基于分子克隆方法制备标准分子量片段混合物

目的制备标准分子量DNA片段混合物。方法选取pMD18-T载体部分序列作为插入片段,设计引物,制备包含不同大小的标准分子量片段的克隆。大量培养细菌提取质粒,用双酶切、连接荧光接头的方法制备不同大小的带有荧光的标准分子量片段,混合,纯化,最终获得标准分子量片段混合物(内标)。结果用分子克隆方法制备出具有实用性的标准分子量片段混合物,其单个标准分子量片段大小分别为80bp、124bp、194bp、224bp、254bp、304bp、349bp、399bp、424bp、454bp。并且这些标准分子量片段混合物可以准确地对DNATyper15试剂盒的扩增产物进行检测。结论应用该方法制备了能满足研究和实验室要求的标准分子量片段混合物,为DNA分子量标准物标准品的制作提供了一种新的方法。     

雪地中尿液的DNA检验

尿液样本因为提取难度较大，很少有作为物证检材进行法医鉴定的案例，国内亦未见报道。现报告对雪地中遗留尿液进行法医 DNA鉴定的检案 1例，希望在此基础上建立一套尿液 DNA检验的较成熟的方法。     

中国壮、蒙、哈萨克族群体30个InDels的遗传多态性

本文对中国地区广西壮族、蒙族、哈萨克族三个健康无关个体进行遗传多态性调查。采用Investigator?DIPplex试剂盒对广西壮族、蒙族、哈萨克族的150名无关个体的30个In Del位点进行复合扩增,统计分析各位点的频率数据、群体遗传学参数。经Bonferroni校正,30个In Del位点不存在连锁不平衡现象;基因型在三个民族的分布均符合Hardy-Weinberg平衡;各位点在蒙族、哈萨克族、广西壮族三个人群中的累积个体识别率分别为0.999 999 999 991 9、0.999 999 999 999 32、0.999 999 999 969,累积非父排除率(CPE)均大于0.98;30个In Dels在蒙族、哈萨克族、广西壮族分别有中2个、1个、6个位点的He0.3。通过Genepop 4.2软件计算Fst值,除D118(0.126)、D64(0.071)外,其余位点均小于0.06。所调查人群具有较高的多态性,能达到较高的个体识别能力,可以作为现有STR检验体系的补充。     

北京地区汉族人群6个STR基因座的遗传多态性

目的对北京地区汉族人群遗传数据进行调查研究。方法利用PCR自动化检测技术检测中国北京地区汉族人群D1S1656,D10S2325,D11S2368,D12S391,D14S1434及GATA198B05共6个STR基因座的遗传多态性,获得6个STR基因座的群体遗传学数据,评价其法医学应用价值。结果6个STR基因座的个体鉴别力（Discrimination power,DP）在0．9777-0．8769之间,多态性信息含量（Polymorphism information content,PIC）在0．6867-0．8801之间,杂合度（Heterozygosity,H）在0．7219～O．8684之间,非父排除率（Probability of paternity exclusion,PE）在0．4456-0．6793之间,累积个体鉴别力为0．99999997,累积非父排除率为0．995765192。结论6个STR基因座等位基因频率分布均匀,多态性高,适用于法医学亲子鉴定及个人识别,可作为现有基因座的补充。     

刑事案件DNA检验采样与鉴定立法现状

人类DNA遗传特征多态性使DNA技术成为各国警方侦办案件的重要技术手段,但DNA检验鉴定采样合法性和结论可采性须由立法规定。众多国家和地区针对DNA采样和鉴定结论应用制定了相关法律法规。我国相关法律细则尚处空白,因此,应尽快制定我国DNA鉴定采样与应用法规,规范DNA鉴定样本采集与证据采信。     

DNATyper^TM15试剂盒的法医学应用研究

目的研究DNATyper^TM15试剂盒在法医学中的应用。方法共收集60种8137份检材,在34个实验室,用5种不同方法提取DNA,使用DNATyperTM15试剂盒与2种同类进口试剂扩增并对比检测。结果DNATyperTM15试剂盒对不同提取方法、检材种类、扩增与检测仪器、操作环境、操作人员等均具有适应性。结论DNATyperTM15试剂盒能够用于法医学检验鉴定。     

荧光STR复合扩增试剂盒的评估过程探索

STR复合扩增检验技术是目前法医DNA检验技术中最重要也是最常用的技术种类之一，随着荧光检测技术和毛细管电泳技术的发展，特别是DNA数据库建设中丰要采用STR复合扩增技术进行基因分型，大大拓展了STR复合扩增检验应用范围。与此同时，STR复合扩增检验试剂成为影响检验质量的重要因素，关系到样本检验分型结果，而分型数据是为法庭提供证据的直接依据，     

两个正常人胚组织培养细胞的STR分型研究

本文对两个正常人胚组织培养细胞进行STR分型研究，获得细胞相关基因座分型结果，报道如下。 1材料与方法 1．1细胞样本 从人类正常组织中选择两个正常培养细胞进行培养传代。细胞株样本均购于北京协和细胞资源中心（CRC／PUMC）。     

法医STR分型电泳凝胶稳定参数的探讨

目的探讨对法医STR基因分型检测使用的毛细管电泳筛分介质进行评价的参数,为电泳凝胶验证评价提供参考指标。方法采用ABI 3130xl遗传分析仪,以3130 POP-4TM凝胶为筛分介质,以分子量内标GS500LIZ和Typer500为样本,多批次进行毛细管电泳;对原始数据进行分组统计,得到单碱基对相对迁移时间及其相对标准偏差（RSD）。结果分子量内标GS500LIZ和Typer500在POP-4TM凝胶中电泳,单碱基对相对迁移时间的统计结果表现趋势相似,即随着DNA片段增大,单碱基对相对迁移时间的均值减小,标准差及相对标准偏差增大。组间方差分析结果符合方差齐性,P〈0.01,组间多重比较,P〈0.000 28（Bonferron校正）。结论单碱基对相对迁移时间的相对标准偏差（RSD）是毛细管电泳重现性的重要参数,可为凝胶研发和验证提供参考性指标。     

河南地区人群3个基因座的基因频率分布

从血痕、血液、精斑中提取DNA对河南地区随机人群CSFIPO、TPOX和TH01基因座（CTT）进行了基因频率分布调查,现报道如下。1材料与方法137例血样取自河南省血液中心和本实验室检案材料;精斑为本实验室检案积累。采用Chexelx－100处理法提取DNA模板,混合斑中DNA的提取采用两步消化法（‘］。复合扩增采用Promega公司Geneprint试剂盒试剂,按试剂盒说明书操作。扩增产物用4％聚丙烯酸胺变性凝胶分离,恒功率40W电泳1．sh。检测用eromesa公司银染试剂盒,按其说明书操作。通过凝胶中标本扩增带与Promege公司提供的全等位基因标准…