒针深刺八髎穴治疗脊髓损伤后神经源性膀胱临床观察

目的 观察芒针深刺八髎穴治疗脊髓损伤后神经源性膀胱的临床疗效。方法 选取54例脊髓损伤后神经源性膀胱患者，先进行残损分级评级，再采用随机数字表法将其分为对照组和观察组，每组27例。对照组行常规针刺联合膀胱功能训练，观察组行芒针深刺八髎穴联合膀胱功能训练。比较两组患者治疗前后排尿日记指标、最大尿流率、膀胱残余尿量、生活质量指数评分以及临床疗效。结果 两组患者治疗后排尿日记各指标均较治疗前显著改善（P＜0.05），且观察组各项指标改善情况显著优于对照组（P＜0.05）。与治疗前比较，治疗后两组患者最大尿流率显著增加，膀胱残余尿量显著减少（P＜0.05），且观察组最大尿流率增加程度及膀胱残余尿量减少程度均大于对照组（P＜0.05）。与治疗前比较，治疗后两组患者生活质量指数评分均显著减少（P＜0.05），且观察组患者生活质量指数评分减少程度显著大于对照组（P＜0.05）。观察组疗效优于对照组（P＜0.05）。结论 芒针深刺八髎穴能有效改善脊髓损伤后神经源性膀胱患者排尿情况及生活质量，恢复患者膀胱功能，减少膀胱残余尿量。     

“手足十二针”对缺血性脑卒中偏瘫患者运动皮质连接组功能连接的影响

目的 运用静息态功能磁共振技术探究“手足十二针”对缺血性脑卒中偏瘫患者运动皮质连接组功能连接（functional connectivity, FC）的影响。方法 纳入37例缺血性脑卒中偏瘫患者，分为真穴组25例、假穴组12例。真穴组患者给予“手足十二针”组穴（双侧合谷、内关、曲池、足三里、阳陵泉、三阴交）针刺干预；假穴组患者给予“手足十二针”经穴旁开1寸针刺干预。采用Fugl-Meyer量表(Fugl-Meyer assessment scale, FMA) 评价患者的肢体运动功能，采用美国国立卫生研究院卒中量表 (National Institute of Health stroke scale, NIHSS) 评价患者的神经系统缺损程度，并进行静息态功能磁共振成像。选取双侧初级运动区（primary motor area, M1）、辅助运动区（supplementary motor area, SMA）、运动前区（premotor cortex, PMC）为种子点，分析计算各脑区间FC值。比较两组患者治疗前后FMA量表、NIHSS评分及FC值。结果 与治疗前比较，真穴组患者治疗后FMA上肢运动功能评分、下肢运动功能评分、总分均显著升高（P<0.05），NIHSS评分显著降低（P<0.05）；双侧M1 FC值显著升高（P<0.05），患侧SMA与健侧PMC的FC值显著降低（P<0.05）。与治疗前比较，假穴组患者治疗后下肢运动功能评分、FMA总分均显著升高（P<0.05），NIHSS评分显著降低（P<0.05）。结论 “手足十二针”可能通过增强双侧初级运动区的FC以改善缺血性脑卒中偏瘫患者的运动功能及神经功能缺损程度，且具有穴位特异性，而辅助运动区与运动前区FC的改变也是另一可能的机制。     

电针内关和心俞对家兔急性心肌缺血的协同保护作用

目的：观察电针内关和心俞穴对家兔急性心肌缺血的协同保护作用。方法：40只家兔随机分为对照组、模型组、内关组（电针内关穴）、心俞组（电针心俞穴）、关俞组）电针内关和心俞穴）。通过耳缘静脉注射垂体后叶素复制急性缺血性心电图模型，观察电针治疗后心电图T波、ST段变化。结果：关俞组T波、ST段改善最明显（P＜0．05），缺血性心电图恢复时间最短（P＜0．05）。结论：电针心俞和内关穴对急性心肌缺血具有协同保护作用。     

基于德尔菲法的穴位敷贴干预小儿哮喘常用穴位及药物研究

目的 探讨穴位敷贴干预小儿哮喘的常用穴位及药物。方法 通过文献检索，初步筛选穴位敷帖干预小儿哮喘的常用穴位和药物；再运用德尔菲法对小儿哮喘防治的专家进行3轮问卷调查。采用均数、等级和、不重要百分比评价专家意见集中程度，采用变异系数评价专家意见协调程度。结果 穴位敷贴干预小儿哮喘的常用穴位是肺俞、定喘、膻中、大椎、膏肓、脾俞、天突、肾俞及膈俞，常用药物是白芥子、细辛、甘遂、延胡索、肉桂、50%生姜汁及人工麝香。结论 运用德尔菲法采集的专家意见可为穴位敷贴干预小儿哮喘临床实践标准的建立奠定基础。     

调神益肾针法对更年期大鼠下丘脑阿片促黑素皮质素原mRNA表达的影响

目的：研究调神益肾针法对更年期雌性大鼠下丘脑阿片促黑素皮质素原mRNA表达的影响。方法：采用逆转录－聚合酶链反应技术。结果：更年期大鼠下丘脑阿片促黑素皮质素原mRNA表达明显降低；经针刺干预后，调神益肾组该基因的表达明显上调，补肾健脾组则无明显变化。结论：增强下丘脑阿片促黑素皮质素原mRNA的表达可能是调神益肾针法治疗更年期综合征的机制之一。     

青年高流速型颈性眩晕的治疗手法研究

目的:探讨旋转扳法和穴位推拿对青年高流速型颈性眩晕患者椎基底动脉(VBA)流速的影响和两种手法的疗效差异.方法:76例青年高流速型颈性眩晕患者随机分为旋转扳法组(A组,38例)和穴位推拿组(B组,38例),分别施加相应的治疗手法.应用经颅超声多普勒(TCD)检测手法治疗前后VBA流速并观察流速改变和临床疗效.结果:治疗1周后,B组左侧椎动脉(LVA)、基底动脉(BA)及A组BA流速明显下降(P＜0.05,P＜0.01),两组间LVA流速改变有显著性差异(P＜0.01);治疗3周后,A、B两组LVA、右侧椎动脉(RVA)、BA流速较治疗前均明显下降(P＜0.01),两组间LVA、RVA流速改变均有显著性差异(P＜0.01).B组疗效优于A组(P＜0.05).结论:在青年高流速型颈性眩晕的治疗手法中,穴位推拿对VBA流速的影响较旋转扳法明显,并可能具有比旋转扳法更好的疗效.     

穴位贴敷时间和接触性皮炎对哮喘防治效果的影响

目的 观察贴敷时间和接触性皮炎对哮喘防治效果的影响。方法 将91例穴位贴敷治疗的缓解期哮喘患者,依照4 h、8 h穴位贴敷后是否诱发接触性皮炎,分为A组（4 h有接触性皮炎）24例、B组（4 h无接触性皮炎）25例、C组（8 h有接触性皮炎）22例、D组（8 h无接触性皮炎）20例,观察各组患者治疗前后哮喘发作次数改变、哮喘控制测试（asthma control test,ACT）评分和成人哮喘生活质量问卷（asthma quality of life questionnaire,AQLQ）评分的差异性。结果 与同组治疗前比较,治疗后A、C、D组哮喘发作次数均显著减少,ACT评分、AQLQ评分均显著提高,差异均有统计学意义（P<0.05）;其中A组治疗前后哮喘发作次数差值、ACT评分差值、AQLQ评分差值较B组差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 穴位贴敷时间和接触性皮炎均影响哮喘的防治效果,穴位贴敷4 h出现接触性皮炎者疗效相对较好。     

穴位贴敷法防治儿童支气管哮喘的队列研究

目的 评价穴位贴敷法防治儿童支气管哮喘的效果,分析可能影响其防治效果的因素。方法 以确诊的支气管哮喘患儿为研究对象,根据研究对象是否采用穴位贴敷治疗,将其分为贴敷组和未贴敷组。收集研究对象的基线资料后进行为期18个月的随访,获取病情变化积分。采用二项分类Logistic回归分析方法考察病情变化积分的影响因素。结果 329例哮喘患儿完成随访,其中贴敷组196例,未贴敷组133例。随访时间延长,患儿病情变化积分呈现逐渐降低趋势,贴敷组病情变化总积分低于未贴敷组,差异无统计学意义（P>0.05）。Logistic回归分析结果显示,仅贴敷年数进入病情变化积分的回归方程,贴敷年数越长,病情变化总积分越低。结论 基于“冬病夏治”理论的穴位贴敷法防治缓解期儿童支气管哮喘有一定的效果,贴敷时间长者的效果更明显。     

针刺配合耳穴压豆治疗失眠36例

目的 观察针刺配合耳穴压豆治疗失眠的疗效。方法 将72例失眠患者随机分为治疗组（针刺配合耳穴压豆）和对照组（口服佐匹克隆）,每组各36例,观察两组的临床疗效。结果 治疗组治愈率和总有效率分别为58.3%、94.4%,对照组分别为30.5%、75.0%,两组治愈率和总有效率比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 应用针刺配合耳穴压豆治疗失眠,效果良好。