wizard clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法在100例检案中,利用wizardcleanup直接对精子消化液进行纯化浓缩。采用profilerplus试剂盒进行复合扩增,产物经ABI310基因分析仪检测。结果从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论wizardcleanup处理混合斑,能有效去除女性成份,得到精斑DNA进行分型。     

wiazrd clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的 建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法 在100例检案中，利用wizard clean up直接对于精子消化液进行纯化浓缩。采用profiler plus试剂盒进行复合扩增，产物经ABI310基因分析仪检测。结果 从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论 wizard clean up处理混合斑，能有效去除女性成份，得到精斑DNA进行分型。     

应用EZ-tape胶带分离提取混合斑精细胞

在强奸案件中的DNA检验往往需要将混合斑中男性精子与女性阴道上皮细胞彻底分离.常规方法是剪取载体及其上面附着的混合斑迹一起进行差异裂解分离出精子细胞与女性阴道上皮细胞.在实践中,由于载体的介入可能会带来不利因素,加大了混合斑分离的难度,往往得不到男性精斑的DNA分型或者得到的是混合DNA分型.本研究根据混合斑的形成特点,利用EZ-tape胶带既不破坏载体又可多次粘取载体表面混合斑迹的特性,巧妙地克服了载体带来的诸多不利因素,提高了男性精子的检出率.     

DNA IQTM System试剂盒在精斑检验中的应用

在性犯罪案件中,常常遇到混合斑的DNA检验,其中精子DNA的提取是检验的关键。本研究利用DNA IQTM System试剂盒在精斑检验中取得了良好的效果,现报道如下。     

无精子精斑的STR基因型检验研究及在物证鉴定中的应用

在对强奸案的法医物证检验中,有时会遇到因行为人曾经做过输精管结扎术或行为人患无精子症,此时,行为人遗留下的精斑中无精子(精斑预试验和抗人精试验均阳性,但找不到精子),一般称为无精子精斑.对此种物证如沿用常规的精斑DNA提取方法检验,毫无结果.为了解决检案中对无精子精斑无法确定犯罪嫌疑人的问题,作者对此进行了试验研究,取得了满意的效果,并成功的应用于实际鉴定工作中.     

DNA检案中混合拭子提取方法的优化

正在强奸案中,阴道拭子作为犯罪证据,其重要性不可替代。通常精斑预实验阳性的阴道拭子检材即为混合斑的拭子,分离检验方法是采用差异裂解法(两步法)先除去精子外的其他细胞DNA,保留精子DNA[1],再通过DNA IQTMSystem提取精子DNA,获得纯精子的DNA图谱。但在实际操作中,混合斑中的阴道上皮细胞和精子DNA未作定量检测,使用该方法提取精子DNA时,往往会出现女性DNA去除不干     

DNase-Ⅰ纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA

目的研究脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA的方法在法医学中的应用。方法收集79份性犯罪案件混合斑检材,分别用DNase-I纯化结合碱性裂解法和差异裂解法提取精子DNA,采用STR荧光标记复合扩增体系进行16个STR基因座分型,并比较检验结果。结果应用DNase-I纯化结合碱性裂解法提取精子DNA,64例检材分型成功;应用差异裂解法提取精子DNA,57例检材分型成功;两种方法比较结果存在显著性差异(P=0.039),DNase-1纯化结合碱性裂解法提取精子DNA的STR分型成功率更高,成本低廉。结论DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA可提高检验成功率,操作简便,快速,易于自动化,适于法医学个体识别鉴定。     

DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA

目的研究脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA的方法在法医学中的应用。方法收集79份性犯罪案件混合斑检材,分别用DNase-I纯化结合碱性裂解法和差异裂解法提取精子DNA,采用STR荧光标记复合扩增体系进行16个STR基因座分型,并比较检验结果。结果应用DNase-I纯化结合碱性裂解法提取精子DNA,64例检材分型成功;应用差异裂解法提取精子DNA,57例检材分型成功;两种方法比较结果存在显著性差异(P=0.039),DNase-1纯化结合碱性裂解法提取精子DNA的STR分型成功率更高,成本低廉。结论DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA可提高检验成功率,操作简便,快速,易于自动化,适于法医学个体识别鉴定。     

受害者基因型的检测在精斑检验中的应用

长期以来，在办理强奸案件中，普遍认为提取犯罪嫌疑人家中的精斑不能作为法律上的依据。其实这是混淆了纯精斑和混有女性成分的混合精斑这两个概念。依据现代DNA分析技术，通过二次消化可以将混合精斑中的精子和阴道上皮细胞分离，再分别进行DNA检测，     

Maxwell 16裂解纯化法提取陈旧精子DNA的应用

目的利用Maxwell 16裂解纯化法从保存8年以上陈旧精斑检材中获取精子DNA。方法 8份陈旧精斑检材采用Maxwell 16裂解纯化法提取精子DNA,并采用Powerplex○R21试剂盒进行复合扩增,产物用AB3130型遗传分析仪检测,结果与常规方法进行对比。结果成功获得8份陈旧精斑检材精子STR分型。结论差异裂解配合Maxwell 16裂解在陈旧精斑检材精子DNA检验中效果明显。     

无精斑证据性犯罪案件其他物证DNA检验(附6例报告)

在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验.但由于种种因素的影响,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性,不能为性犯罪提供有力证据.笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证(如血迹、唾液斑、阴毛等),通过作DNA检验,为案件侦破提供了重要证据.现报告如下: 一、材料 自我室自1997年1月～1999年12月受理的PCR检验强奸案件6例,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等.     

PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.     

混合斑中女性成分鉴定2例

在强奸案件的检验鉴定中,一般只需对载体上(包括受害人阴拭、内裤、及现场提取的物品等)精斑中男性DNA成分与犯罪嫌疑人的血样进行比对,即可做出认定或排除的结论。但在某些特殊情况下,混合斑中女性成分的检验在案件鉴定中也起到很重要的作用。现报道两例如下。1案例材料案例1:     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅲ)——应用“Myo”DNA探针进行混合斑中精液的个体认定

本文利用蛋白酶K、SDS对精液和阴道液、精液和血液的混合斑进行前处理,除去女性阴道脱落上皮细胞和血液细胞成份获得精子。提取精子DNA,用“Myo”小卫星DNA探针杂交进行DNA指纹检验,获得了高度多态性的精子DNA指纹图谱,与同一个体血液DNA指纹图谱比较完全一致,实现了混合斑中精液来源的个体认定。在对20多起强奸案例混合斑的实际应用中,成功地认定了强奸罪犯。     

双面胶带法快速检出精子

在性犯罪案件中,确认精斑存在与否非常关键,而检出精子是认定精斑存在最简便、最可靠的方法,并且不需要特殊的试剂和仪器,同时也为案件以后进行DNA检验打下基础,适用于各基层实验室.作者在工作实践中,总结了一种简单实用的精子快速检出方法-双面胶带法,现介绍如下.     

用Chelex100法及有机溶剂提取法联合提取DNA扩增STR基因座的比较研究

为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率 ,本文用Chelex10 0法及Chelex10 0法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件 6份血斑及 6份混合斑中精子DNA ,并用PE公司ProfilerPlus系统复合扩增 ,ABI 310型基因分型仪检测。结果表明 ,常规采用Chelex10 0法提取血斑及精斑等生物检材DNA作STR基因座检验失败或所检测的位点较少时 ,应对Chelex10 0法提取的DNA上清液再用有机溶剂提取法提取 ,可极大提高DNA检验成功率。采用本文建立的Chelex10 0法联合有机溶剂提取法 ,提高了PCR扩增阳性率 ,对实际检案很有帮助 ;在PCR扩增前应常规进行DNA定量检验 ,否则对于重要检材应进行梯度扩增。     

差异提取试剂盒在混合斑DNA提取中的应用

目的评估差异提取试剂盒对混合斑样本中的精子和上皮细胞DNA分离提取的有效性。方法采用差异提取试剂盒,选择性裂解精细胞和上皮细胞,结合磁珠法分别对人为控制条件下制备的模拟混合样本和案件中的混合斑检材进行精细胞DNA和上皮细胞DNA的分离提取。对所提取的DNA进行定量分析和STR分型。结果该试剂盒能从精子和上皮细胞不同比例的混合斑中提取出高纯度的精细胞和上皮细胞DNA。结论该差异提取试剂盒适用于性侵害案件中混合斑检材的DNA提取。     

DNA IQ^TM系统在混合斑精子DNA检验中的应用

笔者在强奸案件混合斑精子的DNA检验中,以差异裂解法第一步消化去除女性细胞得到精子沉淀后,采用DNA IQTM系统直接提取混合斑中精子DNA,在200余份检材的检验中获得较满意结果。现将方法报告如下:1材料与方法1.1材料取自本实验室日常检案积累的混合斑样本216份。主要仪器和试剂采用9700PCR扩增仪(美国ABI公司)、ABI3100型遗传分析仪(美国ABI公司)、DNA IQTM系统(Promega公司)、AmpF1STRIdentifiler试剂盒((美国ABI公司)。1.2方法1.2.1 DNA提取参照差异裂解法,经过套管离心去除女性细胞后,得到沉淀精子,加入100~200ulDNA …     

中国汉族人群10个Y-染色体STR单倍型

Y染色体STR单倍型分析除了用于人类迁徙、种系发生和群体遗传学研究,还能在法医学鉴定方面发挥一定的作用,例如性侵害案件中混合样品分析、男性无精子精斑DNA检验和缺乏嫌疑父亲的亲权鉴定等.国内关于Y染色体单个或多个STR基因座的频率虽有研究报道,但多个基因座的单倍型统计数据较为少见.     

应用Differex~(TM)法提取混合斑中精子DNA

对混合斑中精子的检验,采用传统的Chelex-100两步消化法存在消化时间长、离心洗涤次数不易控制等缺点,一旦操作不当,就会因此而引起DNA混合、损失,导致PCR反应失败。本文应用D ifferexTM系统法,解决了部分混合斑检材的精子DNA提取问题,在实际的案件鉴定中取得了满意的效果。1材料与方法1.1案件检材所用检材系案件鉴定中含有精子的现场提取床单上的混合斑、被害人的短裤、擦拭用的报纸、被害人的阴道及口腔拭子,以及在室温下存放约1年的阴道拭子。1.2 DNA提取方法1.2.1 Chelex-100两步消化法[1]取适量检材剪碎,加入适量TNE,37℃水浴…