移液器使用不当导致DNA分型Ladder污染原因初探

在法医DNA分型检验中,如出现与等位基因标准对照物（Ladder）一样的等位基因,应注意Ladder污染[1]。本文对由于移液器使用不当,造成其头部或管道内壁DNA蓄积而导致Ladder污染原因进行分析,希望为相关检验提供借鉴。1材料与方法1.1样本 收集本实验室扩增区生物安全柜内5支日常使用的移液器（量程分别为200μL、100μL、20μL、10μL和2μL）,分别用超纯水清洗,取其清洗液为样本（共5份）,取用日常使用的移液器分装的PowerPlex 18D System试剂盒（简称PP18D）内的扩增混合物、引物和试剂盒内扩增用超纯水为样本（共3份）,以上共计8份样本为待测DNA模板。     

粪便DNA提取及检验

目的　研究人类粪便DNA的提取和检验方法。方法　 8人份粪便样本 ,磁珠法提取DNA后 ,进行STR复合扩增和mtDNAHVI区测序分析。结果　用 2种方法提取的粪便DNA ,STR复合扩增检验均未获成功 ;方法1提取的粪便DNA有 6个样本、方法 2有 7个样本获得了清晰可读的mtDNAHVI区序列 ,并与唾液对照样本DNA的序列完全一致。结论　用本文建立的方法提取粪便DNA ,不适于STR分析 ,可通过mtDNA测序分析进行检验。     

混合生物样本组分含量的计算方法及应用初探

在法医学实际检案中,混合样本的DNA检验经常遇到,也有相关的研究报告[1-3],但由于检材中混合样本浓度比例较复杂等问题,使检验结果的分析常存在不确定性。本文制备不同混合比例的混合样本进行DNA分型检验,希望通过对结果的分析,探讨精确计算混合样本各组分含量的方法,希望能为实际应用提供数据参考。     

DNATyper^(TM) 15试剂盒直接扩增检验纸质样本的研究

目的检验DNATyperTM15直接扩增系统的有效性。方法使用DNATyperTM15直接扩增系统对我国DNA数据库建库4种常见样本类型进行直接扩增检验。结果获得了血滤纸、公安部物证鉴定中心采血卡、博坤采血卡和FTA卡等样本类型的完整DNA分型。结论 DNATyperTM15直接扩增系统能够用于常见纸质样本的检验。     

3种STR试剂盒在二联体亲缘鉴定中联合应用1例

1案例资料 1．1样本及检验方法 要求进行亲缘关系鉴定的王某（男,42岁）和李某（女,13岁）的血液样本各1份。采用Chelex．100法提取模板DNA。分别采用Identifiler试剂盒（ABI公司,美国）、PowerPlex 21试剂盒（Promega公司,美国）、STRtyper-10G试剂盒（珠海科登生物工程有限公司）进行分型检验。     

葡萄胎的DNA检验

目的探讨一例强奸案中的葡萄胎样本的DNA检验及结果分析。方法用Identifiler试剂盒对葡萄胎样本和受害人血样进行荧光复合STR基因座扩增并分型。结果该例的葡萄胎在15个STR基因座上分型均为纯合子,应属于单精子受精的完全性葡萄胎。结论葡萄胎类型多种,对应着不同的DNA分型,在实际案件的检验中应引起注意。     

DNA检验技术在刑事案件中的应用

１凶杀案凶杀或盗窃案现场,有价值的物证常常是被害人或罪犯留下的血迹,通过DNA检验结果计算出现场血迹在种族人群中的偶合机率,如果达到（１０－９～１０－１５）,就可科学准确的表现是否可同一认定。即使是混合血迹（或混合精斑）也不再是不可逾越的障碍。例１,１９９９年５月３０日凌晨,在北京市石景山区发生了一起８名女青年被杀的特大凶杀案。从现场提取８０余处血迹与８名受害人血液样本,同时进行检验。经多个STR位点检验得出：第１,现场血迹与８名死者血样的检验结果进行比对,使每一处血斑均确定是何人所留,从而明确案…     

05式警用转轮手枪弹壳接触DNA检验方法的比较

目的比较05式警用转轮手枪弹壳表面接触性DNA检验方法,为实际检验提供参考和借鉴。方法制备40例击发后手枪弹壳的模拟样本,分别用两步转移法提取弹壳表面不同部位检材,采用两种DNA提取法和两种扩增试剂盒对样本进行STR分型检验,比较评价检验结果。结果避开发射药残留区域采用两步转移法提取样本,有助于提高检出率;Chelex-100联合Microcon-100法提取模板DNA的产量最高可达1.18ng,高于Mini M48试剂盒法(0.91ng);MiniFilerTM试剂盒的等位基因检出率(23.61%)高于IdentifilerTM试剂盒(6.41%)。结论采用选择适当区域提取检材,采用Chelex-100联合Microcon-100法提取DNA,经MiniFilerTM试剂盒扩增,进行弹壳接触DNA分型的效果较好。     

激光显微捕获技术用于尿液脱落细胞DNA检测

目的采用激光显微捕获技术（LCM）捕获尿液脱落细胞,并进行STR分型。方法收集10份健康成人尿液样本,根据储存时间分组,其中新鲜尿液组（≤24h）分别采用Chelex-100及LCM联合DNA IQTM提取法提取DNA,储存尿液组（〉24h）再分为4℃组和室温组,分别在4～30d内不同时间点采用LCM联合DNA IQTM提取法提取DNA;各组提取的模板DNA进行扩增及SRT分型检验。结果新鲜尿液组采用LCM联合DNA IQTM提取法提取DNA,所有样本均可检出全部基因座（16个）,采用Chelex-100法则在部分基因座上出现等位基因丢失、非特异性扩增、峰值低等现象;4℃储存10d和室温储存4d以内的尿液经检验可明确判读12个以上基因座,4℃20～30d及室温7d,可检出7个以上基因座。结论 LCM技术可用于尿液检材的DNA分型检验,且检材应尽可能4℃保存并尽快检验。     

应用自动化工作站提取常见生物样本DNA

目的建立使用自动化工作站提取法医案件生物样本DNA的方法。方法选用Biomek 3000自动化工作站,采用DNA IQTM系统及Chelex法对法医案件中常见生物样本进行DNA提取,荧光定量技术进行定量,PCR扩增16个STR基因座并与手工提取方法比较。结果与手工提取方法进行比较,选用自动化工作站结合使用DNAIQTM系统及Chelex法提取DNA可获得满意的STR检验结果。结论自动化工作站可用于法医案件中常见生物样本的DNA提取。     

水浸和洗涤血样本的DNA检验

目的对经水作用的血样本DNA分型检验结果进行分析探讨。方法全血样本分为两组,水稀释组用水将全血样本稀释5、10、20、25、30倍后制作血斑;洗涤组分为纯水手洗、肥皂弱洗、肥皂强洗、84消毒液浸洗和洗衣粉机洗等5种洗涤方式。所有样本用IQ试剂盒提取DNA,Identifiler PlusTM试剂盒扩增,并进行分型检测。结果血液稀释组中心部位检材,均无等位基因丢失,除30倍稀释样本外,峰高均衡性均大于70%;外周部位检材出现2～10个等位基因丢失,峰高均衡性均小于50%。洗涤组中除84消毒液洗涤样本未检出DNA谱带外,其余均无等位基因丢失,而峰高及均衡性以手洗和肥皂弱洗样本更好。结论经水稀释或洗涤剂清洗的血样本,即使联苯胺预实验结果为阴性,选取合适的检验部位,仍可获得DNA分型。     

游离缘指甲DNA检验1例

在法医日常检案中,指甲DNA检验需要拔取整枚指甲,消化指甲的甲体或甲根部分才能得到满意的DNA检验结果。甲体的前部DNA分型效果差,因此指甲的游离缘(free margin of nail),即指甲前缘延伸到离开甲床的部分,通常不作为核DNA检验的样本。     

Qubit~快速荧光定量系统在法医学中的应用

目的研究Qubit定量系统在法医学中的应用。方法使用Quant-iTTM试剂盒检测法医DNA样本并得出样本浓度。结果Quant-iTTM试剂盒能检测并定量各种生物学检材DNA样本。结论Quant-iTTM试剂盒能够应用在法医学检验中。     

交流DNA检验心得体会,共享检验成功经验——分享DNA检验成功经验,赢QIAGEN大奖活动!

<正>目前,法医DNA检验过程中,遇到痕量样本、污染样本、长时间保存样本等等都会影响到分析检测的准确性和可靠性。针对此类问题,《中国法医学杂志》社与QIAGEN公司联手举办"疑难检材成功经验的征集和分享活动",并借助《中国法医学杂志》社的网络/纸质媒体,给广大法医DNA检验工作者提供一个相     

雪地中尿液的DNA检验

尿液样本因为提取难度较大，很少有作为物证检材进行法医鉴定的案例，国内亦未见报道。现报告对雪地中遗留尿液进行法医 DNA鉴定的检案 1例，希望在此基础上建立一套尿液 DNA检验的较成熟的方法。     

Qubit?快速荧光定量系统在法医学中的应用

目的 研究Qubit 定量系统在法医学中的应用.方法 使用Quant-iTTM试剂盒检测法医DNA样本并得出样本浓度.结果 Quant-iTTM试剂盒能检测并定量各种生物学检材DNA样本.结论 Quant-iTTM试剂盒能够应用在法医学检验中.     

批量陈旧血样DNA的自动化检验

目的建立批量陈旧血样DNA自动化提取检验的方法。方法采用普通磁珠法和本文建立的磁珠法经TECAN Freedom EVO150—8型自动化工作站分别提取540份陈旧血样模板DNA,采用Sinofiler^TM试剂盒进行荧光标记复合扩增。结果采用普通磁珠法和本文所建DNA提取方法,在540份样本中获得全部基因座STR分型的样本分别为217份和488份,检验成功率分别为40．2％和90．3％。结论本文所建方法可显著提高大批量陈旧血样自动化检验成功率。     

批量提取微量DNA在案件检验鉴定中的应用3例

随着DNA检验灵敏度的提高,越来越多的案件需进行微量生物检材DNA的检验,本实验室应用96孔板批量提取微量生物检材DNA,大大提高了检案效率,在案件中发挥了重要作用。现介绍如下：1方法1.1 DNA提取取细轴棉棒用TES浸湿棉棒上棉签后擦拭送检物品（如绳索、胶带、打火机、螺丝刀等）上可能有脱落上皮细胞的部位,     

不同保存时间和不同精子数量精斑样本DNA分型比较

目的比较不同保存时间和不同精子数量精斑样本DNA分型的效果。方法制备精斑样本,保存10d的样本采用激光显微捕获30、20、15、10、5、1个精子,用于不同数量精子分型比较;保存10d、214d、375d的样本分别捕获30、20、10个精子,用于不同保存时间分型比较。比较各组检出率、等位基因丢失率和非特异性扩增率,采用χ2检验进行差异比较。结果①不同精子数量分型：捕获10个精子即可得到完整的DNA分型,且随着精子数增多,检出率逐渐提高而等位基因丢失率逐渐降低,30个精子等位基因丢失率为0%,1个精子则可达58.89%;②不同保存时间分型：总趋势是保存时间越短,捕获精子越多检出率越高,10个精子与20、30个精子组比较,均有显著性差异（P〈0.05）;等位基因丢失率及非特异性扩增率则随保存时间的延长而增加,相同保存时间的不同精子数量组之间和相同的精子数量的不同保存时间组之间比较,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论激光显微捕获精子数目和检材保存时间对DNA分型结果有直接影响。     

静电压痕仪检验光敏印章伪造指印初探

研究利用静电压痕仪检验光敏印章伪造指印的可行性，探究光敏印章伪造指印与手指遗留指印的静电压痕检验结果差异。以同一枚指纹为模板，分别制作8种不同光敏印油的盖、捺印指印样本及8种不同印台印油的捺印样本，用静电压痕仪对遗留5 d样本的正反面进行检验，并初步考察不同遗留时间（最长30 d）对检验结果的影响。结果表明：1）光敏印油捺印样本正面经静电压痕检验后，形成的痕迹对指印纹线的表现能力强于光敏印章盖印样本，但弱于印台印油捺印样本；2）静电压痕仪检验后的部分印台印油捺印指印，形成了超出红色印油范围的黑色补充纹线；3）光敏印油盖、捺印样本经静电压痕仪检验后，印痕周围均出现光晕状痕迹；4）静电压痕仪检验后，少数光敏印章盖印指印周围出现不完整章面印痕；5）对样本背面进行静电压痕检验，光敏印油盖、捺印样本均可显现出明显指印印痕，且边缘出现明显光晕状痕迹，印台印油捺印样本背面痕迹不明显；6）样本遗留30 d时，仍然能够依据上述5条实验现象对三类样本进行区分。静电压痕检验一定程度上能作为纸张上光敏印章伪造指印的有效检验方法之一，但还需就遗留时间、印油种类、盖印/捺印力度、章体新旧程度等因素对检验结果的影响...