化学显色法快速筛选饮料及尿液中γ-羟基丁酸和γ-丁内酯

目的建立化学显色法快速筛选饮料及尿液中γ-羟基丁酸(GHB)及其前体γ-丁内酯(GBL)的方法。方法在酸性条件下GHB转化为GBL,GBL和盐酸羟胺在碱性条件下生成γ-羟基丁酰羟胺,γ-羟基丁酰羟胺在酸性条件下和三氯化铁反应,生成紫红色的络合物。结果饮料中GHB最低检出浓度为0.5～2mg/mL,低于常见滥用质量浓度。该方法也可以用于尿液分析,最低检出质量浓度为0.5mg/mL。考察了常见有机溶剂和麻醉镇静药物的干扰。结论该方法简单、安全、快速,为临床和法庭科学实验室快速筛选GHB和GBL提供了便利。     

尿液、血液中γ-羟丁酸的气质联用法分析

目的为尿液、血液中γ-羟丁酸(gamma-hydroxybutyricacid,GHB),γ-羟丁酸内酯(gamma-butyrolactone,GBL)和1,4-丁二醇(1,4-butanediol,1,4-BD)的鉴定提供方法和依据。方法100μl尿液或血液以GHBd6为内标,经乙酸乙酯提取、BSTFA衍生化后,用GC／MS法分析。结果测尿液中内源性GHB的线性范围是20-800ng／ml,R2=0.9995,最低检出限为10ng／ml(S／N≥3);测尿液、血液中外源性GHB的线性范围为5-60μg／ml,R2分别为0.9999和0.9928。相对回收率为99％-104％。以所建方法测定了健康志愿者尿液中内源性GHB含量,并考察了健康受试者外源性GHB的代谢情况。结论所建方法准确、便捷、省时、选择性好,适用于法医毒物学鉴定。     

饮料中γ-羟基丁酸的分析

目的建立饮料中γ-羟基丁酸(GHB)的分析方法。方法检材以GHB-d6为内标,加入酸性氯化铵饱和溶液调节pH值<4,用乙酸乙酯提取、离心后取有机层,水浴下吹干,经BSTFA衍生化后,用气相色谱/质谱联用仪测定。检材以GHB-d6为内标,经流动相稀释、离心后,吸取上清液用液相色谱-串联质谱仪测定。结果GC/MS测定饮料中GHB的检出限为0.2μg/mL,日内精密度和日间精密度小于8.54%;LC/MS/MS测定饮料中GHB的检出限为2μg/mL,日内精密度和日间精密度小于8.62%。结论饮料中GHB进行定性定量分析。方法灵敏、准确、快速,适用于法庭毒物分析中饮料中GHB的检测。     

液相色谱-串联质谱法检测生物样品中百草枯及其代谢物

目的建立生物样品中百草枯(paraquat,PQ)及其2种主要代谢物monoquat,paraquatmonopyridone(MP)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,应用于百草枯中毒案件的法医学鉴定。方法生物样品经乙腈或甲醇沉淀蛋白,使用Agilent HILIC Plus(4.6×100mm,3.5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液～0.1%甲酸乙腈溶液(v/v)为流动相进行洗脱,在多反应监测模式下检测。结果百草枯及其代谢物在1～1000ng/mL内线性关系良好,相关系数(r)≥0.9996,最低检出限为0.34～6.00ng/mL,检测准确度为91.25%～113.44%,日内及日间精密度分别为1.51%～3.99%和1.92%～4.93%。结论本文建立的LC-MS/MS法具有灵敏度高、特异性好的特点,可应用于百草枯中毒相关案件的法医学鉴定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定血液中噻螨酮

目的建立血液中噻螨酮的超高效液相色谱-质谱检测方法。方法采用乙腈沉淀蛋白法进行样本前处理,使用Acquity UPLCHSS T3(50mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,电喷雾多反应监测模式(MRM)检测。结果血液中噻螨酮具有良好的色谱峰,无内源性物质干扰,在0.1~500.0ng/m L范围内线性良好,R2=0.998 7,回收率80.5%~92.8%,最低检出限0.02ng/m L,日内精密度3.5%~6.9%,日间精密度8.3%~11.2%。结论本文建立的超高效液相色谱-质谱检测法操作简便快速,提取回收率高,灵敏度高,重现性好,可用于实际案例中噻螨酮的检测。     

高效液相色谱-飞行时间质谱法检测人血中的丁醚脲及其代谢产物

目的建立人血中丁醚脲及其代谢产物丁醚脲-脲和丁醚脲-甲烷亚胺的高效液相色谱-飞行时间质谱联用(HPLC-QTOF/MS)分析方法。方法取人血2mL,用2mL乙腈沉淀蛋白,选用Kinelex®Cl8(2.6μm 3.0mm×100mm)色谱柱,以0.1%甲酸+乙腈(A相)和5mmol/L甲酸铵溶液+0.1%甲酸溶液(B相)为流动相梯度洗脱分离,采用液相色谱-飞行时间质谱仪的电喷雾电离,正离子模式进行分析。结果该方法人血中的丁醚脲、丁醚脲-脲和丁醚脲-甲烷亚胺检出限分别为1.0、0.1、1.0 ng/mL;丁醚脲、丁醚脲-脲、丁醚脲-甲烷亚胺在0.5~100ng/mL范围内线性良好(R2=0.9991~0.9996),在3个浓度水平平均回收率为78.1%~98.5%,日内精密度为4.1%~5.5%,日间精密度为5.5%~9.0%。结论该方法样品前处理方法操作简便,专属性强、灵敏度较高,适用于人血中丁醚脲及其代谢产物的定性定量。     

γ-羟基丁酸在急性中毒大鼠体液和组织中的检测及分布

目的建立生物检材中γ-羟基丁酸(GHB)的检测方法,研究GHB急性中毒大鼠体内GHB的分布,为GHB中毒的鉴定提供方法和评价依据。方法用GC/MS法检测生物检材中的GHB;以1000mg/kg剂量给大鼠灌胃使其染毒,分别于1h和3h处死,测定体液和组织中GHB的含量。结果测组织中内源性GHB的线性范围是1～20μg/g,R2=0.9974;测组织中外源性GHB的线性范围为100～1500μg/g,R2=0.9958。相对回收率为98%～103%。体内内源性GHB的含量均≤10μg/mL或10μg/g。尿液中GHB含量为最高,其他依次为:胃、血液、肠、肾、肺、脾、心、肝和脑。结论所建方法准确、便捷,适用于GHB中毒的鉴定;尿液是体内检测GHB的最佳检材。     

气质联用法快速分析“咔哇潮饮”中γ-羟基丁酸

目的建立气质联用法快速检验"咔哇潮饮"中γ-羟基丁酸(GHB)成分的分析方法。方法以SKF525A为内标,加入盐酸调节PH4,经乙酸乙酯提取,离心后取有机层,经BSTFA衍生化后,用GC/MS方法进行定性定量分析。结果 GC/MS法测定饮料中GHB的浓度为0.125mg/m L,检出限为0.1μg/m L,日内和日间精密度小于8.24%。结论该分析方法操作便捷、实用,结果准确,适用于刑事案件中"咔哇潮饮"检材中毒品成分的快速检验。     

HPLC-MS/MS法检测生物样品中的手性苯丙胺类药物和司来吉兰

目的建立全血、尿液中手性甲基苯丙胺、手性苯丙胺和司来吉兰同时分析检测的方法。方法全血、尿液经Oasis PRiME MCX固相萃取柱前处理,采用Phenomenex Lux AMP(150×3.0mm,3μm)手性液相色谱柱,以甲醇-5mmol/L碳酸氢铵水溶液(p H=11)为流动相,梯度洗脱,流速为0.35m L/min,以正离子多反应监测(MRM)模式检测,扫描时间21min。结果甲基苯丙胺两种对映异构体、苯丙胺两种对映异构体和司来吉兰在1-500ng/m L的范围内线性关系良好(各物质r~2 0.99);甲基苯丙胺两种对映异构体的检出限为0.05ng/m L,定量限为0.1ng/m L,苯丙胺两种对映异构体和司来吉兰的检出限为0.1ng/m L,定量限为0.5ng/m L;在低(5ng/m L)、中(50ng/m L)、高(200ng/m L)三个添加浓度下,各目标物的绝对回收率和基质效应均在可接受的范围内,日内精密度和日间精密度均小于12.61%。应用该方法对口服司来吉兰的比格犬的血液和尿液进行检测,结果表明仅存在司来吉兰原体、代谢物R-甲基苯丙胺和R-苯丙胺。结论本研究建立了全血、尿液中手性甲基苯丙胺、手性苯丙胺和司来吉兰的HPLCMS/MS定性、定量分析检测方法,该方法操作方便,灵敏度高,可为司法实践中法医毒物鉴定提供一定参考。     

UPLC-MS/MS法同时检测全血中16种除草剂

目的建立全血中16种除草剂的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测方法,为除草剂中毒案事件及其他刑事案件血液中该16种除草剂的检验鉴定提供依据。方法取200μL的血液,加入800μL乙腈-水(体积比80/20),进行蛋白沉淀后,采用Acquity BEH C18(2.1mm×100mm,1.7μm)色谱柱,以水(5mmol/L的甲酸铵,0.1%的甲酸)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI)、多反应监测(MRM)正离子模式对16种化合物进行检测。结果在1~200ng/mL范围内线性关系良好,R2均大于0.996;基质效应(ME%)为85.2%~104.4%,相对标准偏差(RSD%)为0.72%~4.84%;仪器检出限(IDLs)为0.2~2 ng/mL(信噪比S/N≥3),方法检出限(MDLs)为0.5~3ng/mL(信噪比S/N≥3),最低定量限(LOQs)为1~7ng/mL(信噪比S/N≥10)。结论本实验建立的全血中16种除草剂同时检验方法,前处理简便快捷、回收率高、精密度好、方法检出限低,可作为该16种除草剂中(投)毒案件的检验方法。     

MALDI-TOF-MS成像技术及其在法医损伤标志物筛选中的应用

传统的免疫学和分子生物学技术在寻找损伤分子标志物方面存在成果孤立、效价模糊以及相互间作用机制不明等缺点.质谱成像技术集筛选、分析和图像化于一体,更适合基于形态学的损伤分子标志物研究.本文综述了基于基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionizationtime-of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）成像技术筛选并识别特征性蛋白质的方法和最新进展,阐述了其在法医学损伤研究中的应用价值.     

Medical Legal Dispute in Hospitals of Different Grades:A Retrospective Study on206Cases

Objective To analyze the characteristics of medical malpractice from different grades of hos- pitals and to explore forensic investigation strategies in assessing medical dispute. Methods A total of 206 cases of medical dispute from 2009 to 2010 investigated by the Department of Forensic Medicine in Nanjing Medical University were selected and analyzed according to fault incidence, fault-prone part, and degree of causality in the treatment. Results Among the 206 cases analyzed, tertiary hospitals, sec- ondary hospitals and primary hospitals showed medium, high and low error rate, respectively. A majority of medical malpractice cases were distributed in the departments of surgery, medicine and gynecology. Conclusion The frequency and severity of medical malpractice in primary hospitals were high, which were gradually reduced in tertiary and secondary hospitals.     

等速肌力检测在辨别伪肢体瘫中的应用

目的：探讨等速肌力检测在法医学鉴定中辨别伪肢体瘫的应用价值,为建立规范、统一的法医学肌力评价方法提供科学依据。方法选取骨折或神经损伤者57例（损伤组）和伪装者128例（伪装组）,应用等速肌力测试系统对损伤组两侧膝关节与伪装组膝关节进行检测,对双侧膝关节屈、伸肌的峰力矩（peak torque,PT）、峰力矩角度（peak torque angle,PTA）进行比较,归纳两组膝关节的力矩-时间图特征。结果损伤组膝关节屈、伸肌的双侧PT的比较差异有统计学意义（P＜0.05）,PTA的比较差异无统计学意义（P＞0.05）;伪装组膝关节屈、伸肌的双侧PT、PTA的比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。损伤组两侧膝关节力矩-时间图主要为单峰前置型,伪装组膝关节力矩-时间图主要为多峰型。结论在法医学鉴定中,等速肌力检测在辨别伪肢体瘫方面可以通过力矩-时间图的相关特点进行评价。     

金属硫蛋白1A和2A的mRNA时序性表达(英文)

目的研究大鼠肌肉挫伤后金属硫蛋白(metallothionein,MT)1A m RNA、MT2A m RNA的时序性表达。方法 54只SD大鼠被分成挫伤组(挫伤后0.5、1、6、12、18、24、30和36 h组各6只)和对照组(6只)。所有总RNA均取自大鼠的骨骼肌。利用SYBR GreenⅠ法进行RT-q PCR检测大鼠挫伤骨骼肌中MT1A m RNA、MT2A m RNA的相对表达量。结果 MT1A m RNA、MT2A m RNA在损伤后的变化趋势与损伤时间具有一定的相关性。除了挫伤后0.5 h组外,其余各组MT1A m RNA、MT2A m RNA的表达量与对照组相比差异均有统计学意义(P0.05)。损伤后1 h、6 h、12 h、18 h MT1A m RNA和MT2A m RNA的相对表达量呈现逐渐上升的趋势,在18 h时达到了峰值,分别为对照组的(239.41±15.20)倍和(717.42±50.76)倍;损伤后24 h时两者的表达量均明显减少;损伤后30 h再次上升,随后下降。结论 MT1A m RNA、MT2A m RNA可能对损伤时间推断有一定的意义。     

家庭暴力致骨折损伤机制分析1例(英文)

本文报道了一名37岁女性遭受丈夫殴打,造成下肢受伤。医院诊断为右髌骨和左胫骨骨折,伤者遂接受了切开复位内固定术。由于丈夫否认对其实施家庭暴力,声称其下肢骨折系交通事故坠落伤。警方遂委托对该女性的损伤进行法医学鉴定。经过审阅X线和CT检查资料,结果为伤者右侧髌骨骨折、左胫骨骨折,以及左眶内侧壁骨折。鉴定意见为髌骨的横向骨折系由肌肉的牵拉暴力引起,左胫骨损伤符合直接和间接外力所致,左眶内侧壁骨折在施暴期间形成的可能性较大。本文阐述了运用影像学技术对家庭暴力案件与交通事故损伤进行鉴别,强调了影像学技术在法医临床鉴定中的应用价值。     

6例食用含三聚氰胺奶粉中毒死亡患儿的法医学分析

目的通过分析食用含三聚氰胺的奶粉中毒死亡患儿的病历材料,为此类中毒案件的法医学鉴定提供参考。方法选取6例因食用某品牌含三聚氰胺的奶粉中毒死亡患儿的病历材料,从中毒症状、影像学和血生化检查以及转归情况进行归纳分析。结果中毒患儿年龄在8个月左右,主要因泌尿系统结石梗阻尿路引起少尿、无尿等中毒症状,最终因急性肾功能衰竭或其他并发症导致死亡,血清BUN和Cr均异常升高。结论结合三聚氰胺的毒理作用,推断6例患儿的死亡与三聚氰胺中毒有关。     

心肌缺血-致命性心动过缓血清代谢特征分析

目的探讨心肌缺血-致命性心动过缓大鼠血清代谢特征。方法制作心肌缺血-心动过缓-死亡(myocardial ischemia-bradycardia-sudden cardiac death,MI-B-SCD)大鼠模型,以假手术组为对照组,应用气相色谱质谱联用仪检测死后血清代谢谱,结合代谢组学策略分析血清代谢特征。结果 MI-B-SCD大鼠血清代谢轮廓与对照差异显著。与假手术组相比,MI-B-SCD大鼠血清赖氨酸、鸟氨酸、嘌呤、丝氨酸、丙氨酸、尿素、乳酸含量明显升高;琥珀酸、棕榈酸、酮己二酸、甘油醛、己烯二酸、辛二酸含量明显下降,其中多种差异代谢物之间存在相关性。结论 MI-B-SCD大鼠血清代谢显著改变,赖氨酸与嘌呤有较高的诊断MI-B-SCD价值,可望为心源性猝死的法医鉴定及临床防治提供参考。     

DNA甲基化检测方法及其法医学应用研究进展

DNA甲基化是表观遗传标记的重要组成部分,参与基因表达的调控,在生物发育、衰老以及肿瘤学等领域受到广泛关注。由于具有相对稳定性、可遗传、含量丰富、随龄变化等特点,在法医学领域,DNA甲基化可以作为DNA序列相关经典遗传标记的有效补充,用于年龄推断、组织体液来源检测、同卵双生子的鉴定等。DNA甲基化的检测方法主要有基于甲基化敏感限制性内切酶、重亚硫酸盐转化以及甲基化CpG结合蛋白等原理而建立的一系列方法,近年研究表明,第三代测序技术也可用于DNA甲基化检测。本文就DNA甲基化检测方法及在法医学领域的应用研究进行回顾与综述,以期为法医学实践提供参考。     

西南地区汉族男性CT颅面径线与身高的关系

目的通过CT测量西南地区汉族男性颅面径线,建立该地区汉族男性颅面径线与身高的回归模型,为法医人类学研究积累数据。方法收集273例西南地区汉族男性头部CT资料,确定颅面部7条径线,运用图像后处理软件进行多平面重建和容积再现,对所选径线进行测量。对各测量指标与身高的相关性运用SPSS 21.0进行分析,建立推断身高的回归方程,并重新选取50例样本代入该数学模型进行检验。结果建立了7条径线的线性回归方程(P0.05);一元线性回归方程相关系数为0.190~0.439,标准估计误差(SEE)为4.597~5.023 cm;多元线性回归方程复相关系数为0.494~0.524,SEE为4.418~4.458 cm。回代检验得y=83.959+3.589 x_6+2.573 x_2,±1SEE准确率最高,为30%;y=72.646+3.316 x6+1.586 x_2+1.553 x_4+2.211 x_3,±2SEE准确率最高,为92%。结论本研究所选取的7条径线与身高均有明显的直线相关性,所建立的多元回归方程适用于推断西南地区汉族男性身高。     

虚拟解剖技术的应用研究进展

尸体解剖是法医学传统的、经典的技术手段,但由于需破坏尸体,尸体解剖有时会遭到抵制和排斥。虚拟解剖技术为法医学检验提供了一种非侵入性的检验途径,可客观准确地反映骨折、软组织损伤、创道、器官损伤等,为法医学鉴定实践提供直观有力的证据。本文综合国内外最新文献资料,从虚拟解剖在法医损伤鉴定、机械性窒息、溺死、高低温死亡、疾病诊断及其在法医有限元损伤研究中的应用等方面进行综述,阐述了这一新的法医学研究方向。