Amelogenin等位基因丢失的研究现状

Amelogenin基因座作为性别标记包含于常用的商品化STR分型试剂盒中,被应用于法医亲子鉴定、个体识别和DNA数据库等。大量报道显示Amelogenin基因可发生变异,导致X染色体或Y染色体特异性产物扩增失败,即AMELX或AMELY丢失。AMELY丢失可导致性别判断错误,性别错判可误导侦查方向。下面对近年来国内外Amelogenin基因座等位基因丢失现象的研究现状进行综述,探讨Amelogenin基因座的变异频率、变异类型、变异机制及其对性别鉴定的影响和应对方法,为准确地进行法医物证性别鉴定提供帮助。     

用PCR扩增X-Y-特异片段性别鉴定的研究

采用5%Chelex-100处理方法提取 DNA,用 PCR 扩增 Amelogenin 基因片段检测血痕和毛根的性别。扩增一个样品只需1/10体积3mm~2血痕 Chelex-100处理液或1/10体积一根毛发 Chelex-100处理液(含模板 DNA)。100例血液样品结果显示,在男性可同时显现977bpX 特异片段和788bpY 特异片段,而在女性只观察到977bp X 特异片段,该方法用于性别鉴定可靠、灵敏、方便。     

男性个体Amelogenin基因座Y片段缺失1例

在法医学实践中．扩增Amelogenin基因是进行生物样本的性别鉴定的主要方法，并为大多数的商品化法医鉴定试剂盒如AmpFlSTR IdentifierTM（ABI）、PowerPlex（Promega）等所采用。但个体的Amelogenin基因如果发生突变，致X或Y特异片段扩增失败，则可能导致错误的性别判定。     

27例Amelogenin基因等位基因Y丢失分析

牙釉质蛋白基因(Amelogenin,以下简称Amel)DNA技术是目前普遍采用的性别鉴定技术手段.在X-Y染色体同源引物扩增检测Amel基因图谱上,男性显示为双峰,获得X和Y染色体扩增产物;女性显示为单峰,获得X染色体扩增产物 [1].但Amel-Y 缺失或异常都可导致无法获得Y 染色体扩增产物,从而导致性别的错判,...     

疑似Amelogenin等位基因丢失的检测与分析12例

目的观察并分析亲权鉴定案件中Amelogenin等位基因丢失的案例,探讨Amelogenin等位基因丢失的类型、机制以及对性别鉴定的影响和应对方法。方法选择经Si Fa STRTM 23plex DNA身份鉴定系统检测,女性出现Amelogenin X的峰面积与相邻杂合子峰面积一致或低于相邻纯合子峰面积的1/2,男性出现Amelogenin X丢失的样本,进行X-STR分型及Amelogenin X测序,同时对出现Amelogenin Y丢失的男性样本,检测Y-STR分型及Y染色体性别决定区(sex-determining region of Y,SRY)进行验证。统计Amelogenin等位基因丢失的类型及丢失率,分析出现变异的机制及影响。结果 1例男性Amelogenin X等位基因丢失,经测序证实为引物结合区突变;4例女性疑似Amelogenin X等位基因丢失,经测序证实出现引物结合区突变的仅为1例。7例男性出现Amelogenin Y丢失,其中SRY阳性5例,SRY阴性2例。5例SRY阳性案件中4例可检出部分Y-STR分型,1例未检出Y-STR分型,2例SRY阴性案件均未检出Y-STR分型。Amelogenin等位基因丢失率约为0.029%。结论 Amelogenin X丢失不影响性别判定,Amelogenin Y丢失可能对性别造成误判,需要检测Y-STR或SRY来明确性别,对于未检出Y-STR分型且SRY检测为阴性的"男性",建议进行染色体核型分析及性别分化相关基因检测以进一步明确性别。     

根据Y-染色体特异DNA序列鉴定牙齿性别

人类牙齿的性别鉴定,是法医学个体识别中的一个重要部分。作者们应用限制性内切酶 HaeⅢ、Sau3A 水解60颗牙髓 DNA,琼脂糖凝胶电泳分离酶解片段,在紫外灯下直接观察。根据 Y-染色体特异 DNA 序列,3.4kb 长片段的有无,判断牙齿的性别。为牙齿性别的法医学鉴定提供了一种简单、准确的新方法。     

用X-Y同源引物扩增鉴定人血痕性别的研究及应用

本文根据牙釉蛋白(Amelogenin)基因在x染色体第一内含子有6bp缺失的特性,用一对x-y同源引物.扩增x-y染色体特性DNA片段分别为106及112bp,并用PAGE电泳银染显带的方法检测扩增产物.本方法灵敏度高,实用性强.可对2mm~2血痕检材提取的DNA液1/10作出性别判定.对现场提取的生物检材.特别是微量、腐败、陈旧检材,均能较好的作出性别鉴定.室温放置16年的血痕也可检验.实际检案显示本方法简便、有效、无毒,易于推广.     

一种用于降解DNA样本的性别鉴定方法

目的　建立一种采用PCR技术对降解DNA样本进行性别鉴定的新方法。　方法　采用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置 5～ 15年的男、女血痕标本各 5 0例、毛发各 2 0例、骨骼各 2 0例以及现场提取 5 - - 2 0天的男、女腐败肌肉各 10例标本中提取的降解DNA样本进行扩增。用PAG( 9%T ,3 %C)电泳、银染显带检测扩增产物。　结果　所有样本均得到正确结果 ,男性检材表现为 83bp的Y特异性及 80bp的X特异性 2条谱带 ,而女性检材仅有 1条 80bp的X特异性谱带。　结论　用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便 ,是降解DNA检材性别鉴定十分理想的方法。     

一种用于降解DNA样本的性别鉴定方法

目的 建立一种采用PCR技术对降解DNA样本进行性别鉴定的新方法。方法 采用针对amelogenin基因X染色体外显子3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置5－15年的男、女血痕标本各50例、毛发各20例、骨骼各20例以及现场提取5－－20天的男、女腐败肌肉各10例标本中提取的降解DNA样本进行扩增。用PGA（9％T,3％C）电泳、银染显带检测扩增产物。结果 所有样本均得到正确结果,男性检材表现为83bp的Y特异性及80bp的X特异性2条谱带,而女性检材仅有1条80bp的X特异性谱带。结论 用针对amelogenin基因X染色体外显子3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便,是降解DNA检材性别鉴定十分理想的方法。     

Amelogenin基因遗传变异及其法医学应用研究进展

人类牙釉质蛋白基因(Amelogenin, AMEL)为X、Y染色体同源基因,分别称为AMEL-X和AMEL-Y。根据二者在扩增序列大小的不同可以确定性别,在法医学实践和临床医学等应用中具有重要意义。但是,AMEL基因在不同个体和人群中的遗传变异而导致性别决定并不是100%准确;通常由于特异性产物扩增异常,有可能导致性别错判。本文重点从AMEL基因的遗传变异、分型技术、以及引起性别误判的应对策略方面进行综述。     

亲子鉴定中女性Amelogenin性别基因座异常1例

正1案例1.1简要案情王某,女,28岁,要求对本人与领养孩子(女孩)之间有无亲生血缘关系进行鉴定,身份证显示王某社会性别为女,女性特征明显,据王某口述,有短暂月经史,现已停经。根据知情同意原则,采集王某与孩子的血样进行STR分型检测。因王某Amelogenin性别基因座检测结果显示其生物学性别与社会性别不符,故     

考古样品中Amelogenin同源基因的提取和检测

目的利用人类性染色体Amelogenin同源基因在X、Y染色体上序列长度的差异,选择设计引物,对考古样本进行古DNA性别信息研究。方法采用苯酚/氯仿-二氧化硅-超滤离心方法提取东岭墓葬群殉人骨骼、牙齿古DNA,PCR扩增,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离和检测古DNA扩增片段。结果8个墓葬16个样品中有7个样品出现阳性扩增检测,目标基因片段清楚,男性为二条带(X、Y),女性为一条带(X),牙齿样品检测成功率优于骨骼样品。结论改进的苯酚/氯仿—二氧化硅—超滤分离法是较好的古DNA提取方法,具有降低PCR抑制剂、消耗成本低和提取成功率高等特点。基于人类X、Y染色体Amelogenin同源基因的古DNA性别分析方法可成为分子考古重要的技术方法。     

扩增X—Y染色体同源性基因鉴定骨性别

对于完整或较完整的人体骨骼，根据骨的形态特点或采用仪器测量、X线检查等进行骨性别判定，其准确性较高。而在碎尸、白骨化、生物考古、灾难性事故等情况残存的遗骸就难以用形态学方法确定性别。本文采用PCR方法，特异性扩增骨组织X－Y染色体DNA同源性基因序列，鉴定骨组织的性别，现报告如下。材料和方法一、实验材料骨组织取自本系户检肋骨或附属医院骨科手术截肢骨，约4cm2大小，共46例骨样本，同时取相对应个体的血样作对照。二、实验方法1．引物合成根据NakahoriY设计[1]，X－Y染色体同源性引物序列由美国Researchgenetics合成…     

扩增X—Y同源Amelogenin基因内含子在性别鉴定中的应用研究

本文用一对针对X－Y同源的Amelogenin基因第一内含子的引物，于同一试管中分别扩增出针对于x和Y染色体的特异性DNA片段：106bp及112bp的PCR产物，经聚丙烯酰胺凝胶电泳后用银染法观察扩增结果，取得了满意的效果．对50pgDNA模板室温放置16年的血痕及单根毛发、烟头等检材均可得到明确的性别鉴定结果．本实验证明该方法简便、灵敏、可靠、特别适用于腐败降解检材的法医学性别鉴定．     

性别鉴定中amelogenin基因座变异的研究进展

Amelogenin基因座变异,分为amelogenin引物结合区突变和包含amelogenin基因座的Y染色体微缺失两种类型,以后者最为常见。Amelogenin引物结合区突变的发生机制是核苷酸点突变,包含amelogenin的Y染色体微缺失的发生机制可能是非等位同源重组或者非同源末端连接。在全世界人群中,位于印度次大陆地区的印度人群、斯里兰卡人群和尼泊尔人群amelogenin变异率非常高。Amelogenin变异对生育能力和表型影响非常小,但在性别鉴定中会导致错误的性别鉴定结果。采用包含常染色体STR基因座、amelogenin基因座和多个Y-STR基因座的复合扩增试剂盒进行检测可有效避免因amelogenin变异导致的性别误判。     

人类Y-染色体STR研究进展

人类Y -染色体STR(shorttandemrepeat)是指存在于Y -染色体上特异碱基短串联重复片段 ,又称微卫星DNA(microsatelliteDNA)。人类Y -染色体约有 5 0Mb个核苷酸 ,其中包括STR在内的重复序列约占 40 % ,不同个体的重复次数不同 ,具有个体差异性。 1976年CookeH等[1 ] 首先报道了存在于人类Y -染色体上的串联重复序列 ,为人类遗传学和法医学的研究开辟了一条新途径。继而 ,学者们[2～ 7] 对其重复序列进行了进一步的研究 ,并应用于实际工作中。WolfU等[8] 还对其分子生物学特征进行了研究。研究表明Y -染色体的串联重复序列 ,尤其是ST…     

扩增Amelogenin基因用于生物检材种属鉴定

目的扩增Amelogenin基因测定血痕或组织的种属,以确定在法医学检验中的应用价值。方法收集猪、羊、马等10几种常见动物的血痕或肌肉组织,应用PCR扩增Amelogenin基因,PAGE电泳,银染后观察结果。结果哺乳动物猪、牛、狗、羊、马、驴动物血痕扩增产物为1条带,片段长度102bp。猕猴检见106bp和112bp两条带,与人血痕没有区别。兔、猫、鼠血痕未检出特异性片段。其它常见物种鳝鱼、青蛙、鸭、鹅、鸽、鹌鹑、麻雀等均未见扩增产物。结论扩增Amelogenin基因进行种属鉴定,方法简单,灵敏度高,可应用于法医检案。     

1例Turner患者Amelogenin和STR基因座分型及核型分析

应用Amelogenin基因座和染色体核型分型技术,对一名10岁,社会性别为女性、Amelogenin基因座为＂X,Y＂的儿童进行亲子鉴定,结果否定女童的亲子关系并判断女童是Turner综合征患者,现报道如下。     

用Y—染色体特异DNA探针鉴识微量干血痕性别的研究

法医鉴识干血痕性别,通常是用盐酸阿地平染色观察 Y—小体的方法。重组 DNA 技术的发展与应用,为法医物证检验开辟了新的领域。本文用 Y—染色体特异 DNA 探针鉴识干血痕性别的成功,为法医的血痕性别签定,提供了一种新的检验方法。     

人类Y-染色体STR研究进展

人类Y-染色体STR(short tandem repeat)是指存在于Y-染色体上特异碱基短串联重复片段, 又称微卫星DNA(microsatellite DNA).人类Y-染色体约有50 Mb个核苷酸,其中包括STR在内的重复序列约占40%,不同个体的重复次数不同,具有个体差异性.1976年Cooke H等[ 1]首先报道了存在于人类Y-染色体上的串联重复序列,为人类遗传学和法医学的研究开辟了一条新途径.继而,学者们[2～7]对其重复序列进行了进一步的研究,并应用于实际工作中.Wolf U等[8]还对其分子生物学特征进行了研究.研究表明Y-染色体的串联重复序列,尤其是STR,是人类重要的遗传标记,对人类遗传学和法医学的研究具有重要的理论意义及实用价值.