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目的建立微量体表脱落上皮细胞的DNA检验方法. 方法采用Chelex-100法提取DNA,以Microcon-100纯化柱纯化浓缩DNA,用Profiler Plus 试剂盒PCR扩增后用310基因分析仪检测. 结果 10种常见粘附有体表脱落上皮细胞的样本100个,其中7种70个样本成功检测到10个STR位点的分型,检出率为100%,其余3 种样本检出率分别为50%、20%、10%,将该方法应用于2例实际检案,取得满意效果. 结论所建立方法稳定可靠,易于操作,适用于多种检材,为微量体表脱落上皮细胞的DNA检验提供了确实可行的检验方法. 相似文献
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微量体表脱落上皮细胞的DNA检验 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 建立微量体表脱落上皮细胞的DNA检验方法。 方法 采用Chelex -10 0法提取DNA ,以Microcon -10 0纯化柱纯化浓缩DNA ,用ProfilerPlus试剂盒PCR扩增后用 3 10基因分析仪检测。 结果 10种常见粘附有体表脱落上皮细胞的样本 10 0个 ,其中 7种 70个样本成功检测到 10个STR位点的分型 ,检出率为 10 0 % ,其余 3种样本检出率分别为 5 0 %、2 0 %、10 % ,将该方法应用于 2例实际检案 ,取得满意效果。 结论 所建立方法稳定可靠 ,易于操作 ,适用于多种检材 ,为微量体表脱落上皮细胞的DNA检验提供了确实可行的检验方法 相似文献
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目的 基于免疫磁珠法分离脱落上皮细胞中的白细胞,消除或减弱混合检材中血液来源STR分型对结果分析的干扰。方法 分别取两名不同个体的血液和口腔脱落上皮细胞,按不同比例制备成混合样本作为实验组,并同时制备细胞量相等的对照组。应用免疫磁珠法分离实验组样本中白细胞,并与对照组以相同条件进行DNA提取、扩增、分型,对比两组STR分型结果。结果 当血液量较少时,对照组为混合STR分型,经免疫磁珠法分离混合检材中白细胞后,实验组为单一来源STR分型;当血液量较多时,此时对照组为混合STR分型,但口腔脱落上皮细胞来源的STR分型谱带峰高较低甚至丢失,经免疫磁珠法后,实验组仍为STR混合分型,但口腔脱落上皮细胞来源的STR分型谱带成为主峰;当混合样本中口腔脱落上皮细胞微量,血液占比极大时,此时对照组为血液来源的单一STR分型结果,经免疫磁珠法后,实验组为STR混合分型,包含口腔脱落上皮细胞来源的所有等位基因分型。结论 该方法可用于分离脱落上皮细胞中血液成分,降低血液来源的DNA比例,能够改善此类混合检材中目的细胞的STR分型结果,为刑事案件中含有血迹浸染的混合生物检材的检验提供了一种新思路。 相似文献
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荧光标记STR分型技术在法医物证检验中已经得到广泛应用 ,但在实际工作中 ,含有微量人体脱落上皮细胞的特殊载体在很多情况下被忽略 ,关于皮肤脱落上皮细胞的DNA检验比较少。本文作者结合案例 ,对一些特殊载体上的脱落上皮细胞成功地进行了STR检验分型 ,并就检验中的相关问题进行讨论 ,旨在进一步提高办案人员对此类检材应用价值的注意。案例资料【案例 1】 2 0 0 3年 1月在某旅社内 ,犯罪嫌疑人王某将徐某(女 ,2 7岁 )掐颈致死 ,后用打火机烧灼电视机电线再用手拉成多节 ,欲用于捆绑。鉴定人员在现场采用纱线两步擦拭法转移电视机电… 相似文献
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目的建立一种自动化提取脱落上皮细胞类生物检材DNA的方法。方法附着于不同载体上的脱落上皮细胞类生物检材共278份,应用Eppendorf epMotion 5075LH工作站结合DNA IQTM系统提取模板DNA,并用Identifiler试剂盒进行STR检验。结果在278份被检的生物检材,其中126份检材获得13个基因座以上的STR分型,不同类型的检材其检出率不相同,最高达73.44%,最低为10.89%。结论脱落上皮细胞类检材应用自动化工作站提取DNA模板可在法医日常检案中广泛应用。 相似文献
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随着犯罪嫌疑人反侦查意识的提高,犯罪嫌疑人戴手套作案的情况越来越常见,手套印成为犯罪现场越来越多见的微量生物痕迹之一。如何从此类痕迹中获取犯罪嫌疑人的有效信息、为侦查破案提供有效线索具有重要意义。2012—2013 年,杭州市公安局DNA 实验室受理检验手套印拭子类检材共1 538 份,获得有效STR 分型146 份,有效检出率为9.5%。在入库的 146 个STR 分型中,有61 个STR 分型直接比中犯罪嫌疑人,比中率为48.6%,远高于数据库平均比中率。笔者结合本地应用情况,对犯罪现场的手套印从勘验、DNA 的转移提取及DNA 检验环节进行总结,供同行参考。 相似文献
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杯口边缘附着微量口唇脱落细胞的检验 总被引:4,自引:2,他引:2
目的 探讨对遗留在杯口边缘的微量口唇黏膜脱落细胞进行DNA分型的可行性及影响因素 ,为案件的侦查提供指导作用。方法 分类提取饮水后容器边缘口唇黏膜脱落细胞中的DNA ,应用荧光标记PCR STR分型技术进行DNA分析。根据每个样本DNA基因座的检出个数 ,分别计算出基因座检出率。结果 不同容器、不同饮料对口唇黏膜脱落细胞DNA检验的影响不同。结论 杯口遗留的口唇黏膜脱落细胞 ,可作为一种法庭生物检材进行DNA分析 ,在实际办案中占有一席之地 相似文献
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低拷贝模板STR分型及其存在的问题 总被引:20,自引:7,他引:13
微量、超微量生物学检材的STR分型常常是案件调查中进行DNA分析的难点。多年来 ,法医DNA分析工作者一直努力探索对微量DNA进行分析的方法。应用少于试剂盒规定的最小DNA模板量进行STR扩增检验 ,并对结果加以分析解释 ,被定义为低拷贝模板 (lowcopynumber ,LCN )STR分型[1、2 ] 。LCN STR分型不同于标准的STR分型 ,在实际应用中也存在许多问题需要引起注意[1~ 5] 。为了避免在LCN STR分型中出现误判 ,本文对如何正确地使用LCN STR分型技术加以介绍。1 LCN STR分型根据生产厂家的推荐 ,标准STR分型方法使用最低的模板… 相似文献
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两种DNA提取方法检测微量陈旧汗斑1例 总被引:2,自引:1,他引:1
与人体接触过的衣、物常常附有体表脱落的上皮细胞成分。有试验证明,人体只要接触物体5秒钟以上,即有可能细胞遗留在物体上,也就是说,有可能留下核DNA及线粒体DNA[1]。在刑事案件中,如能成功地对有关物品上粘附的脱落上皮细胞的DNA检验,便可为案件的侦查和审判提供重要的线索和证据[2]。作者在实际检案中遇到一例微量陈旧汗斑,通过联合应用两种DNA的提取方法并进行了对比,解决了该案的难题。报道如下:1简要案情2003年初,某女被杀害。现场提取男士夹克衫一件,领后部有可疑油渍样斑迹,考虑此处有穿衣者留下的汗斑。2检验2.1检验材料犯罪… 相似文献
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激光显微捕获口腔上皮细胞的DNA分型 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探索激光显微技术(lasercapturemicrodissectionsystem,LCM)捕获口腔上皮细胞,并进行STR-DNA分型检测的方法。方法用VERITAS显微切割仪红外低能激光显微捕获一定数量口腔上皮细胞,进行ProfilerPlus试剂盒STR复合扩增,检测DNA基因型。结果7~8个口腔上皮细胞能成功获得STR-DNA分型。3~4个口腔上皮细胞不能成功获得STR-DNA分型。结论激光显微捕获作为一种分离单个细胞的新技术,对于微量口腔上皮细胞的STR-DNA分型是可行的。 相似文献
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DNA-STR分型检验人体脱落上皮细胞2例 总被引:3,自引:2,他引:1
作者结合 2个典型案例 ,对一些特殊载体上的脱落上皮细胞成功地进行了STR检验分型 ,并就检验中的相关问题进行讨论 ,旨在进一步提高办案人员对此类检材应用价值的注意。1 案例资料案例 1 2 0 0 3年 1月在某旅社内 ,犯罪嫌疑人王某将徐某 (女 ,2 7岁 )掐颈致死后 ,用打火机烧灼电视机电线并用手拉成多节 ,用于捆绑死者。用纱线两步擦试法转移电视机电线上上皮细胞 ,用Chelex 10 0法提取上皮细胞DNA ,Microcon 10 0纯化柱处理 ,用AmpFISTR profilerPlusTM 系统复合扩增试剂盒进行STR位点的复合扩增 ,扩增产物经ABI 310型基因分析… 相似文献
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目的研究PCR产物纯化对微量DNA的STR分型的影响。方法使用25pg/μL的9947标准基因组DNA为模板,标准程序扩增和STR分型检测。设立对照组A和实验组B、C、D。实验组分别使用分子筛(Qiagen DyeEX2.0spin kit)、超滤膜(Amicon Ultra-0.5,100KD)、亲和层析(Qiagen MinElute Column)3种DNA纯化方法,对照组不做任何处理。结果与对照组相比,3种方法均可显著提高STR分型强度(P峰高<0.001),平均峰高约为对照组的4倍,并且3种方法对提高STR分型强度无显著差异(P峰高=0.249)。结论 PCR产物纯化能显著提高微量DNA的STR分型强度,可用于骨骼、脱落细胞等微量DNA检材的检验。 相似文献