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1.
目的制备标准分子量DNA片段混合物。方法选取pMD18-T载体部分序列作为插入片段,设计引物,制备包含不同大小的标准分子量片段的克隆。大量培养细菌提取质粒,用双酶切、连接荧光接头的方法制备不同大小的带有荧光的标准分子量片段,混合,纯化,最终获得标准分子量片段混合物(内标)。结果用分子克隆方法制备出具有实用性的标准分子量片段混合物,其单个标准分子量片段大小分别为80bp、124bp、194bp、224bp、254bp、304bp、349bp、399bp、424bp、454bp。并且这些标准分子量片段混合物可以准确地对DNATyper15试剂盒的扩增产物进行检测。结论应用该方法制备了能满足研究和实验室要求的标准分子量片段混合物,为DNA分子量标准物标准品的制作提供了一种新的方法。 相似文献
2.
《中国法医学杂志》2017,(6):618-622
目的制备一种毛细管电泳筛分介质,将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上。方法通过聚合反应、冷冻干燥得到白色固体聚丙烯酰胺(LPA),经溶胶缓冲液溶胀后获得所需的毛细管电泳筛分介质。对其分子量、结构等关键性能指标进行表征;并将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上,根据空间校正、光谱校正及STR检测结果对其筛分性能进行评价。结果制备的筛分介质Mw 1.8×105Da,Mn 1.2×105Da,多分散性1.5;结构正确且纯度高;在GA118-16A型遗传分析仪上能够建立空间校正、光谱校正文件;能够有效分离相差1bp的DNA片段,峰型尖锐、无杂峰、无拖尾、无丢峰现象。结论该方法制备的筛分介质完全可应用于GA118-16A等国产遗传分析仪。 相似文献
3.
目的:测定六味地黄丸中丹皮酚的含量.方法:采用毛细管气相色谱法,以正十六烷为内标.结果:在2.2~11.0 μg/ml范围内呈良好线性关系,测得平均回收率为99.98%,RSD为1.11%.结论:本法灵敏、准确、可靠,适用于该制剂的质量控制. 相似文献
4.
两个体混合样本比例的PCR-STR检测研究 总被引:3,自引:1,他引:2
目的探讨PCR-STR检测两个体混合样本比例的灵敏度。方法按不同比例将两个体全血、单个核细胞及纯DNA 3种不同的样本进行混合,应用AB I公司生产的profile p lus商品化试剂盒多重PCR扩增后,用AB I3100基因分析仪进行毛细管电泳,检测基因座及其峰面积,并就混合样本中两单个核细胞样本DNA含量百分比与扩增前混合样本比例的关系进行相关分析。结果当样本混合比例为4%+96%时,可明确区分混合样本中两个体的基因型,且扩增前混合细胞百分率与扩增后两者峰面积比值呈直线相关。结论PCR-STR检测两个体混合样本比例的灵敏度有一定范围,并可进行半定量。 相似文献
5.
6.
采用薄层等电聚焦电泳PAGIF,结合反转显色,同时对EAP及PGM1亚型分型。结果在同一块凝胶板以两个表面分别显现出清晰的同工酶谱带,结果互不干扰。EAP检出AA、BB、BA三种表型PGM1检出十种亚型。PAGIF结合双面反转显色可同时对EAP及PGM1亚型分型,累积个体识别率为0.87,可应用于亲子生定。 相似文献
7.
8.
9.
10.
尿中氯氨酮的固相萃取及毛细管电泳分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立尿中氯氨酮的固相萃取方法及毛细管电泳分析条件。方法:添加为4-苯基丁胺为内标物用固相萃取剂对检材进行萃取有机溶剂洗脱,再用毛细管电泳分析技术对浓缩提取液进行分析。结果:用该方法对不同配比的缓冲溶液的考查实验,最终确定了分析氯胺酮的最佳缓冲体系为:65MmoL/L磷酸二氢钠、10MmoL/L四硼酸钠、25%甲醇,pH5。并通过实验证明,对尿中氯胺酮的固相萃取较理想的条件为:以4-苯基丁胺为内标,在pH8的弱碱性条件下,以GDX-301为吸附剂,甲醇或乙醇洗脱。结论:本方法使内标物与待测物得到较好分离,是一种极有应用前景的分离分析方法,具有一定的推广价值。 相似文献