法医学二代测序标准化进展与展望

二代测序技术可检测多种法医遗传标记获取海量序列信息,满足法医学实践中精准个体识别、复杂亲缘关系鉴定、特征刻画等应用需求。国内外已开展大量二代测序法医学应用科研工作,但由于缺乏行业标准,二代测序在我国公安实战中并未得到有效应用。目前,法医学二代测序的标准制定面临检测靶标特殊、测序技术流程和结果分析不统一等挑战。本文从核酸标准参考物、测序技术要求、序列多态STR等位基因命名规则等方面,梳理国外法医学二代测序标准化工作进展,并总结国内二代测序检测行业标准现状,希冀为我国法医学二代测序的标准建设提供思路和参考。     

微腔型PCR芯片用于法医DNA分析的初步研究

目的为了克服传统PCR热循环仪体积大,运行电压高,耗时长,只能在实验室中应用的缺点,研究了一种微腔型PCR芯片,以期实现现场对STR片段的复合扩增。方法采用在PCR反应缓冲液中加入不同浓度的BSA溶液对芯片进行表面优化处理的方法及不同酶量优化实现对STR片段的有效扩增。结果使用浓度为0．5mg／mL的BSA可得到清晰完整的STR分型结果;加大酶量有益于扩增效率的提高。结论该种微腔型PCR芯片经初步优化后可有效地对STR片段进行复合扩增,经进一步优化可真正实现法医DNA分析的更加微量化和快速化。     

2个miniSTR等位基因分型标准物的制备

目的采用分子克隆技术制备miniSTR D3S4529和D12ATA63基因座等位基因分型标准物,并评价其应用价值。方法用荧光引物对835份无关个体血卡样本进行扩增并分型检测,筛选2个基因座的等位基因片段,用分子克隆方法制备等位基因分型标准物,并对中国汉族群体进行遗传学调查。结果根据筛选出的等位基因片段制备出分型标准物,各等位基因峰形尖锐,无双肩峰,峰高基本一致,荧光值在4 000 RFU左右。中国汉族人群D3S4529、D12ATA63基因座分别检出7个、11个等位基因,杂合度分别为0.752、0.723,多态信息含量均为0.71。结论通过分子克隆法制备的miniSTR D3S4529和D12ATA63等位基因分型标准物,在法医学研究中具有较高的应用价值。     

限制性组合分析法推定男女混合斑中个体分型初探

正混合斑是指包含两名或两名以上个体的混合生物检材,在多数情况下,此类检材的DNA分型往往表现为两人或多人的混合分型,使结果分析较为复杂[1]。本文尝试采用2005年国际法医遗传学会(ISFG)推荐的关于混合斑结果分析中的计算方法对混合斑案件中单一个体DNA分型结果进行分析。1材料与方法1.1样本及检验样本由公安部物证鉴定中心提供强奸案件中床单上混合斑检材1份,为日常检案积累,根据案情调查证实该检材系混合斑。DNA检验采用Chelex法提取上述检材DNA,经DNATyperTM15 plus试剂盒扩增后在ABI 3130遗     

中国北方汉族12个Y-STR基因座遗传多态性

人类Y染色体是男性特有的性染色体,在法医学个体识别、亲子鉴定和混合斑中男性成分的检验等方面具有独特作用[1].本研究选取了12个Y-STR基因座,调查其在北方汉族人群中的遗传多态性,以期为DNA检验鉴定提供参考数据.     

DNATyper^TM15试剂盒的确证试验

目的测试DNATyper^TM15试剂盒的技术性能指标，评估其法医学应用能力。方法制定测试方案，从方法学验证、灵敏度、混合样本、批次间试剂稳定性及批量样本测试、DNA提取方法适应性测试、各类常见检材的测试、稳定性测试等8个方面进行测试。并与Identifiler^TM PowerPlex16剂盒进行比较。结果DNA Typer TM15试剂盒灵敏度较高，批次间性能稳定，对各类案件检材和DNA提取方法具有较好的适应性，具有检验混合DNA样本检测的能力。结论DNA Typer TM15在上述性能指标等方面已经达到国际同类产品的技术水平，可用于法庭科学的检案与建库。     

海南汉族人群14个STR基因座遗传多态性

本文应用Typer15TM试剂盒对海南汉族人群的CF1PO、D13S17、D16S53、D18S51、D2S133、D3S1358、D5S818、D6S1043、D7S820、D8S1179、FGA、Penta E、vWFA、D21S1114个STR基因座进行基因频率调查,为法医学个人识别、亲权鉴定和群体遗传学研究提供基础数据。1材料与方法1.1材料取20     

法医DNA分析技术新方法与新产品的评估

法医DNA分析技术是目前世界各国司法警察部门在案件侦审过程中所依赖的重要技术手段之一。随着研究的不断深入,新的技术、方法、产品层出不穷,丰富了法医DNA技术检验体系,能够进行更多项目的检验。由于法庭科学是为侦查破案和法庭取证服务的,其鉴定结果可直接作为证据在案件审查中使用,因此,对法医DNA技术发展过程中所出现的新方法和新产品,世界各国尤其是发达国家在相关准入标准上要求严格,这有利于DNA检验技术获得良性发展,防止技术和产品使用的随意性,将技术的负面作用控制在最小范围内,让社会和公众信任。1评估规则的建立对法医DN…